的洗涤、血红蛋白的释放分离血红蛋白溶液、透析。③洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，你如何知道红细胞已洗涤干净？
离心后的上清液没有黄色④分离红细胞时对离心速度和离心时间的要求是低速短时间离心，⑤若离心速度过高和时间过长结果会怎样？离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度。 (3)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析，这就是样品的粗分离。 ①透析的目的是去除相对分子量较小的杂质。
②透析的原理是透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内。
(4)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。①样品纯化的目的是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂蛋白除去。
②血红蛋白有什么特点？血红蛋白呈现红色 。这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？在凝胶色谱分离时可通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作。
23.1970年，特明和巴尔的摩证实了RNA病毒能以RNA为模板合成DNA，并发现了催化此过程的酶。图为形成cDNA的过程和PCR扩增过程示意图。请据图回答：
(1)催化①过程的酶是逆转录酶。(2)③过程也称为DNA的变性，此过程在温度高达90℃～95℃时才能完成，说明DNA分子具有稳定性。(3)由图中信息分析可知，催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，两者在作用特性上的区别是⑤过程的酶耐高温。
(4)鸡肉嫩而不韧、味美鲜香。其加工过程中添加了从木瓜中提取的酶制成的“嫩肉粉。”下列有关嫩肉粉的叙述中，正确的( )
A．“嫩肉粉”可能是通过催化细胞间的纤维素水解而实现“嫩肉”的 B．与高温蒸煮相比，“嫩肉粉”是通过降低反应活化能而实现“嫩肉”的 C．“嫩肉粉”应在蒸煮鸡肉时加入，才能实现“嫩肉”
D．“嫩肉粉”是一种化工产品，不利于人体健康，实际中能少则少、能无则无
24．血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O2和部分CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。
(1)将实验流程补充完整：A为血红蛋白的释放，B为样品的加入和洗脱。凝胶色谱法的基本原理是根据相对分子质量的大小而达到蛋白质分离的有效方法。
(2)洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白(血浆蛋白)，洗涤次数过少，无法除去血浆蛋白；离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞_一同沉淀。达不到分离的效果。洗涤干净的标志是离心后的上清液中没有黄色。释放血红蛋白的过程中起作用的是蒸馏水和甲苯 。 (3)在洗脱过程中加入物质的量浓度为20m mol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0)的目的是准确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致 。如果红色区带均匀一致的移动，说明色谱柱制作成功。
5．下图为细胞内DNA复制过程示意图，该过程在体外也可进行，以获得大量相同的DNA片段，该项技术称之为PCR技术，又称多聚酶链式反应，请分析回答：
(1)PCR过程与细胞内DNA复制相比，主要有两点不同：
PCR过程的引物是一小段单链DNA或RNA，而细胞内DNA复制的引物是RNA、PCR过程是高温变性解旋，不需要解旋酶 。
(2)PCR技术过程的三个步骤：变性 、复性、 延伸 。
(3)假设PCR过程中，只用一条DNA片段作为模板，请计算30次循环后，反应物中大约有多少个这样的DNA片段？2(4)PCR技术能在几小时内将极微量的DNA片段特异性地扩增上百万倍，从而解决了样品中DNA含量低，难以分离的难题。试举两例，说明PCR技术的应用。刑侦案件；亲子鉴定；凝难疾病的诊断；基因序列分析等
25. 某兴趣小组就“食盐浓度和发酵时间对泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量的影响”开展了研究。请帮他们完成此探究实验。 (1)实验原理：
在酸性条件下，亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸和N-l-萘基乙二胺结合形成紫红色（或玫瑰红
