分子实验常用试剂、缓冲液配制(3)

2019-05-18 17:09

配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中

Acrylamide 380g BIS 20g 2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解 3.加入去离子水将溶液定容至1L,用0.45μm滤膜滤去杂质。 4.于棕色瓶中4℃保存。

注意:丙稀铣胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收, 其作用有积累性,配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无 毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。 14、10%(W/V)过硫酸铵 组份浓度 10%(W/V)过硫酸铵 配制量 10mL

配置方法 1.称取1g过硫酸铵。

2.加入10mL的去离子水后搅拌溶解。 3.贮存于4℃。

注意:10%过硫酸胺溶液在4℃保存时间可使用2周左右, 超过期限会失去催化作用。 15、考马斯亮蓝R-250染色液

组份浓度 0.1%(W/V)考马斯亮蓝R-250,25%(V/V)异丙醇,

配制量 1L 配置方法 1.称取1g考马斯亮蓝R-250,置于1L烧杯中。

2.量取250mL的异丙醇加入上述烧杯中,搅拌溶解。 3.加入100mL的冰乙醋酸,均匀搅拌。 4.加入650mL的去离子水,均匀搅拌。 5.用滤纸出去颗粒物质后,室温保存。 16、考马斯亮蓝染色脱色液

组份浓度 10%(V/V)醋酸,5%(V/V)乙醇 配制量 1L

配置方法 1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。

醋酸 100mL 乙醇 50mL dH2O 850mL 2.充分混合后使用。 17、凝胶固定液

组份浓度 50%(V/V)甲醇,10%(V/V)醋酸 (SDS-PAGE银氨染色用) 配制量 100L 配置方法 1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。

甲醇 500mL 醋酸 100mL dH2O 400mL 2.均匀混合后室温保存。 18、凝胶处理液

组份浓度 50%(V/V)甲醇,10%(V/V)戊二醛 (SDS-PAGE银氨染色用) 配制量 1L

10%(V/V)冰醋酸 配置方法 1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。

甲醇 50mL 戊二醛 10mL dH2O 40mL 2. 均匀混合后室温保存。 19、凝胶染色液

组份浓度 0.4%(W/V)硝酸银,1%(V/V)浓氨水, (SDS-PAGE银氨染色用) 0.04%(W/V)氢氧化钠

配制量 100L 配置方法 1.量取下列试剂,加入100~200mL试剂瓶中。 20%硝酸银 2mL 浓氨水 1mL 4%氢氧化钠 1mL

dH2O 96mL 2.均匀混合。该溶液应为无色透明状。如氨水浓度过低时溶液 会呈现混浊状,此时应补加浓氨水,直至透明。 3.本染色液应现用现配,不宜保存。 20、显影液

组份浓度 0.005%(V/V)柠檬酸,0.02%(V/V)甲醛 (SDS-PAGE银氨染色用) 配制量 1L

配置方法 1.称取下列试剂,置于1L试剂瓶中。

50mg

0.2mL

2.加入1L去离子水后,摇动混合后溶解。 3.室温保存。 21、45%乙醇溶液 组份浓度 45%

配制量 1L 配置方法 量取无水乙醇450mL,加入去离子水550mL,混匀。 22、5%的十二烷基硫酸钠溶液 组份浓度 5%

(W/V) 配制量 0.1L 配置方法:称取5.0g十二烷基硫酸钠,溶于100mL4%的乙醇溶液中。 23、三氯甲烷-异戊醇混合试剂

配置方法 取500mL三氯甲烷试剂,加入21mL异戊醇试剂,混匀。 24、1.6%乙醛溶液 组份浓度 1.6%

配制量 0.1L 配置方法 取47%乙醛3.4mL,用去离子水定容至100mL。 25、二苯胺试剂

配置方法 1.称取二苯胺试剂0.8g,溶解于180mL冰乙酸中, 2.再加入8mL高氯酸混匀。

3. 临用前加入0.8mL 1.6%乙醛溶液。 注意:配制完成后试剂应为无色。 26、15%三氯乙酸溶液 组份浓度 15%

柠檬酸 甲醛 配制量 2L 配置方法 称取三氯乙酸300g,用去离子水溶解定容至2000mL。 27、1%谷氨酸溶液 组份浓度 1%

配制量 0.5L 配置方法 1.称取5g谷氨酸,先用适量得用去离子水溶解。 2. 再用氢氧化钾溶液中和至中性。 3. 最后用去离子水定容至0.5L。 28、1%丙酮酸溶液 组份浓度 1%

