培养基检出法。第四步：鉴定缺陷型：生长谱法。 3）检出缺陷型：
常用生长谱法，即在基本培养基中加入某种物质时，能生长的菌便是某种物质的缺陷型。 首先鉴定需要哪一大类生长因子，可用天然产物的混合物检测，其次鉴定具体因子
5. 微生物染色体以外的遗传物质有哪些类型？
除病毒外,微生物都有细胞结构,都是以DNA为遗传物质,原核细胞就是裸露的环状DNA,真核细胞就是与组蛋白结合的线装DNA（染色体）.它们确实都含有RNA,但不是作为遗传物质,而是信使RNA、转运RNA、核糖体RNA,参与遗传信息的转录和翻译.
病毒又分为真病毒、类病毒、拟病毒、朊病毒.对于真病毒、类病毒和拟病毒,有的种是以DNA为遗传物质,有的则是RNA.朊病毒比较特殊,它是一种有侵染能力的蛋白质,不含DNA或RNA,它在寄主体内诱导具有相同序列的蛋白质发生构象改变,而产生跟它一样的致病性蛋白质.
6. 微生物突变表型有哪些类型？
形态突变型: 微生物中在菌落类型、细胞形态等方面也曾分离到各种形态的突变型。这类突变型无特殊营养要求，在基本培养基上能生长繁殖。据信形态变异的原因是由特定的生化反应遗传的阻断的结果。推测基本上是与生物化学的突变具有共同点。
生化突变型: 生化突变型 biochemical mutant 由于基因突变，参与代谢系的酶的活性降低或缺失，这突变型称生化突变型。其突变性状可用生化的方法鉴别，与可见的形态突变型迥然有别。代表性的例子如与氨基酸、维生素、核酸碱基等合成代谢有关的酶失活的营养
突变型，以及呼吸突变型、抗药突变型等。它们不仅广泛用于遗传学分析，而且还用于活体内代谢途径的研究和物质的生物测定等。还有许多未知用途。
致死突变型:导致个体死亡的突变型，在高等动植物中常导致个体在性成熟前死亡。致死突变型对于致死的个体来说是不利的，但有利于维持自然群体的杂合状态。某些致死突变型的生物品系可用于个体发育的研究及育种实践，所以受到人们的重视。
条件致死突变型: 指在某一条件下具有致死效应，而在另一条件下没有致死效应的突变型。这类突变型常被用来分离生长繁殖必需的突变基因。因为这类基因一旦发生突变是致死的(例如，为DNA复制所必需的基因)，因而也就不可能得到这些基因的突变。 7. 什么是原生营养型和营养缺陷型？
原生营养型（生长因子自养型微生物）：它们不需要从外界吸收任何生长因子，多数真菌、放线菌和不少细菌，如E.coli等。
营养缺陷型（生长因子异养型微生物）：因丧失合成某些生活必需物质的能力，不能在基本培养基上生长的，突变型菌株。它们需要从外界吸收多种生长因子才能维持正常生长，如各种乳酸菌、动物致病菌、支原体和原生动物等。
8. 什么是微生物诱变育种？常用的方法有哪些？
1诱变育种是指利用人工诱变的方法获得生物新品种的育种方法.其原理是基因突变.人工诱变的方法包括：物理方法（X射线、射线、紫外线、中子、激光、电离辐射等）、化学方法（碱基类似物、硫酸二乙脂、亚硝酸、秋水仙素等）.
2诱变育种是利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群,
促进其突变率大幅度提高,然后采用简便、快速和高效的筛选方法,从中挑选少数符合育种目的的突变株,以供生产实践或科学研究用.(当前发酵工业和其他生产单位所使用的高产菌株,几乎都是通过诱变育种而大大提高了生产性能的菌株.诱变育种除能提高产量外,还可达到改善产品质量、扩大品种和简化生产工艺等目的.诱变育种具有方法简单、快速和收效显著等特点,故仍是目前被广泛使用的主要育种方法之一.)
