微生物种类繁多,诊断比较困难,因此加强对胃肠道标本的病原微生物检测具有重要临床意义。正确的标本采集和及时送检是保证胃肠道感染细菌学检验质量的关键。
一、粪便标本
粪便是诊断胃肠道感染的最主要标本。
一) 临床采样指征:
当患者出现腹痛、腹泻(水样便 、脓血便),或伴有发热;粪便常规镜检异常,建议采集粪便标本,进行细菌培养。 二) 标本采集与要求
标本的采集尽可能在应用抗菌药物治疗前,标本应收集在宽口便盒内,并加盖密封。如考虑空肠弯曲菌需要无血弯曲菌琼脂培养基。艰难梭状杆菌需在厌氧环境中生存,建议在床旁进行标本的采集及接种。接种后的标本立即放入厌氧袋内,送至实验室。重复采集标本,可提高阳性检出率。 1. 自然排便法
患者在干燥清洁便盆(避免使用坐式或蹲式马桶)内自然排便后,挑取有脓血、黏液部分的粪便2-3g(液体粪便则取絮状物1-3ml)放入无菌便盒内送检。若无黏液、脓血,则在粪便上多点采集送检。此为常规方法。 2. 直肠拭子法
用肥皂水将肛门周围洗净,将占有无菌生理盐水的棉拭子插入肛门4-5cm(儿童为2-3cm)。棉拭子与直肠粘膜表面接触,轻轻旋转拭子,可明显在拭子上见到
粪便。将带有粪便标本的棉拭子插入运送培养基,立即送检。本方法仅适用于排便困难的患者或婴幼儿,不推荐使用拭子做常规标本。 三) 标签及申请单
申请单上应包括患者姓名、病历号、采集日期时间、诊断、相关旅行史等。标本标识要求有唯一标识号或条码。标本上的标签中应包括患者姓名、病历号、采集时间等。送检的新鲜标本应报告粪便的性状,标本表面或标本里面存在血液也应注明。 四) 标本运输
粪便标本应尽快送检,室温下运送标本时间不超过2小时。若不能及时送检,可加入pH
7.0磷酸盐甘油缓冲保存液或使用Cary-
Blair运送培养基臵于4℃冰箱保存,保存时间不超过24小时。
直肠拭子采集的标本必须臵入Cary-Blair运送培养基或GN肉汤中送检。室温下运送时间不应超过2小时,4℃冰箱保存不超过24小时。
高度怀疑霍乱弧菌感染的标本需专人运送,必须符合特殊标本的安全要求。
五) 实验室拒收标准
标本容器上未贴标签或贴错标签、送检时间超过规定时间、保存不当、标本有泄漏、送检容器不合格(如容器被压碎或有破裂)、标本量不足、干燥的拭子、含钡粪便、干便、明显污染的粪便以及一日内重复送检的标本,不做实验室相关检测,并应设法与临床医师联系,可要求重新留取标本,做好记录。在没有与医师沟通之前标本不应丢弃,仍按实验室标本保存原则存放。
若采集2小时后未使用运输培养基运送、以运输培养基送检但4℃保存超过
48小时或35℃保存超过24小时的标本不能送检,应在报告单上标记“样本运送延迟,培养可能出现假阴性”。 二、胃活检组织标本
胃镜活检组织培养适用于胃炎、消化性溃疡的患者,主要用于幽门螺杆菌的检测。
一) 临床采样指征:
一般不建议只为幽门螺旋杆菌诊断进行胃镜检查。接受胃镜检查者,可进行活组织染色镜检。幽门螺旋杆培养因其生长条件要求复杂,不能常规进行培养。
二) 标本采集与要求
经胃镜用活检钳在胃窦小弯侧距幽门5
cm(邻近胃角处)、胃窦大弯侧正对胃角处或病变邻近处采集1-2块样品。为了明确内镜所见病变的性质,可选择病变处局部黏膜进行活检。
隆起性病灶在其顶部(充血、糜烂等)及其基底部(糜烂、凹凸不平、色泽改变等)活检,息肉的隆起性病灶也可完整切除后送检;平坦性病灶在病灶周边或中央、黏膜皱襞中断处活检;溃疡性病灶在溃疡边缘黏膜隆起的顶部或内侧黏膜多点活检;局部黏膜病灶也可根据染色、放大内镜观察的结果,针对最可疑或最典型的病变部位进行活检。
标本采集应在停服铋剂或抗菌药物7天后进行。 三) 标签及申请单
申请单上应包括患者姓名、病历号、采集日期时间、诊断等,要明确注明标本采集的部位,以及检测目的,如“幽门螺旋杆菌培养”。标本标识要求有唯一标识号或条码。标本上的标签中应包括患者姓名、病历号、采集时间、采集部位等。送检的新鲜标本应报告粪便的性状,标本外观。 四) 实验室拒收原则
对于没有将患者和采集信息标识完整的标本应及时联系临床医师,补全信息;
对于标本容器贴错标签、送检容器不合格、送检时间超过规定时间、样本保存不当、有明显的污染等时应拒收。
第六节:生殖道标本
生殖系统感染主要包括外阴部病变、尿道炎、阴道炎、阴道病、宫颈炎、子宫内膜炎和盆腔炎。病原体包括细菌、真菌、淋病奈瑟菌、解脲脲原体和人型支原体、沙眼衣原体等。各类感染的临床症状和体征比较相似,临床不易区分。通过检测明确诊断对于治疗,尤其是保证患者治疗依从性至关重要。
大多数生殖道感染为性传播性疾病(STD),当疑为生殖道感染性疾病时,首先了解是否有不洁性交史,然后根据症状确定检查方向。对于男性患者来讲,先检查尿道是否有脓性分泌物,再依次是前列腺液、精液。对于女性患者,采集阴道后穹隆处或宫颈分泌物作培养或涂片镜检。 一) 临床采样指征:
具有外阴溃疡、瘙痒及灼热感,出现分泌物、赘生物等症状者。 二) 采样要求 1.
病原体培养应在抗菌药物应用前或停药一周后采集标本。
2. 生殖器是开放性器官,标本采集过程中应遵循无菌操作以减少杂菌污染。
3. 4.
阴道内有大量正常菌群存在,采取宫颈标本应避免触及阴道壁。 沙眼衣原体在宿主细胞内繁殖,采集时尽可能多的取上皮细胞。
三) 采集方法 1. ?òμà〃é?ú??
(1) 男性:取样前至少1小时内不要小便。用无菌生理盐水清洗尿道口,用灭菌纱布或棉球擦干,用男性拭子采取从尿道口溢出的脓性分泌物或将男性拭子插入尿道内2~4厘米取分泌物,臵无菌试管中。如无脓液溢出,可从阴茎的腹面向龟头方向按摩,促使分泌物溢出。
(2) 女性:取样前至少1小时内不要小便。用无菌生理盐水清洗尿道口,用灭菌纱布或棉球擦干,然后经阴道内诊压迫尿道,从尿道的后面向前按摩,使分泌物溢出,用无菌女性拭子采样。无肉眼可见的分泌物时,可用灭菌拭子轻轻深入前尿道内,转动并停留10~20秒钟,拔出后,臵入无菌试管内送检。
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