间接鉴定是与二倍体植株相比，同一基因型的四倍体特征如下：生长缓慢；叶片肥厚、色深，叶片较宽或较大，有皱折；茎较粗壮，节间变短；花冠明显增大，花色较重。在显微镜下观察比较变异株和对照株的气孔数目和大小，以及花粉粒的形态。四倍体植株的气孔，通常数目变少，但气孔变大；出现畸形花粉粒和4个萌发孔的花粉粒。果实结籽率低。直接鉴定是由1～2位同学利用卷须观察体细胞染色体数目，确证是否是2n=28。
五、作业
1）秋水仙处理获得的变异株是否都是四倍体，为什么？ 2）影响秋水仙碱加倍染色体效果的因素有哪些？
3）总体比较滴苗处理和浸种处理的诱变效果，并对结果予以解释说明。
表4-1 不同诱变效果的比较
处 理 0.2%colchicine 处理株成活株、 数 - - 成活率%
变异株、 变异率% 加倍株、 加倍率% 滴苗0.2%C+1.5%DMSO 0.5%C 0.5%C+1.5%D Total 浸0.2%Colchicine 0.2%C+1.5%DMSO 0.5%C 0.5%C+1.5%D Total 种
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实验六 园艺作物常见病害的识别及抗病性鉴定
一、目的 学习常见园艺作物抗病性鉴定的一般方法,比较不同品种的抗病性。 二、材料和工具 白菜、黄瓜的不同品种；光学显微镜，血球计数板，胶头滴管、微型喷壶、蒸馏水、烧杯或量筒、毛笔等。
三、说明 危害园艺作物的病原物有真菌、细菌、病毒、寄生性线虫等，其中86%以上的园艺作物病害都是真菌引起的，几乎每种园艺作物都有几种到几十种真菌病害。 病原物有专性寄生物和非专性寄生物两类，专性寄生物只能从活的寄主细胞或组织中获取养分，当寄主细胞组织死亡后，病原物也停止生长发育甚至死亡；非专性寄生物既能寄生,也能腐生，可以在人工培养基上培养。
本次实验以黄瓜、白菜为材料。白菜上常见的病害有霜霉病、软腐病、病毒病和黑斑病等，软腐病的病原物属于非专性寄生物；黄瓜常见的有枯萎病、白粉病、病毒病和霜霉病，都属专性寄生物。
园艺作物抗病性鉴定方法可以分为自然鉴定和接种鉴定。自然鉴定，即利用田间自然发病条件，比较鉴定植株的抗病性，结果直接并贴近生产，但不同年份、不同地区环境条件不同，所以结果的可比性较差。接种鉴定可分为成株期鉴定和苗期鉴定，其中苗期鉴定便捷、高效，正受到更多的重视。
本实验以霜霉病为例说明抗性鉴定的程序。
表9-1 个体病情分级和群体病情归类
白 菜
个体病情分级 0级：无病症；
1级：叶片上有稀疏的褐色斑点，不扩展；
3级：叶片上有较多病斑，多数凹陷，无高抗（HR）：病情指数0.11-11.11 霉；
病斑不连成片； 层较多；
9级：病斑扩展面积达2/3以上，有大量的霉层。
黄 瓜
0级：无病症；
1级：病斑面积不超过叶片面积1/10； 3级：病斑面积占叶片面积1/10-1/4；
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群体抗性的归类
抗病（R）：病情指数11.12-33.33 33.34-55.55
高感（HS）：病情指数77.78-100
5级：病斑四处扩展，叶背生少量霉层，中抗（MR）：病情指数7级：病斑扩展面积达叶片1/2～2/3，霉感病（S）：病情指数55.56-77.77
高抗（HR）：病情指数0.11-11.11 抗病（R）：病情指数11.12-33.33 中抗（MR）：病情指数
5级：病斑面积占叶片面积1/4-1/2； 7级：病斑面积占叶片面积1/2-3/4； 9级：病斑面积占叶片面积3/4以上。
33.34-55.55
感病（S）：病情指数55.56-77.77 高感（HS）：病情指数77.78-100
病情指数 =Σ（病级数x 各级株数）/（最高病级数x调查总株数）x100% 四、方法
1、自然鉴定：记载不同园艺作物品种在自然环境条件下的发病情况，计算发病率和病情指数。
2、苗期接种鉴定：取自然发病的新鲜病叶，置于21℃左右保湿一夜，然后用毛笔沾蒸馏水刷取孢囊，用显微镜和血球计数板检查孢子囊浓度。
白菜：当幼苗长至2片真叶时，用蒸馏水配成10000个/ml孢子囊悬液，每片叶子滴1滴（约10μl）用小喷壶对全株喷雾。每个品种至少取10株壮苗，重复3次。然后遮盖塑料膜、遮阳网暗中保湿24hr，温度20℃左右；揭掉保湿物，在25℃和85%左右的湿度下保持到第7天，再在16～20℃下保湿16～24hr，至第8天调查病情。
黄瓜：在1～2片真叶时，用蒸馏水配成1000个/ml孢子囊悬液。用小喷壶对全株喷雾。每个品种至少取10株壮苗，重复3次。然后用塑料膜覆盖保湿3天。一周后调查病情。
五、作业：
1．上交填好的表9-2，表9-3表格。
表9-2 白菜霜霉病发病率和病情指数调查记载表 各级病害发病株 品种 0 1 3 5 7 9
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总株数 病株数 发病率% 病情指数 备注 表9-3 黄瓜霜霉病发病率和病情指数调查记载 各级病害发病株 品种 0
2．比较田间自然鉴定和苗期接种鉴定方法的异同，并对结果进行分析。
1 3 5 7 9 总株数 病株数 发病率% 病情指数 备注
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《园艺作物育种实习》实习指导
实习一 实习二 实习三 实习四 实验五
目 录
十字花科蔬菜花器结构的观察和雄性不育株的鉴定 十字花科蔬菜有性杂交技术
十字花科蔬菜自交不亲和性的测定及蕾期授粉方法 茄果类蔬菜有性杂交技术
结球白菜、甘蓝、不结球白菜种株的田间选择 19