配制量 0.5L 配置方法 1.称取5g丙氨酸,先用适量得用去离子水溶解。 2. 再用氢氧化钾溶液中和至中性。 3. 最后用去离子水定容至0.5L。 29、0.1%的碳酸氢钾溶液 组份浓度 0.1%

配制量 0.5L 配置方法 称取碳酸氢钾0.5g,用去离子水溶解定容至0.5L。 30、0.05%的碘乙酸溶液 组份浓度 0.05%

配制量 0.25L 配置方法 称取0.125g碘乙酸,用去离子水溶解定容至0.25L。 31、Locke氏溶液 配制量 2L 配置方法 称取18g氯化钠,0.84g氯化钾, 48g氯化钙,0.3g碳酸 氢钠,2g葡萄糖,用去离子水溶解定容至2000mL。 32、0.2mol/L的丁酸溶液 组份浓度 0.2mol/L

配制量 1L 配置方法 1.量取18mL正丁酸试剂。

2.用1mol/L的氢氧化钠中和。 3.再用去离子水定容至1L。 33、0.1mol/L的硫代硫酸钠溶液 组份浓度 0.1mol/L

配制量 配置方法 称248.17g硫代硫酸钠,用去离子水溶解并定至10L。 34、0.1mol/L的碘溶液 组份浓度 0.1mol/L

配制量 1L 配置方法 1.称取碘12.7g和碘化钾25g。

2.用去离子水溶解并定容至1L。

3.用0.1mol/L的硫代硫酸钠标定。 35、10%氢氧化钠溶液 组份浓度 10%

配制量 2L 配置方法 称取200g氢氧化钠,用去离子水溶解并定容至2L。 36、10%盐酸溶液 组份浓度 10%

配制量 0.2L 配置方法 量取浓盐酸49.3mL,用去离子水定至0.2mL。 37、0.1%标准丙氨酸溶液 组份浓度 0.1%

配制量 0.5L 配置方法 称取丙氨酸0.5g,用去离子水溶解并定容至0.5mL。 38、0.1%标准谷氨酸溶液 组份浓度 0.1%

10L 配制量 0.5L 配置方法 称取谷氨酸0.5g,用去离子水溶解并定容至500mL。 39、0.1%水合茚三酮乙醇溶液 组份浓度 0.1%

配制量 1L 配置方法 称取1g水合茚三酮试剂,溶于1000mL无水乙醇中。 40、酚溶液

配置方法 在大烧杯中加入80mL去离子水,再加入300g 苯酚,在水 浴中加热搅拌、混合至苯酚完全溶解。将该溶液倒入盛有200mL去离子水的1000mL分液漏斗内,轻轻振荡混合,使其成为乳状液。静止7~10小时,乳状液变成两层透明溶液,下层为被水饱和的酚溶液,放出下层,贮存于棕色瓶中备用。 41、0.5%淀粉溶液 组份浓度 0.5%

配制量 0.1L 配置方法 称取淀粉0.5g,用去离子水溶解定容至0.1L。 42、对羟基联苯试剂

配置方法 称取对羟基联苯1.5g,溶于100mL0.5%氢氧化钠溶液中, 配制成1.5%的溶液。若对羟基联苯颜色较深,应用丙酮 或 无水乙醇重结晶,放置时间较长后,会出项针状结晶,应摇匀后使用。 生物化学实验常用缓冲液的配制方法