9. 如何识别营养缺陷型及营养缺陷类型？
鉴别:营养缺陷型只能在完全培养基上;野生型既可以在完全也可以在基本培养基上生长．
一、筛选营养缺陷型菌株的一般步骤和方法
①诱变 常用紫外线等物理方法和化学诱变剂等诱变形成大量营养缺陷型菌株.用15W或20W紫外灯管,距离15cm～30cm,照射10sec～20min.在照射受试菌前,灯管须预热20min,使灯光稳定.菌悬液要磁力搅拌,使所有单细胞或单孢子均匀受到照射.特别要注意,应在黑暗或红外光下操作,接种后器皿用黑布包严,防止发生可见光的修复作用. ②淘汰野生型
a）抗生素法 某些抗生素能杀死生长繁殖着的微生物,而对处于休止状态的微生物无杀伤作用.如青霉素能抑制细菌细胞壁肽聚糖的生物合成,制霉菌素可损伤真菌细胞膜,二者可分别杀死生长繁殖着的细菌、真菌.
b）菌丝过滤法 适用于放线菌、霉菌等丝状微生物.在基本培养基中野生型孢子能萌发长成菌丝体,而营养缺陷型孢子则不生长.将经诱变处理的孢子接种于液态基本培养基中,振荡培养10h～12h,使原养
型萌发（以肉眼刚能看见菌丝为度）,然后以滤纸、棉花或玻璃过滤漏斗过滤,菌丝被滤除,未萌发的缺陷型孢子能顺利通过,从而达到富集营养缺陷型的目的. ③检出缺陷型的常用方法
a）逐个测定法（点种法）。把经诱变处理并淘汰野生型后的菌液在完全培养基上涂布分离,将培养后长出的每一个菌落分别点种在基本培养基和另一个完全培养基上,凡在基本培养基上不能生长而在完全培养基的相应位臵上能生长的菌落,表明其为营养缺陷型. b）夹层培养法。经诱变处理后的菌液,稀释后与基本培养基混匀并倾入平皿中,待凝固后,再加上一薄层不含菌的基本培养基.培养后在皿底将长出的菌落做上标记.然后加上一层完全培养基,再经培养后,新出现的菌落多数是营养缺陷型（图3－31）.此法适用于兼性厌氧的细菌.
C）影印法。 将丝绒包在直径小于平皿的圆柱台上,固定,作为影印接种工具,灭菌备用.将经诱变处理并淘汰野生型的菌液涂布于完全培养基表面上,培养,待长出菌落后,用影印接种工具在此平板上轻按一下,然后在另一基本培养基平板上按一下.经培养后在基本培养基上不长而在完全培养基的相应部位上生长的菌落,为营养缺陷型. ④鉴定营养缺陷型——生长谱法 将检出的缺陷型菌株接种在完全培养基上培养,把生长的菌体或孢子洗下,离心清洗后制成浓度为107个／ml～108个／ml的菌悬液.取0.1ml该悬液与基本培养基混匀倒皿,冷凝并稍干燥后,在分区加沾有各种营养物的圆滤纸片,培养,观察生长反应.
第七章 名词解释：
1.防腐：防止或抑制霉腐微生物在食品等物质上的生长 2.纯培养：从单个细胞或单个孢子繁殖得到的后代 3.消毒：杀死或灭活病原微生物（营养体细胞) 4.世代时间：细菌在对数期每分裂一次所需时间 5.灭菌：杀死包括芽孢在内的所有微生物
6.致死温度：在10min内杀死某种微生物的高温界限
一、从-190 度-250 温度范围内，对微生物学工作者关系较大且有代表性的温度（包括生长、抑制、保
藏、杀灭等）有哪些？试列表分类进行 说明。 -196℃——液氮保存菌种 -70℃——干冰保存菌种 -20℃——一般试剂短期保存 4℃——生物试剂临时保存
25~28℃——霉菌、酵母、放线菌培养温度 32~37℃——细菌培养
63~66℃或70℃——巴斯德消毒法 121℃——高压蒸汽灭菌 160~170℃——干热灭菌
二．取1g 某土壤样品，稀释 107 倍，将该稀释液 0.1ml 注入平板培养基并分散均匀，设重复五个。培养2-3天后，计数五个重复平板形成的细菌菌落数分别为 26 26，38 38，29 29，31 31，36 36，请计算出每克该土壤样品中细菌的数量。