L929细胞：
是一种贴壁细胞，贴壁后繁殖迅速，约3－4天传代。切记：不要等到细胞贴的太满，约70－80％即可传代（细胞传代时不能长的太满,70%-80%就可以传了BSZLY2003）。否则细胞容易聚团，再想将其打散很不容易，并且打散后细胞的状态也不好了。我用的消化液是EDTA，新配的感觉特好用，胰酶也用过，但不如EDTA好用。以下传代方法同楼上各位朋友。
另外还有一点建议：细胞传代之前用75％酒精棉球擦一擦手。细胞培养瓶打开前也要擦一下，可以降低污染的几率。
SP 2/0：
是小鼠骨髓瘤细胞株，贴壁生长，科室给学生开实验就用此细胞，所用培养基为1640，用小牛血清，浓度15%生长较好。培养孵箱为37度，5%的CO2。
开始将复苏的细胞传到小培养瓶（如25ml)，由于细胞分泌各种因子及细胞间的相互作用，因此生长较快，1-2天就可进行传代（当然要达到80-90%的融合）。
消化采用0.25%的胰酶，在显微镜下观察，看细胞形态变圆，而且细胞间界限明显后，或有极少数细胞漂浮起来就可终止消化。
吹打时，动作要轻、快，而且吹管中要吸满液体，这样就不会产生气泡，吹打按一定的顺序进行，将瓶子彻底吹打，尤其是边缘和角落。
传代，先将此瓶细胞只传到一个大瓶中，以保证细胞的数量，小瓶也可保留，继续培养。这样3-4天又可进行传代。
mcf-7细胞株：
本人的细胞株购自武汉中国典藏物培养中心（美国ATCC株亚型），培养基是MEM， 10％的小牛血清（购自杭州四季青公司）。传代要看细胞数的多少，一般来说10％的细胞，要5天左右，如果90％融合的细胞一传2，3天子代细胞即可传代。传代：偶用的是25ml培养瓶，吸出培养基，6mlpbs冲洗3次，加入0.25％的胰酶2－3ml，胰酶均匀盖满瓶壁，消化2－5min左右（可以同时振摇），细胞缩起变圆，浮起，加入培养基2－3ml，
不用太精确，吹打成单细胞悬液分瓶即可。室温下消化即可，因为是成纤维细胞，较为耐受胰酶，消化时间稍长亦可，要注意mcf-7细胞是一种肿瘤细胞，生长规律性差，很容易不均匀，要注意吹打的充分性
HSC-T6（大鼠肝星状细胞系）：
弃培液-->以D-Hanks'液洗两次-->0.05％胰酶消化-->镜下观察细胞变圆（约5分钟）-->以完全培液（DMEM+10% FCS）终止反应-->吹打，1:3 - 1:4接种，然后继续培养。 该细胞系生长速度很快，所以采用1:3 - 1:4接种，而且换液间隔不要超过48h，否则细胞容易脱落下来。
血液病细胞。
如Molt－4,Hl－60等：这些细胞的特点是悬浮生长，传代方便，而且适应能力强——————好养！
当细胞生长到约2—8×10（6）后，即可认为进入对数生长期，此时传代好，一般控制在2－5×10（6）之间最好，此时状态最好。 传代方法：（传代前的消毒处理略）
直接在细胞悬液中加入一定比例的培养基。比例是根据您的实验时间安排而定，此细胞一般24小时左右可以增长一倍数量，因此，如果现在的浓度为4，您明天要实验，则可1：1传，————2×10（6）。明天同一时间大概就是4左右。
hl－60细胞：生长迅速，必须每天观察，因此如果明天您要4×10（6），今天为4，就必须以1：2～3的传。否则明天就已经因浓度太大而不易实验。
因是悬浮细胞，所以观察时以大小，圆不圆，颗粒多少，成团情况，培养基颜色来观察 vero（非洲绿猴肾cell):贴壁细胞，以25ml小方瓶为例，培养液用的是MEM。 MEM的配制：10%小牛血清，1%双抗，3%谷氨酰胺，1~1.5%NaHCO3. 传代方法：
1.倒掉培养液，如果细胞脏的话可用PBS洗两次，否则不用。 2.胰酶0.25%2ml消化1~3分钟，容易消化. Molt－4：
3.倒掉胰酶，加MEM9~12ml,将贴壁细胞摇至悬浮，并用吸管吹匀，一传三或一传四。
4.放置37度，5%CO2孵箱
Jurkat细胞（人外周血白血病T细胞）：是一种悬浮细胞：
1、培养液：RPMI1640，15％小牛血清，2％Na2CO3，1％HEPES，青霉素100IU／1ml，庆大霉素100IU／ml；
2、培养条件：5％CO2，37度，30％湿度；
3、细胞复苏：要快速将冻存管放入37度水中，不断轻轻摇晃，直到细胞完全溶解，加入10ml左右的培养液，800～1000rpm，10分钟离心，之后倒掉液体，加入新的培养基就可以进行培养了；
4、细胞培养：起初进行传代时由于细胞刚刚复苏，长得比较慢，所以可以3～4天传一代，传过两代后，一般2～3天传一代，每次传代后在倒置显微镜下观察细胞形态，在传过几代合适的时候可以进行实验。
5、细胞冻存：1000rpm离心后，弃去液体，加入含有15％DMSO的冻存液，按下列顺序降温：室温→4℃（20分钟〕→冰箱冷冻室（30分钟）→低温冰箱（－80℃ 1小时）→液氮。
