实习三 十字花科园艺作物自交不亲和性的测定及蕾期授粉方法
一、目的 学习自交不亲和性测定和蕾期授粉方法，为选育自交不亲和系奠定基础。
二、说明 十字花科园艺作物是天然异花授粉作物，这类园艺作物在花期用同一植株上花粉授粉结籽很少，这种特性称为“自交不亲和性”；通过一定的方法，把具有“自交不亲和性”的植株选育成一个系统，也就是在同一系统内，各植株间授粉也结籽很少，而系统间交配则能正常结实，这样的系统叫作“自交不亲和系”。
优良自交不亲和系作为配制一代杂种的亲本，在自由授粉的条件下母本不用去雄，可以得到杂交率很高的种子，这种方法是当前开展杂种一代育种（杂种优势利用）的重要手段之一。
十字花科园艺作物除花期授粉很少结籽的不亲和性外，还有蕾期自交能结籽的亲和性，因此用蕾期授粉的方法可以使自交不亲和系保存下来。
三、方法步骤
1．选株：在优良品种或优良组合中选择具有本品种特征特性，生长健壮，无病虫害的优良单株，每人选三棵。
2．选枝：每株选健壮枝条四枝（尽可能选主枝和第一、二侧枝）。 3．整理枝条：枝条选好后，用镊子把本枝上已开过的花去掉。每株上有两个枝条摘去顶心留花蕾20个用作测自交不亲和指数；另两枝也摘顶心，最少留15个花蕾作蕾期授粉保存该株种子，然后将所选用枝条都套起袋子，挂好牌子，牌子上写明品种名称，花期授粉（符号fp）还是蕾期授粉（bP），日期、姓名，牌子反面注明所授花蕾数。
4．花期授粉：第二天开始袋内的花蕾陆续开花，每天或隔一天在作测亲和指数的枝条上用同枝或同株异枝袋内花粉进行花期授粉（注意同一袋内有几朵花蕾同时开放，不要将花摘下，用授粉匙醮袋内的花粉来授粉即可，或在整理枝条时另留几枝，将已开的花除掉，套袋专供采粉用）。待袋内所有花开完并作了人工授粉以后的一星期将袋去掉，检查自交结实情况计算亲和指数。
结籽数亲和指数?()?100%
花期授粉花数5．蕾期授粉：选择开花前2～3天的花蕾，用左手稳住它，再用镊子轻轻拔开花苞（注意不要伤柱头）并夹去花苞上部使柱头露出。取同株袋内的干净花粉进行授粉后，套上袋子，在纸牌上注明授粉日期，每株最少作15个花蕾，一星期后去袋，种子成熟时采种，测定蕾期亲和指数，将花期亲和指数≤1的单株分株收种。
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四、作业
1．分别计算所做各株的花期、蕾期亲和指数，并总结蕾期授粉的经验教训。 2．交各蕾期授粉的单株种子，并注明各株的花期亲和指数。
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实习四 茄果类蔬菜有性杂交技术
一、目的 学习茄果类蔬菜有性杂交技术，并初步了解该类蔬菜与有性杂交有关的生物学特性。
二、材料和用具 番茄、茄子、辣椒等若干品种，镊子、小纸牌子、铅笔、培养皿、干燥器、酒精棉花、授粉匙等。
三、方法
（一）番茄有性杂交技术
选择合适的杂交时间是提高杂交率，增加单果内种子数的重要因素之一，日平均温度在14℃以上能正常结实，但种子数不多，平均温度在22℃左右最合适，平均温度在28℃以上结实率就急剧下降。本地区合适的时间约在5月中下旬，其步骤如下。
①选株：作杂交亲本一定要选择具有本品种特征特性、生长健壮、无病害、特别注意无病毒病为害的植株，只要一株有病毒病，在杂交过程中，就易将病毒传染开来，早期病毒可能不易发现，而且要注意不选早疫病为害的植株。
②选花：番茄每个花序的花朵数少则5～10朵（也有少数品系是单花）多则几十朵，而蔓生品种番茄在本地气候条件每株能开6～8穗花，杂交时选2～4穗上先开的花，将其余的花，特别是畸形花，无论在什么部位都要去掉。
③去雄：番茄为雌雄同花，雄蕊的花药联合成一个筒状体称“药筒”，包在雌蕊外面，腹线紧贴于柱头，雄蕊成熟时自花药先端向内纵裂散出花粉落于柱头上而授粉受精，因此杂交时应在雄蕊成熟前就将它去掉。
去雄应选花冠已露出萼片，花药为黄绿色尚未成柠檬黄色为宜，去雄方法是用左手姆指和食指稳住花朵基部，右手用镊子尖端轻轻从花药基部插入夹住向上提，但注意不要碰伤柱头。还要注意雄蕊要去干净，花瓣要尽可能保存，去雄后，套袋隔离并挂上纸牌。
④采粉：在选好作父本的植株上最好先套袋，2～3天以后将药筒取下带回室内，放在干净纸上使其干燥，若是阴天就放在干燥器内待花药外面有点干瘪，但不脆，授粉前在室内用镊子夹住药筒轻敲取花粉，要注意在换父本取花粉时，镊子一定要用酒精棉花杀死前一父本花粉，防止混杂。