1、0.2 mol/L 磷酸缓冲液 组份浓度 0.2mol/L (pH 6.0) 配制量 1L 配置方法 1. 称取磷酸氢二钠?12水 8.82 g。

2. 称取磷酸二氢钠?2水 27.34g。 3. 用去离子水溶解并定容至1L。室温保存。 注意:此为母液,使用时稀释40倍使用。 2、洗脱液 组份浓度 0.15mol/L (含0.15mol/L氯 配制量 10L

化钠的0.005mol/L 配置方法 1.称取氯化钠87.66g。 pH 6.0的磷酸缓冲液) 2. 用0.2mol/L pH6.0的 磷酸缓冲液250mL溶解。

3. 用去离子水稀释至10 L。室温保存。 3、0.3mol/L磷酸缓冲液 组份浓度 0.3mol/L

(pH7.8) 配制量 0.5L

配置方法 1.准确称取磷酸氢二钠?12水49.150g。 2.磷酸二氢钠?2水2.000g。 3. 用去离子水溶解并定容至0.5L。室温保存。 注意:此为母液,使用时稀释10倍使用。 4、0.2mol/L乙酸缓冲液 组份浓度 0.2mol/L

(pH4.6) 配制量 2L 配置方法 1.准确称取乙酸钠?3水54.44g。 2. 加入23mL冰乙酸,溶解。

3. 用去离子水溶解并定容至2L。4℃保存。 5、0.2mol/L磷酸-柠檬酸 组份浓度 0.2mol/L

缓冲液 配制量 各1L (pH 2.6、4.6、6.6)

配置方法 1. 母液A(0.2mol/L的Na2HPO4溶液):称取Na2HPO4?12水143.256g, 用去离子水定容至

2L。

2. 母液B(0.1mol/L的柠檬酸溶液):称取柠檬酸?1水42.028g 用去离子水溶解定容至2L。

3. pH2.6、4.6、6.6的三种缓冲液如下表配制: pH值 A(mL) B(mL) 2.6 109.0 891.0 4.6 467.5 532.5 6.6 727.5 272.5 4. 按上表混匀后,4℃保存。 6、20×SSC 缓冲液 配制量 1L

(pH7.0) 配置方法 1.准确称取175.2g氯化钠。 2.准确称取88.2g柠檬酸钠?2水。 3.溶解于800mL去离子水中。 4.加入数滴10mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.0。 5.加去离子水定容至1L。 注意:按实验需要可分装后高压灭菌。 10×SSC、5×SSC、1×SSC可由20×SSC做相应稀释得到。 7、0.15mol/L氯化钠- 组份浓度 0.15mol/L 乙二胺四乙酸二钠 配制量 1L

缓冲液 配置方法 1.准确称取氯化钠8.77g。

(pH8.0) 2. 称取乙二胺四乙酸二钠37.2g。 3. 溶于800mL去离子水中。 4.用固体的氢氧化钠调pH值为8.0。 5.加去离子水定容至1L。 8、1/15mol/L的磷酸盐 组份浓度 0.15mol/L

缓冲液 配制量 1L (pH7.6) 配置方法

1.溶液甲(1/15mol/L的KH2PO4溶液):称取KH2PO4 9.078g,用去离子水溶解定容至1L。

2. 溶液乙(1/15mol/L的Na2HPO4溶液):称取Na2HPO4? 2水11.876g(或磷酸氢二钠?12水23.894g)用去离子水溶解定容至1L。

3.pH7.6磷酸盐缓冲液:将①和②按1.4:8.6比例混合即可。

9、5×Tris-GlycineBuffer 组份浓度 0.125M Tris,1.25M Glycine,0.5%(w/v)SDS (SDS-PAGE电泳缓冲液) 配制量 1L 配置方法 1.称取下列试剂,置于1L烧杯中。

Tris 15.1g

Glycine 94g

SDS 5.0g

2.加入约800mL的去离子水,搅拌溶解。 3.加去离子水将溶液定容至1L后,室温保存。

10、5×SDS-PAGE 组份浓度 250mM Tris-HCl(pH6.8)


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