5 安全警告与应用限制
使用移液器前请参阅本操作手册。为了保证用移液器安全无误地进行实验,请务必注意 以下安全警告:
1.1 移液
— 只有装上移液器吸嘴后才能使用Reference系列移液器 — 当移液器吸嘴吸满液体时切勿将移液器水平放置
— 转移感染性、放射性和/或毒性等危险液体时,请参阅本国相关的安全警告
— 转移有机溶剂及侵蚀性化学物质时,请注意查对所用移液器吸嘴(PP=聚丙烯)与移液器
是否适宜
— 转移物理性质有别于水的溶液时(如甘油),按5.2部分所述检查排液体积
— 避免移液器、移液器吸嘴及所转移液体间的温差,因这可能导致排液体积的不准 — 转移高蒸汽压液体时亦可能发生上述情况 1.2 养护
— 勿使液体进入移液器
— 切勿使用丙酮或其他侵蚀性液体清洗移液器 — 仅使用原装零配件
2、技术指标
2.1 固定量程 型号 Eppendorf 吸头 系统误差 随机误差 μl μl Inaccuracy (Imprecision; CV) 1 light gray 0.5-20 < 1.8 % ± 2.5 % 2 5 10 10 20 25 50 100 200-1000 1500-2500
light gray light gray light gray yellow yellow yellow yellow yellow blue red 0.5-20 0.5-20 0.5-20 2-200 2-200 2-200 2-200 2-200 50-1000 500-2500 ± 2.0 % ± 1.5 % ± 1.0 % ± 1.0 % ± 0.8 % ± 0.8 % ± 0.7 % ± 0.6 % ± 0.6 % ± 0.6 % < 1.2 % < 0.8 % < 0.5 % < 0.5 % < 0.3 % < 0.3 % < 0.3 % < 0.2 % < 0.2 % < 0.2 % 2.2 可调量程 型号 μl 0.2-2.5 dark gray Eppendorf 吸头 量程 μl μl 0.1-10 0.25 1.25 2.5 系统误差 Inaccuracy ± 12.0 % ± 2.5 % ± 1.4 % ± 5.0 % ± 2.5 % ± 1.5 % ± 1.0 % ± 3.0 % ± 1.0 % ± 0.8 % ± 5.0 % ± 1.2 % ± 1.0 % ± 3.0 % ± 1.0 % ± 0.8 % ± 1.0 % ± 0.9 % ± 0.6 % ± 1.4 % ± 1.1 % ± 0.6 % ± 3.0 % ± 1.0 % ± 0.6 % ± 1.5 % ± 0.8 % ± 0.6 % 随机误差 (Imprecision; CV) < 6.0 % < 1.5 % < 0.7 % < 2.8 % < 1.8 % < 0.8 % < 0.4 % < 2.0 % < 0.5 % < 0.3 % < 1.5 % < 0.6 % < 0.3 % < 0.7 % < 0.3 % < 0.15 % < 0.3 % < 0.3 % < 0.2 % < 0.3 % < 0.3 % < 0.2 % < 0.3 % < 0.2 % < 0.2 % < 0.3 % < 0.2 % < 0.2 % 0.5-10 Light gray 0.5-20 0.5 1 5 10 2-20 Light gray 0.5-20 2 10 20 2-20 yellow 2-200 2 10 20 10-100 yellow 2-200 10 50 100 50-200 yellow 2-200 50 100 200 50-250 blue 50-1000 50 100 250 100-1000 blue 50-1000 100 500 1000 500-2500 red 500-2500 500 1000 2500 技术参数仅适用于Eppendorf 的移液枪头。
根据ISO 8655,对带空气排带的活塞驱动移液器的测试,需要使用具有 标准湿度阱的精密天平。 测定数值:
10,脱气的,双蒸水,20°C—25°C,容许±0.5°C;
移液枪头预湿;贴着容器内壁排液;由于蒸发危险性,<10μl的量程测试,必须移去
称重容器。
3、功能原理
Reference系列移液器均为活塞驱动移液器,其操作基于空气排带原理。 Reference系列移液器包括固定量程、连续可调移液器。
控制键为多功能的。移液器的功能运行取决于控制键按下的程度。 移液器操作前先进行以下三步骤: 1、计量档
按住控制钮到第一档。液体体积计量,吸入并排出液体。 2、吹出
再将控制钮向下按到第二档。 吹出吸嘴内剩余液体。 3、退头
将控制键按到底。 移液器枪吸头脱卸。
4、操作
可给每只移液器做标记,贴在移液器顶部的可以高压消毒的标签上可以用永久性的标 记笔作记号。
4.1 移液量设定
按住移液器侧面凸钩同时旋转控制钮。
建议从高向低设定移液量,例如 首先提到设定量以上然后返回到低值。
4.2 移液器吸嘴
切勿不连接吸嘴即进行移液!