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色）色化合物。用 比色法 法可估算亚硝酸盐含量，用 分光光度计（光电比色法）可进行定量测定亚硝酸盐含量。
(2)实验材料：盐、水、白萝卜。不选用胡萝卜作为材料的原因胡萝卜中的色素影响测定 。 (3)实验步骤： 第一步：泡菜制作
选取l、2号两只相同的泡菜坛，在每个坛中加入洗净的新鲜白萝卜0.6kg，再分别倒入相同量的煮沸并冷却的5%和10%的盐水，将坛密封，置于同一环境中。 第二步：亚硝酸盐含量测定
封坛前进行第一次取样测定亚硝酸盐含量，作为第1天数据，以后每天进行定时测定，两周后不再测定。某同学用亚硝酸钠标准溶液和分光光度计制作出下图所示的标准曲线，某天从某泡菜坛中所取样品经处理后经分光光复计测定，OD值为0.0269，根据标准曲线得到的亚硝酸盐浓度为0.2 μg/ml,已知其所取样品为25g泡菜(m1)，样品处理液总体为为500ml(V1)，测定用样品液体积是10ml(V2)，测定用样品液加显色液处理定容后体积为25ml，经计算这坛泡菜中亚硝酸盐含量(X1)为 10 mg/kg。
(4)实验结果及分析（见上右图）。
根据图中数据，可知在腌制过程中的第3 天，泡菜中的亚硝酸盐含量达到最大值，若要食用，最好在第 11 天后比较好。两坛相比， 2 号坛泡菜更适于食用。 26. 以下是制作果醋的流程示意图。试回答下列有关问题。
实验原理：醋酸菌是一种好氧细菌，只有在氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇最终转变成醋酸。
(1)醋酸菌的新陈代谢类型是异养需氧型。
(2)某同学设计了上图所示的装置。装置中充气口的作用主要是在醋酸发酵阶段通入无
菌空气；排气口排出的主要是 C02（气体）。
酶(3)在酒精发酵阶段主要发生的化学反应是 C6H1206???2C2H50H+2C02+能量（总反应式）。
(4)若发现此过程中装置内温度有所上升，这是由于 微生物呼吸产生的能量中一部分以热能形式释放的缘故。
(5)醋酸菌将葡萄糖或乙醇转化成醋酸的目的是获得生命活动所需的物质和能量(ATP)。 27. 右图为酿制葡萄酒的两个简易装置，请据图分析回答：
（
1）果酒的制作离不开酵母菌，它的新陈代谢类型是异养兼性厌氧型。
（2）在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。 （3）甲装置中，A液体是葡萄汁，NaHCO3溶液的作用是吸收酵母菌酒精发酵产生的CO2 ； 与乙装置相比，甲装置的优点是 既能及时吸收（发酵产生的）CO2，又能减少被杂菌污染的机会。
（4）葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，这是因为既为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气，又防止发酵旺盛时汁液溢出。
（5）果汁发酵后是否有酒精产生，可用重铬酸钾来检验。在酸性条件下，该试剂与酒精反应呈现灰绿色 。在果酒酿造过程中，如果果汁灭菌不严格，含有醋酸杆菌 ，在酒精发酵旺盛时，醋酸杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸? 不能 。理由是：酒精发酵时是无氧环境，而醋酸发酵需有氧。
28．腐乳是我国民间传统发酵食品，味道鲜美，营养丰富，风味独特，易于消化。请回答有关问题：
(1)在腐乳的制作中，起主要作用的生物是什么？它与乳酸菌在结构上的主要区别是什么？ 毛霉。_毛霉有成形的细胞核。
(2)腐乳含有丰富的氨基酸、甘油、脂肪酸等小分子物质，与此有关的物质变化有哪些？参与这些物质变化的酶有哪些？
蛋白质→多肽→氨基酸； 脂肪→甘油、脂肪酸。 蛋白酶、脂肪酶。
(3)有腐乳的制作过程中需加盐腌制，用盐腌制的目的是什么？为何要控制盐的用量呢？ 用盐腌制的目的：①盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质；②加盐可以析出豆腐的水分，使豆腐块变硬，在后期制作过程中不会过早酥烂；③有调味作用。
盐的浓度过低，不足以抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高，会影响腐乳的口味。
(4)在腐乳的制作中，卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。请问卤汤中酒的含量为何应控制在12%左右？酒精含量过高，腐乳成熟的时间将会延长；酒精含量过低，不足以抑制微生物生长，可能导致豆腐腐败。
(5)豆腐乳的品种很多，风味各异，你知道红方腐乳、糟方腐乳和青方腐乳在辅料上有何区别吗？红方腐乳因加入红曲而呈深红色；糟方腐乳加入酒糟而糟香扑鼻；青方腐乳不加辅料，用豆腐本身渗出的水加盐腌制而成。。
