微生物学复习重点 - 图文(6)

2019-04-22 19:09

上不长,则为所需分离的突变型

④在a上挑取b上不长的相应位置的单菌落,并进一步在完全培养基上划线分离纯化。

营养缺陷型的表示方法

它的基因型常用所需要营养物的前三个英文小写斜体字母表示,例如hisC、lacZ其中的C、Z表示同一表型中不同基因的突变。形影的表型则用HisC和LacZ表示。 28、细菌素和抗生素的区别

细菌素 抗生素 1抑制或杀死近缘甚至同种不同株的细菌 较广的抗菌谱

2通过核糖体合成多肽 一般是次级代谢物

3结构基因或相关基因一般位于质粒或转座子上 一般无直

接结构基因相关酶的基因多在染色体上

29、抗药性突变型特点、表示方法

抗药性突变是由于基因突变使菌株对某种或某几种药物,特别是抗生素,产生抗性的一种突变型。

这类突变类型常用所抗药物的前三个小写斜体英文字母加上“r”表示,如strr和strs分别表示对链霉素的抗性和敏感性。再加有相应抗生素的平板上,只有抗性突变才能生长。所以很容易分离的到。

30、试述用Ames法检验致癌剂的理论依据、方法概要和优点 许多化学诱变剂能够引起动物和人的癌症,利用细菌突变能检测环境镇南关存在的致癌物质是一种简便、快速、灵敏的方法。利用书伤寒沙门氏菌的组氨酸营养缺陷型菌株的回复突变性能来进行实验,它在不含组氨酸的培养基中不能(或极少)生长,如果回复突变率因某种化学诱变剂的作用而增加,则这种化学药物具有致癌性。Ames试验的准确率达80%~90% 31、回复突变

突变体失去的野生型性状,可以通过第二次突变得到恢复 32、细菌的三种水平基因转移形式

细菌的接合作用:通过细胞的直接接触而产生的遗传信息的

转移和重组过程

细菌的转导:由病毒介导的细胞间进行遗传交换的一种方式 遗传转化:同源或异源的游离DNA分子(质粒和染色体DNA)被自然或人工感受态细胞摄取,并得到表达的水平方向的基因转移过程。

33、局限性转导与普遍性转导的主要区别

①被转导的基因共价地与噬菌体DNA连接,与噬菌体DNA一起

进行复制、包装以及被导入受体细胞中。②局限性转导颗粒携带特殊的染色体片段并将固定的个别基因导入受体,故称为局限性转导。

34、自然转化必要条件:受体细胞处于感受态、外源DNA 人工转化手段:CaCl2 、电穿孔法 转

35、感受态细胞

理化方法诱导细胞,使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。 36、基因组测序

测定待测生物基因的所有碱基排列顺序,并对遗传信息进行研究分析

37、PCR的原理、方法、用途

PCR是一种体外快速扩增特定DNA序列的技术

原理: 需要一对寡聚核苷酸作为引物,把各自所要扩增靶DNA片段两条链的末端互补。一个循环后,新合成的DNA又可作为下一个循环的模板进行复制,重复下三个动作,DNA片段呈指数增长。

方法:1、变性 ,高温变性,双链被解成单链

2、退火,反应系统降温使引物与模板DNA两端的碱基配对

3、延伸,DNA聚合酶使引物3ˊ端向前延伸,合成与模板互补的DNA新链

用途:1基因的扩增、制备DNA探针、定为诱变、DNA测序

2临床医学 传染病的检测、遗传病的诊断、对癌基因的分析

3在法医上 鉴别个体、判定亲缘关系

38、什么叫基因工程?试图示并简述其基本过程

定义: 把分离到的或合成的基因经过改造,插入到载体中,然后导入宿主细胞内,使其扩增和表达,从而获得大量基因产物或产生生物新的性状

过程:1基因的分离与合成2 外源基因与载体DNA的体外重组3 重组DNA导入受体细胞

4 目的克隆的筛选与鉴定5 控制外源基因的表达

附加题一、发酵工业中微生物受到噬菌体污染后会出现哪些现象?防治噬菌体的污染有哪些措施?

附加题二、什么是效价?什么叫噬菌斑?简述测定噬菌体效价的双层平板法?

效价:每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数,又称噬菌斑形成单位数或感染中心数。

噬菌斑:在涂布有敏感宿主细胞的固体培养基表面,若接种上相应噬菌体的稀释液,其中每一噬菌体粒子由于先侵染和裂解一个细胞,然后以此为中心,再反复侵染和裂解周围大量的细胞,就在菌苔上形成一个具有一定形状、大小、边缘和透明度的噬菌斑,可用于纯种分离和计数。

双层平板法:底层平板—(~2%琼脂培养基7~8mL) ]

[上层培养基(~1%琼脂培养基3mL)] ]37℃,10余h,计数噬菌斑

上层平板—[宿主菌悬液(对数期菌液0.2mL) ]

混匀 ]

[噬菌体试样(合适稀释液0.1mL) ] 预先分别配制含2%和1%琼脂的底层培养基和上层培养基。先用底层…在培养皿上浇一层平板,凝固后,把预先融化冰冷却到45°C以下,加有较浓的敏感宿主和一定体积待测噬菌体样品的上层培养

基,摇匀,立即倒在底层…上铺平待凝,37℃下保温。经10余h后即可对噬菌斑计数、

思考题一、请设计一实验来决定在一种特定的细菌中发生的遗传转移过程是转化、转导还是接合?说明每一种的预期结果246

设想有下列条件和材料可以利用:⑴合适的突变株和选择培养基;⑵DNas(一种降解裸露DNA分子的酶);⑶2种滤板:一种能够持留细菌和细菌病毒,但不能持留游离的DNA分子;另一种滤板只能持留细菌;⑷一种可以插入滤板使其分隔成2个空间的玻璃容器

思考题二、根据突变的光复活修复作用、原理,你认为在进行紫外线诱变处理时,应注意什么?为了使被诱变的细胞能均匀地受到紫外线照射,你讲如何做?


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