浓度、温度
14、化学物质的抗微生物能力的测定
抗微生物剂：一类能杀死微生物或抑制微生物生长的化学物质 消毒剂：用来杀死非生物材料上的微生物——碘液、氯气、酚化合物、HgCl2、CuSO4
防腐剂：有杀死微生物或抑制微生物生长的能力，对于动物或人体的组织无毒害作用，可用作外用抗微生物药物——有机汞、碘液、六六粉、3%过氧化氢溶液、70%乙醇
石炭酸系数：一定时间内被药剂能杀死细胞（一般为伤寒沙门氏菌）的最高稀释度和达到同效的石炭酸的最高稀释度的比率 抗代谢物：生长因子的结构类似物可干扰机体的正常代谢以达到抑制微生物生长的目的 15、抗性菌株特点：
①细胞质膜通透性改变；②药物作用靶改变；③合成了修饰抗生素的酶；④抗性菌株发生遗传变异 16、耐药菌代谢可能有哪些改变（7点）： 1、 绕过受抑制的反应，形成补偿代谢途径 2、 积聚与抑制体相拮据的代谢产物 3、 增加受抑制酶数
17、避免出现细菌的耐药性的措施：
①第一次使用的药物剂量要足；②避免在一个时期或长期多次使用同种抗生素；③不同的抗生素（或与其他药物）混合使用；④
对现有抗生素进行改造；⑤筛选新的更有效的抗生素；⑥开发使用天然药物和极端环境下的微生物
18、利用加压蒸汽对培养基进行灭菌时，常带来哪些不利影响？应如何避免？
高温的有害影响：①形成沉淀物（有机物：如多肽类沉淀、无机物：如磷酸盐碳酸盐等沉淀）②破坏营养，提高色泽（褐变：产生氨基糖焦糖或黑色素、毒变）③改变培养基的pH（一般为降低）④ 降低培养基浓度
防止法：
（1）①采用特殊加热灭菌法对易破坏的含糖培养基进行灭菌时，应将糖液与其他成分分别灭菌，灭菌后再合并。②含钙、铁离子的培养基应与磷酸盐成分分别灭菌，就不易形成磷酸盐的沉淀。③含有易被高温破坏成分的培养基，应低压灭菌或间歇灭菌。④大规模发酵中，可采用连续加压蒸汽灭菌法。
（2）过滤除菌法：用于某些不耐热的成分。缺点是无法滤除液体中的病毒和噬菌体。
（3）可加螯合物以防止金属离子发生沉淀、按配方中的成分逐一按序加入并使之溶解，可防止沉淀、可用气体灭菌剂对个别成分进行灭菌处理，再混入已灭过菌的其他培养基成分中。 19、曲的构成与功能？
固体基质：提供营养源、有利疏松通气、赋予曲的外形 菌体（菌丝、孢子或细胞）：可用作种子
代谢产物：外酶类：可用作粗酶制剂 其他：如柠檬酸、赤霉素和抗生素等 20、次级代谢
是指微生物在一定生长时期，以次级代谢产物为前体，合成一些的与微生物生命活动无明确功能的物质过程的产物 初级代谢
微生物从外界吸收各种营养物质，通过分解代谢和合成代谢，生成维持生命活动的物质和能量的过程 初级代谢与次级代谢的关系
初级代谢的关键性中间产物往往是次级代谢的前体；次级代谢一般在菌体对数生长后期或稳定期间进行，但会受到条件的影响；某些催化次级代谢的酶的专一性不高；次级代谢产物的合成，因菌株的不同而异，但与分类地位无关；质粒与次级代谢的关系密切，控制着多种抗生素的合成 21、研究病毒学的意义
病毒学的研究极大地丰富了微生物学乃至现代生物学的理论与技术，同时，病毒学的研究有效地控制和消灭人及有益生物的病毒危害，利用病毒对有害生物，特别是害虫进行生物防治，保人类健康和人类经济活动及人类赖以生存的环境，发展以基因工程为中心的生物高新技术产业 22、病毒的特点
病毒，无细胞结构，由DNA或RNA和蛋白质外壳、荚膜组成，
无限增值，无生命迹象，建构简单。绝对的细胞内几升 23、病毒的培养：
二元培养物法
噬菌体—— 细菌培养物： 培养液 —— 细菌培养液变清亮
营养琼脂平板 —— 细菌平板成为残
迹平板
若是噬菌体标本经过适当稀释再接种细菌平板，经过一定时间培养，在细菌菌苔上可形成圆形局部透明区域，即噬斑（plague）。
如同对细菌计数一样，形成的噬菌斑也可用于对噬菌体的数目进行估算。
24、病毒复制过程/噬菌体复制（繁殖）的三个阶段
1、吸附 2、 侵入 3、脱壳 4、病毒大分子的合成 5、 装配与释放
25、质粒（plasmid）；质粒的检测方法
质粒是一种独立于染色体外，能进行自主复制的细胞质的遗传因子，主要存在于各种微生物细胞中。 检测方法：超离心或琼脂糖凝胶电泳。 致育因子(Fertility factor，F因子，附加体)
F因子能以游离状态和与染色体相结合的状态（Hfr）存在于细胞中。F质粒在大肠杆菌的接合作用中起作用，当Hfr菌株上的F因子通过重组回复成自主状态时有时可将其相邻的染色体基因一
起切割下来，成为携带某一染色体基因的F因子。 抗性质粒（抗性因子、R质粒）
带有R质粒的细菌对集中抗生素或其他药物（氯霉素、链霉素、磺胺、氨苄青霉素、卡那霉素）呈抗性。许多R质粒能使宿主细胞对许多金属离子呈现抗性（砷、银、钴、汞等） 代谢质粒（Metabolic plasmid）
代谢质粒上携带能降解某些基质的酶的基因，含有这类质粒的细菌（假单胞菌）能将复杂的有机化合物（尤其是有毒化合物）降解成能被其作为碳源和能源利用的简单形式，也成为降解质粒。 26、基因突变
一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变，包括一对或少数几对碱基的缺失、插入或置换，而导致的遗传变化。
27、营养缺陷型是微生物遗传学研究中重要的选择标记和育种的重要手段，在选择培养基（一般为基本培养基）上不生长，是一种负选择标记
营养缺陷型实验步骤
①将待分离突变株的原始菌株以合适的稀释度涂布到野生型菌株和突变株均能生长的主平板上，经培养后形成单菌落 ② 经过一消毒的“印章”讲平板的菌落分别原位转移到与院平板相同营养成分的平板a以及不含缺陷型所需要的营养因子的平板b
③ 经培养后对照观察两平板上形成的菌落，如果在a上生长在b