2.3.5浸提次数对山药粗多糖提取率的影响
取新鲜山药10g各3份。其中一份加300mL水打浆,摇匀,调整pH为8.0,置于l00℃下水浴提取2h,离心,收集上清液;第二份加150mL水打浆,摇匀,调整pH为8.0,置于100℃下水浴提取2h,离心收集沉淀和上清液。沉淀加入150mL水再按照上述条件提取第二次。合并两次的上清液;第三份加100mL水打浆,摇匀,调整pH为8.0,置于100%下水浴提取 2h ,离心收集沉淀和上清液。按照第二份的方法加100mL水提取第二次和第三次,合并三次得到的上清液。测定三份上清液中多糖含量。 2.4 怀山药多糖提取正交试验
在初步确定提取条件的基础上。选择温度、时间、乙醇体积分数、料液比等因素,采用L9(34)正交实验确定最优提取条件参数,以多糖提取率为指标,各因素水平设计如表 2.3。正交试验见表2.4,以多糖含量为指标,确定山药多糖提取的的最佳工艺参数。
表2.3 正交实验因素水平的设计
水平
1 2 3
A温度/℃
60 70 80
B时间/h
2 3 4
C 乙醇体积分数/%
75 80 85
D 料液比/g:mL
1:20 1:30 1:40
表2.4 正交试验表
试验号
1 2 3 4 5 6 7 8 9
A提取温度(℃)
1 2 3 2 3 1 3 1 2
B 提取时间(h)
1 2 3 1 2 3 1 2 3
C 醇析浓度(%)
1 2 3 2 3 1 3 1 2
D 料液比(g:mL)
1 1 1 2 2 2 3 3 3
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第3章 结果与讨论
3.1预处理方式试验结果
由表3.1可以看到,新鲜山药打浆处理比磨粉处理提取多糖效果好,所以对其它因素进行分析时,预处理方式选用打浆处理。
表3.1 预处理方式对多糖提取的影响
项目
磨粉处理
提取率/%
17.65
预处理方式
打浆处理 21.67
3.2 绘制葡萄糖标准曲线
在490nm波长下测不同浓度葡萄糖的吸光度,制作标准曲线如图3.2。标准曲线回归方程:y =0.0233x +0.0158,r =0.9995,其中y为吸光度,x为浓度(μg/ml)。
10.8吸光度0.60.40.200510152025葡萄糖浓度(μg/ml)303540 图3.2 葡萄糖标准曲线
3.3单因素实验结果
3.3.1 提取温度对山药多糖提取的影响
从图3.3可以看出,当提取温度在80℃以下时,随着温度的升高,提取率增大,多糖含量增大。当提取温度在80℃以上时,随着温度的升高,提取率下降,多糖含量减少。这是由于温度大于80℃时,大量淀粉溶出而糊化,造成分离困难使得多糖含量下降。初步确定多糖的浸提温度为80℃。
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2.2提取率/!.81.61.41.215060708090提取温度/℃100 图3.3 提取温度对山药多糖提取的影响
3.3.2 提取时间对山药多糖提取的影响
从图3.4可以看到,在先前阶段多糖提取率随着时间的延长而慢慢增加。但4h后多糖提取率随时间变化不明显,含量有所下降,主要是时间延长增加了其它成分的溶出。为了提高多糖含量,浸提时间初步确定在4h左右 。
2.5多糖含量/mg/g21.510.50012345提取次数6 图3.4 提取时间对山药多糖提取的影响
3.3.3 乙醇体积分数对山药多糖提取的影响
从图3.5看出,山药多糖得率随着乙醇质量分数的增加而升高。结果表明, 在不需分离多糖组分时, 采用95%的乙醇以一次沉淀法提取多糖较为适宜。
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2.5提取率/!.510.50405060708090100乙醇体积分数/% 图3.5 乙醇体积分数对山药多糖提取的影响
3.3.4 料液比对山药多糖提取的影响
从表6可以看出,在料液比为1:20以下时,随着料液比增大,山药多糖提取率也随之增大,当料液比在l:20以上时,多糖提取率变化不大,甚至有所减小。主要是因为料液比增大会增加其它成分的溶出。
2提取率(mg/g)1.510.501:10料液比1:201:30 3.3.5 浸提次数对山药多糖提取的影响
从表3.7可以看出,随着浸提次数的增加,提取率变化不大,考虑到浸提次数增加,工艺复杂,所以选用浸提1次作为最佳浸提条件。
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3837363500.511.52提取次数2.533.5提取率/% 图3.7提取次数对山药多糖提取的影响
3.4 山药多糖提取正交实验结果
在单因素试验的基础上采用L9(34)的正交试验,正交实验结果见表3.1。
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