图15:肠道菌群在SS、Mac培养基生长情况 图16:肠道菌群在SS、Mac培养基生长情况 图17:大肠杆菌在分离培养基生长情况 图18:变形杆菌迁徙生长现象 图19:大肠杆菌接种KIA、MIU培养基(培养前) 图20:大肠杆菌接种KIA、MIU培养基生长情况
肠道菌群分离培养与鉴定
图21:大肠杆菌在KIA、MIU培养基生长情况 图22:大肠杆菌在KIA、MIU培养基生长情况 图23:大肠杆菌系统生化反应结果(反应前) 图24:大肠、变形杆菌在KIA、MIU培养基生长情况 图25:大肠杆菌 Grame’s stain ×1000 图26:大肠杆菌 Grame’s stain ×1000
肠道菌群分离培养与鉴定 图27:大肠杆菌 Grame’s stain ×1000 图28:大肠杆菌 Grame’s stain ×1000 图29:MH细菌药敏培养基 图30:K-B法药敏实验 图31:K-B法药敏实验结果-3 图32:K-B法药敏实验结果-4 十、讨论
肠道菌群是指一大类存在于人类和动物肠道内的形态、生物学特性十分相似的G-杆菌,大多数细菌对人体有益,广泛分布在自然界中,包括植物、土壤、水、以及人和动物的肠道。多数是人肠道正常叫菌群的重要成员在机体的其他部位较少。如大肠杆菌能合成人体所需的VitB12、VitK、叶酸等,它们彼此相互联系、相互依存,共同维持肠道内微环境的稳定。少数细菌可引起人类腹泻或肠外感染,其中具有肯定致病作用的细菌有志贺氏菌属、沙门氏菌属、耶尔森氏菌属等;具有条件致病作用的细菌有枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、粘质沙雷氏菌属、变形菌属等。当宿主抵抗力下降、寄居部位改变或肠道菌群失调,则可引起肠内或肠外感染。
1、肠道细菌在肠内的分布特点和功能
健康人的胃肠道内寄居着种类繁多的微生物,这些微生物称为肠道菌群。在人类胃肠道内的细菌可构成一个巨大而复杂的生态系统,一个人结肠内就有400个以上的菌种。从口腔进入胃的细菌绝大多数被胃酸杀灭,剩下的主要是革兰氏阳性需氧菌。胃内细菌浓度<10 3 CFU/ML(CFU即colony forming unit菌落形成单位)小肠菌群的构成介于胃和结肠之间。近端小肠的菌丛与胃内相近,但常能分离出大肠杆菌和厌氧菌。在远段回肠,厌氧之间。近端小肠的菌丛与胃内相近,但常能分离出大肠杆菌和厌氧菌。远段回肠,厌氧菌的数量开始超过需氧菌,其中大肠杆菌恒定存在,厌氧菌如类杆菌属、双歧杆菌属、梭状芽胞杆菌属,都有相当数量。在回盲瓣的远侧,细菌浓度急剧上升,结肠细菌浓度高达10.11 ~10.12 CFU/ml,细菌总量几乎占粪便干重的1/3。其中厌氧菌达需氧菌的10.3 ~10.4 倍。主要菌种为粪杆菌属、双岐杆菌属和真杆菌属。
正常菌群的功能:1、吸收水分,粪便较软,较易排泄。在胃部分解消化的食物,经由小肠吸收营养后,成为粘稠状物体送至大肠。然后再经过18小时将水分及矿物质吸收,就变成容易排泄的粪便。肠道内环境良好时,粪便的软硬适中,排便会较为顺利。
2、缓和的蠕动,能顺利将粪便排出藉由肠的蠕动,将粪便缓慢的推送至肛门。如果蠕动过快或太慢,都将影响粪便的构成,导致便秘或者腹泻。而如果肠内干净,则蠕动的速度就相当的有规律,粪便可顺利排出。