6、我在做细胞培养时的一些小经验：
（1）细胞培养箱在每使用1个月最好用酒精擦洗一次，这样可以减少污染；
（2）虽然说加样器放在紫外下照射会不准，但我们还是丢了一把1ml的加样器在超净台，没有拿出来过，我想这样也许会减少污染；
（3）小牛血清我们用的是国产的，所以在一开始的时候加了15％的小牛血清，但细胞总是长不好，后来摸索条件，把小牛血清的量调到了20％，细胞生长旺盛； （4）HEPES虽然贵点，但加上去后细胞会长的不错； （5）在超净台操作前要用0.1％的新洁尔灭或75%酒精擦手
MCF-7细胞：
细胞放在显微镜下观察，细胞无污染、退缩，等其长满培养瓶约70%-80%时即可进行传代操作，具体步骤如下：
1. 打开瓶盖，弃上清,2.D-HANK‘S夜（以50ml培养瓶为例，下同）2吸管清洗后弃之；
3.加0.25%胰酶2吸管；4.轻摇晃后置入37度温箱；5.3-5分钟后置显微镜下观察，见细胞胞质退缩，变圆；6.吸去胰酶，加含10üS的RPMI1640 3吸管；7.用洗管吹打，见细胞脱落，培养液变混，即可吸出加到新的培养瓶中。
注意事项：若胰酶消化超过时间，见细胞已漂浮，切不可直接倒去上清，可直接加等量的含10üS的RPMI1640，吹打后加到离心管中离心5分钟，再弃上清，加入培养基进行传代
BALB/c-3T3：小鼠成纤维细胞。
消化过程：倒掉培养基——向培养瓶中加入少量37度预热的0.25%胰酶，转动培养瓶使胰酶浸过瓶底，倒掉胰酶——再向瓶中加入胰酶，加入量以能覆盖细胞为宜，1分钟后倒掉胰酶——将培养瓶置于37度孵箱中——显微镜下观察，细胞开始变形时以含10%小牛血清的DMEM中止消化——吹打成单细胞悬液，1:2~1:3接种，继续培养。
SKOV3细胞传代方法：
自CO2培养箱取出培养瓶－>超净工作台中,以吸管轻轻吹打有细胞的瓶壁，去除生长不好的细胞-->弃去培养液-->加0.04%&<46; EDTA数滴 (用0.02%的EDTA不易消化掉) ，浸过细胞-->置37℃培养箱10min&<46;左右-->取出，倒置显微镜下观察，细胞变圆回缩，但又未自瓶壁脱落--&<46;>超净工作台中弃去EDTA－>加入含10%新生牛血清的RPMI1640培养基--&<46;>吸管吹打后，1:2或1:3接种。&<46;
293细胞的传代：
通常我是不用EDTA的只用0.25%的胰酶消化一般在细胞约80%汇合时传代加入一毫升的胰酶后可以不用吸出胰酶（前提是用10%以上浓度的血清DMEM培养液）加上胰酶直接拍打至细胞脱落加入少许培养液中和后分瓶然后补加培养液 5%CO2孵箱 37度培养效果不错
HK2的传代（人肾近曲小管上皮细胞)：
以50ml培养瓶为例
1、细胞贴壁生长，长满瓶底80％时，胶头滴管移去培养液，可轻轻吹打，移液时不留培养液残余
2、加0.25％胰酶1ml消化37℃约2min，镜下可见细胞基本圆形脱落，加含血清培养液2ml中止消化，反复混悬 3、移入离心管，1200g，5min
4、弃去上清，加入新培养液5ml，再次吹打混悬细胞，按需要分入新的培养瓶，镜下可见散在分布圆形细胞
5、入37℃5％CO2孵箱，半天即可再贴壁
caco-2（人结肠癌上皮细胞）：
将Caco-2 细胞培养于高葡萄糖(的DMEM培养基中( 1%非必需氨基酸, L-谷氨酰胺（L-glutamine), 培养液含青霉素（ penicillin）10,000U/ml-链霉素（streptomycin）10,000ug/ml, 10%胎牛血清（Fetal bovine serum，FBS)）,长于T-75组织培养曲颈瓶中,通入5%CO2(相对湿度90%),置37℃培养箱中培养。培养介质2～3天更换一次,当细胞达到90%融合后，以不含钙,镁离子的磷酸盐缓冲液(PBS)清洗后与胰酶(0.25%)—EDTA(1mM)于37℃一起孵育至分离(约5～10分钟)。吹打细胞使之脱落，置离心管中1000rmp离心5分钟。细胞重新悬浮于完全DMEM液中以1:3的比例分配至新培养瓶中。即完成传代。
Bel7402和ECV-304：
37度，5％CO2培养箱。
消化前所用物品75％酒精擦拭后放到超净台上，紫外照射30min，同时胰酶和1640培养液（10％小牛血清，杭州四季青）75％酒精擦拭后放入37度培养箱平衡，进无菌室开始传代时取出。来苏水托地，整个房间紫外消毒30min。开风淋30min（时间宁长勿短啊，有一次弄得我的脸暴皮！半个月才缓过来）。Bel7402通常都是弃培养液（我通常是倒，觉得用吸管次数多会增加污染的机会，而我老师意见正好相反，郁闷啊），加入少量胰酶清洗，弃去后，加入胰酶2－3ml，培养箱内放置3min左右，取出，加入培养液中和胰酶，