移液器控制钮的颜色与标准吸嘴盒架的颜色一致,可帮助您选择恰当的吸嘴。 当转移性质有别于水的溶液时请参考4.5部分的建议。
4.3 吸液
— 所吸液体应从适合的容器中取出 — 连接恰当的吸嘴(使用颜色对照) — 按下控制钮至第一档(计量档)
— 垂直执移液器将吸嘴浸入液面下3mm — 使控制钮缓慢滑回原位 — 缓慢将吸嘴拉出液面
— 用不含纤维的纤维素材料擦拭遗留的液体。以确保吸嘴外壁无液体
4.4 排液
— 将吸嘴以一定角度抵住容器内壁
— 缓慢将控制钮按至第一档并等待约1-3秒(等待时间依移液量而定) — 将控制钮按至第二档使吸嘴完全排空 — 按住控制钮,沿容器内壁拖出吸嘴 — 慢放控制钮
— 将控制钮按至最后一档弹射出吸嘴
切勿在吸嘴中有液体时平置移液器,以防液体流入移液器!
4.5 特别注意
为达高精确度,我们建议使用新移液器吸嘴时反复吸、排2-3次以预湿。 最后将吸嘴离开液面,抵在容器内壁将吸嘴完全排空。 解释:为什么移液器吸嘴需要预湿?
以预先湿润的吸嘴对特殊性质液体进行补偿。
液体(血清、去污剂)会在吸嘴内壁形成一层薄膜,因此首次排出的液体量将过少。 当移血清或高黏度液体时,吸、排液时均应多等待数秒。
5、测试/调整
移液器的枪身号位于控制钮上。
5.1 测试
体积<1ul时:建议采用分光光度计测试。若需要,我们可以提供有关“测试小量程的精确度的分光光度计测试”手册。
体积≥1ul时:对移液器的测试可通过在指定灵敏度的分析天平上称量双蒸水重量进行。 双蒸水、称量容器、移液器和移液器吸嘴须达同一温度! 计算液体体积时,用称量的双蒸水重量除以其密度(20°C时为0.9982)。 体积为1-10ul:
测试时自一盛满水的已称容器中吸出一定体积水。 体积>10ul时:
用一预先湿润的吸嘴将双蒸水移入某一容器并称重。
5.2 调整
5.2.1 何时应进行调整?
Reference 系列移液器在出厂前均经测试,测试条件如第2部分所述。 当对移液器准确性有疑问时,应注意以下几点:
— 移液器有无漏液?(此为移液量过少的原因之一,见第七部分的疑难解答) — 样品温度?(在敞口的试管中,处于室温的水会有蒸发) — 移液器温度? — 空气温度?
— 是否已将ml换为ul? — 样品密度是否有别于水? — 移液速度是否过快?
在Eppendorf 的SOP(标准运行程序)里有这些问题的答案,若需要我公司可提供。
若这些检查不成功,则移液器调整已经被改变(例如一些部件已被替换)。
5.2.2 错误时的后续调整
从技术工艺角度而言这属于零点偏移。移液器设置值的偏移在整个量程中保持恒定不变。例如,对10-100ul移液器而言,如果100ul处的后续调整为1ul(=1%),则10ul处移液器仍应
调整1ul(=10%!)
固定量程Reference调整:
我们提供有箭头的圆标签以助于您调整设定。
-将此调整帮助粘贴至控制钮上。
称重计算出量程
(见可调量程Reference中a-c点)
用包装盒内的工具扳手B端刺穿调整口上贴的校准密封圈。将旋钮向里旋转一点以使控制钮能转动。
e 由所定量程调节控制钮。
旋转此控制钮就是与以下水设定值相符: Reference fix Vol./revol. 1,2,5,10μl 大约 0.5μl 10,20μl 大约 1 μl 25,50μl 大约2.4μl 100μl 大约5μl 200,250μl 大约12μl 500,1000μl 大约46μl 1500,2000,2500μl 大约118μl
顺时针旋转: 减少量程 逆时针旋转: 增加量程 f 拧紧旋钮直到控制钮不能旋转。
然后按调节可调量程的f和g步骤操作。 若设定量程不符计量结果,重复d-g步骤。 然后用所提供的校准密封圈再次封上调节口。
调节可调量程Reference:
a、移液器、吸嘴与水必须具有同等温度(20-25°C ±0.5°C) b、将移液器设定为指定移液体积
c、接吸嘴、移液并重复称量该液量10次,计算平均值并按以下公式转换为ul: 体积=重量/密度,得到移液器应显示吸入的液体体积(水的密度为20°C:0.9982)
用包装盒内的工具扳手B端刺穿调整
口上贴的校准密封圈。将旋钮向里旋转一点以使控制钮能转动。