3、有助维他命的合成。比菲德氏菌等好菌能维护肌肤的健康,并具有合成有助热量产生的维他命B1、B2及B6等,以及与止血、骨骼形成有关的维他命K等之功用。健康的肠道,好菌会不断繁殖,维他命的合成也可顺利进行。
4、迅速排出有害物质。健康的肠道并非完全没有坏菌的存在,有害物质多少会产生。当然还包括,吃进体内的食品化学添加物或是无法成为营养成分的物质。只要肠内环境良好,这些物质在开始危害身体前就被排出体外。
5、避免病原菌的侵害比菲德氏菌等好菌可以刺激并提高身体的免疫机能,而且易引起食物中毒等病原菌因具怕酸特质,所以像是含有好菌的乳酸饮料或健康食品等,都可抑制病原菌在肠内繁殖。
肠道有菌群除了以上功能之外,对人体还有营养作用,如糖尿病、高血压、高血脂等。B族维生素
和非必需氨基酸对人类的毛发具有重要的作用,当缺少这些营养元素,会导致头发脱落或毛发发黄、发叉,容易折断等现象。
致病菌群的功能:当机体处于有害菌侵袭时,往往会肠内黏膜粗糙,血液不流通而呈暗红色。主要表现为1、排泄不顺畅,肠内囤积粪便为帮助排便,粪便的软硬程度要适中,但不健康的肠则因膳食纤维的不足,导致粪便囤积大肠,无法顺利排泄;又或者是因坏菌的繁殖引起细菌感染,而产生腹泻的发生。
2、蠕动过快或太慢肠不健康,可能会影响肠的蠕动速度过快或太慢,妨碍粪便顺利排出。粪便更会因此变太硬或太稀,最终导致便秘,肠道中过路菌群更因此加速繁殖,如此恶性循环下去。
3、产生有害物质。不健康的肠道是坏菌繁殖的绝佳场所,大量的坏菌会导致阿摩尼亚,硫化水素及粪臭素等有害物质的产生。这些物质不但是恶臭屁的来源,更会加速肠壁的老化,产生导致癌症的物质,成为大肠癌的发病根源。
4、再次地吸收对身体有害的物质。有害物质不会乖乖地待在肠内,它会随着肠的吸收而跟着血液循环全身,引起疲倦、肌肤干燥、头痛、呕吐等身体不适,会发生恶臭的物质更会经由血液,透过嘴巴或身体而散发出来。
5、病原体容易侵入不健康的肠内,乳酸菌等好菌的量会变少,肠内呈碱性。另外,因坏菌所产生的有害物质使肠壁所具有的免疫功能下降,导致肠内杀菌作用变弱,细菌或病原菌更容易侵入。 2、标本采集,分析采集标本的影响因素:
在临床上采集粪便标本时应用干净竹签选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便;外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材,其量至少为大拇指末段大小,采取新鲜粪便,应盛于洁净、干燥无吸水性的有盖容器内,不得混有尿液、水或其他物质,以免破坏有形成分。采集标本的影响因素:在采集粪便时,粪便和尿液混合,你尿液中的尿酸会破坏粪便的正常环境,影响正常粪检。采集的标本如果放在不合适的容器内,也会影响检验结果。 3、在肠道选择培养基上菌落特征
在培养基培养时无需添加生长因子,向培养基中加入伊红美蓝遇大肠杆菌,菌落呈深紫色,并有金属光泽,可鉴别大肠杆菌是否存在。 4、肠道选择培养基上菌落Gram’s stain特点
选择培养基菌落革兰染色后,菌落被染色成紫红色,菌落散在或者聚集成簇存在。 5. 细菌典型生化反应及其概率
细菌生化反应:各种细菌所具有的酶系统不尽相同,对营养基质的分解能力也不一样,因而代谢产物或多或少地各有区别,可供鉴别细菌之用。用生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物,从而鉴别细菌的种属,称之为细菌的生化反应。