29．农村中泡菜的制作方法：将新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗并用白酒擦拭过的菜坛中(泡菜坛一般是两头小中间大的陶器，坛口有坛沿，凡裂缝的菜坛不能使用)，然后向坛中加入盐水，香料及一些“陈泡菜水”，密封后置于阴凉处，最适环境温度为28～32℃。有时制作的泡菜会“咸而不酸”或“酸而不咸”，前者是用盐过多，后者是用盐过少。在实验室或工厂生产泡菜，还要跟踪检测泡菜腌制过程中产生的亚硝酸盐含量。 (1)用白酒擦拭泡菜坛的目的是_消毒。
(2)菜坛为什么要密封？若菜坛有裂缝，可能会出现什么结果？
因为乳酸菌为厌氧微生物，密封后可造成缺氧环境；菜坛有裂缝，将导致乳酸菌不能正常生长，而一些杂菌大量繁殖，泡菜会变质。
(3)若制作的泡菜“咸而不酸”最可能的原因是什么？盐过多，抑制了乳酸菌的发酵。 (4)加入一些“陈泡菜水”的作用是提供乳酸菌菌种。
(5)制作泡菜的过程中，有机物的干重如何变化？菜坛内有机物的种类如何变化？ 有机物干重减少； 种类增加_。
(6)关于测定亚硝酸含量实验操作的有关叙述，正确的是( ) A．泡菜制作需要配制盐水，其中盐与水的质量比为4∶1
B．在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色染料 C．制备样品处理液，加入氢氧化铝乳液的目的是去色素等杂质，得到澄清溶液 D．泡菜腌制的时间长短会影响亚硝酸含量，温度和食盐的用量不影响
练一练(2011年高考海南卷)许多植物含有天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄
荷叶提取薄荷油。回答问题：
(1)薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用________(鲜、干)薄荷叶作原料，其原因是______________________________________________________。
(2)用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是________，原理是____________。
(3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是
__________________。常用于分离油层和水层的器皿是________。分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是_____，除去固体硫酸钠的常用方法是________。
答案：(1)鲜 薄荷油易挥发，鲜薄荷叶中薄荷油含量高 (2)乙醚 薄荷油能溶于乙醚，且乙醚沸点低、易蒸发 (3)使乳化液分层 分液漏斗 吸去油层中的水分 过滤
练一练 下表为牛肉膏、蛋白胨培养基的成分列表，据此回答：
成分 含量 牛肉膏 0.5 g 蛋白胨 1 g NaCl 0.5 g H2O 100 mL (1)蛋白胨在培养基中的作用是__________________________________。 (2)要用此材料配制观察细菌菌落状况的培养基，还需添加的成分是_____。 (3)表中各成分含量确定的原则是____________________________ (4)培养基配制好后，分装前应进行的工作是______________________。 (5)从配制培养基到培养完成，所采用的预防杂菌感染的方法是_________。 (6)在培养基凝固前要搁置斜面，其目的是__________________。
答案：(1)提供碳源、氮源、生长因子 (2)琼脂(或凝固剂) (3)所培养的微生物对各营养成分的需要量 (4)调pH (5)高压蒸汽灭菌、灼烧接种环、酒精棉球擦手、棉塞塞试管口、在火焰旁接种 (6)扩大接种面积新课标第一网
练一练 自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分
离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤：①制备稀释倍数为10、10、10、10、10的系列稀释液。②用稀释涂布平板法接种样品。③适宜温度下培养。结果分析：
(2)一同学在稀释倍数为10的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2 mL)__________。
(3)用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量__________，因为_________。 (4)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？
答案： (2)1.17×10(3)多 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的是一个菌落(4)不能。因为杂菌可能来自培养基或来自培养过程。
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