也可用电动采粉器直接采粉，但要在父本花盛开，天气晴朗时进行。 ⑤授粉：去雄后2～3天授粉，结实率最高，单果种子数量多，也就是蕾期去雄，开花当日授粉为好。也可去雄后立即授粉等第2～3天开花时，再重复授粉一次。
授粉方法是用授粉匙醮少量花粉轻轻涂于已去雄的母本柱头上，然后套好袋
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子，纸牌上注明授粉组合及时间，为了避免工作重复可将授过粉的萼片折断一部分，以示授过粉或以其他方法标记。
（二）茄子有性杂交方法
茄子有性杂交方法与番茄基本相同，但也有以下一些差异。 ①杂交时间
茄子一般比番茄要求温度高，开花也较迟，最适宜开花结果温度为25～30℃，17.5℃以下及10℃以上花粉管伸长停止不能受精结果。苏南地区宜在5月下旬6月中旬，徐淮地区宜在6月上旬到6月中下旬进行杂交，即利用母本植株上对茄和四母茄部位的花蕾去雄授粉为宜，这样既不妨碍母本植株健壮生长，又可保证杂交种子发育良好。
②杂交技术
茄子宜在花开放的前一天（下午最好），选用花冠已伸出花萼和变色（如紫色茄子品种花冠已呈淡紫色时）的花蕾去雄。注意勿伤柱头，要将花药去尽，如周围有其他品种则要进行套袋。如种在隔离区（50～100米）则可不必套袋。父本如不在隔离区也要在花开前一天套袋，以防沾染其他品种花粉，花朵开放时间在早晨6时左右，7时以后花药开始开裂，故去雄后，隔一天的上午8时以后为授粉适宜时间，每朵花开放时间约2～3天，茄子花药成熟后在顶端孔裂，故采集花粉可用镊子将花药先端折去，然后夹住其基部敲落花粉，不用针挑，每株杂交结果3～6果，即可停止杂交。具体按品种果实大小和生长势而定，茄子结果率较高，每果实可得种子3～8克，细长小果型3克左右，大园果型8克左右。
（三）辣椒有性杂交技术
其方法基本和番茄相同，但要注意以下几点。 ①辣椒的花较小，杂交时特别注意不要碰伤花器。
②温度对杂交结实率影响很大，其适宜温度是旬平均为18～20℃，日最高温度不超过30℃。南京地区是5月初到5月下旬，秋季9月份的温度也在此范围，也可进行辣椒的杂交工作。
③辣椒去雄后柱头易脱水，易受高温低湿伤害，所以去雄时间以下午4时以后为宜。
④辣椒花粉和柱头寿命都比较短，以当天开的花或开花的第二天生活力最强，因此在头天早晨6～7时选父本当日开的花朵取回阴干后散出花粉，收集于容器中，第二天上午露水已干就在头天下午去雄的母本花上进行授粉。
⑤已经授过粉可摘去一个叶片或用其他方法标记。 四、作业
每小组交一套番茄、茄子、辣椒所规定品种正反交各组合的种子。
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实习五 结球白菜、甘蓝、不结球白菜种株的田间选择
一、目的 学习结球白菜（大白菜）、甘蓝和不结球白菜种株的田间选择方法。
二、材料及用具 结球白菜及甘蓝和不结球白菜的留种群体，小竹竿、红漆。 三、说明 结球白菜、甘蓝及不结球白菜均属十字花科，天然异花授粉作物，其食用器官分别为叶球、叶片，大白菜、甘蓝单位面积的商品产量决定于叶球的总数及每个叶球的重量。因此选择大白菜、甘蓝种株时，在符合品种的典型性状基础上，重点是叶球大小坚实度，球叶和外叶的比例及抗逆性等。不结球白菜选择的重点是具有本品种的特征，抗病性要强，丰产、品质优良。
严格选择种株，可以增加群体的有利基因，以提高种性，防止退化。 四、方法
（一）以小组为单位，每小组选大白菜、甘蓝、不结球白菜种株各50株，将中选植株插好竹竿，并在球、叶上涂上红漆。
（二）在采收前进行初选（大白菜在捆菜前），采收时进行复选，淘汰不良植株，选留母株数必须超过计划种株数20～50%，在选择原种田母株时，必须对种株全面鉴定，而良种繁育田中选择母株时，只对主要经济性状进行鉴定。
1．大白菜的选择标准
（1）生长健壮，无病虫害或病虫害较轻，尤其要注意对三大病害抗性的选择。
（2）符合本品种典型性状的优良植株。 （3）外叶少、叶球大小适中、叶球坚实。 （4）侧芽未萌动（侧芽早萌动的植株不耐贮藏）。
（5）原种圃种株要对植株进行全面鉴定。如：株高、开展度、外叶形状、色泽、叶球类型、抗病性等。
2．甘蓝选择标准
（1）具有品种典型性状，植株健壮无病害或病害较轻。 （2）外叶少，叶子无明显皱曲、叶柄较短。
（3）叶球大而坚实，外层球叶大，包卷超过叶球的中轴。 （4）内外茎均短，未抽生花茎。 3．不结球白菜选择标准
（1）生长健壮、无病虫害或病虫害较轻。 （2）具本品种典型性状。 （3）丰产、品质好。 （4）抗逆性强。
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