实验七 亚硝酸盐氮
一、实验目的
1、掌握N-(1-萘基)-乙二胺光度法测定亚硝酸盐氮的原理及方法。 2、学会标准曲线的绘制方法。 二、实验原理
在磷酸介质中，pH值为1.8±0.3时，亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺反应，生成重氮盐，再与N-(1-萘基)-乙二胺偶联生成红色染料。在540nm波长处有最大吸收。 三、教学重点与难点
教学重点：N-(1-萘基)-乙二胺光度法测定亚硝酸盐氮方法，722S型分光光度计使用，标准曲线的绘制。
教学难点：N-(1-萘基)-乙二胺光度法测定亚硝酸盐氮方法。 四、实验学时数和学时分配
实验学时数：4学时
学时分配：1、检查学生实验预习情况—5分钟；2、教师讲解本次实验内容—40分钟；3、学生分工协作开始实验—120分钟；4、学生讨论，处理实验结果—40分钟；5、教师对本次实验情况进行点评，布置下次实验内容—35分钟。 五、实验准备
仪器：分光光度计：配有光程10mm的比色皿、50ml比色管、移液管。试剂（略） 六、实验过程
1、校准曲线的绘制 2、水样的测定 3、空白试验 4、数据处理 七、注意事项
1、如水样经预处理后，还有颜色时，则分取两份体积相同的经预处理的水样，一份加1.0ml显色剂，另一份改加1ml（1+9）磷酸溶液。由加显色剂的水样测得的吸光度，减去空白试验测得的吸光度，再减去改加磷酸溶液的水样所得的吸光度后，获得校正吸光度，以进行色度校正。
2、干扰及消除
氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和高铁离子有明显干扰。水样呈碱性（pH≥11）时，可加酚酞溶液为指示剂，滴加磷酸溶液至红色消失。水样有颜色或悬浮物，可加氢氧化铝悬浮液并过滤。 八、思 考 题
1、水中氮的转化过程中亚硝酸盐氮起到了什么作用？
2、在生活污水处理过程中进出水中亚硝酸盐氮的浓度应该是什么样的关系？为什么？
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实验八 总氮的测定
（过硫酸钾氧化—紫外分光光度法）
一、实验目的
1、学习紫外分光光度计的使用方法。
2、掌握过硫酸钾氧化—紫外分光光度法测定总氮的原理和方法。 3、学会标准曲线的绘制方法。 二、实验原理
大量生活污水、农田排水或含氮工业废水排入水体，使水中含氮物质浓度增加，浮游生物和藻类大量繁殖，消耗水中溶解氧，使水体出现富营养化现象，水体质量恶化。
总氮测定方法，通常采取分别测定有机氮和无机氮化合物（氨氮、亚硝酸盐氮和硝酸盐氮）后，用加和的办法或以过硫酸钾氧化、使有机氮和无机氮化物转变为硝酸盐后，再以紫外分光光度法或还原为亚硝酸盐后用偶氮比色法以及离子色谱法进行测定。
过硫酸钾氧化—紫外分光光度法原理：在60℃以上的水溶液中过硫酸钾按如下反应式分解，生成氢离子和氧。
1 K2S2O8+H2O → 2KHSO4+2O2
KHSO4 → K+ HSO4 HSO4 → H+ + SO42-
加入氢氧化钠用以中和氢离子，使过硫酸钾分解完全。
在120℃～124℃的碱性介质条件下，用过硫酸钾作氧化剂，不仅可将水样中的氨氮和亚硝酸盐氮氧化为硝酸盐，同时将水样中大部分有机氮化合物氧化为硝酸盐。而后，用紫外分光光度法分别于波长220nm与275nm处测定其吸光度，按A=A220—2A275计算硝酸盐氮的吸光度值，从而计算总氮的含量。
三、教学重点与难点
教学重点：高压蒸汽灭菌器的使用，紫外分光光度计原理、使用方法；教学难点：高压蒸汽灭菌器的使用，紫外分光光度计原理、使用方法。 四、实验学时数和学时分配
实验学时数：4学时
学时分配：1、检查学生实验预习情况—5分钟；2、教师讲解本次实验内容—30分钟；3、学生分工协作开始实验—150分钟；4、学生讨论，处理实验结果—30分钟；5、教师对本次实验情况进行点评，布置下次实验内容—25分钟。 五、实验准备
仪器：紫外分光光度计、压力蒸汽消毒器、具塞玻璃磨口比色管、移液管。试剂（略） 六、实验过程
1、校准曲线的绘制 2、样品测定 七、注意事项
1、玻璃具塞比色管的密合性应良好。使用压力蒸汽消毒器时，冷却后放气要缓慢，以免比色管塞蹦出。
2、玻璃器皿可用10%盐酸浸洗，用蒸馏水冲洗后再用无氨水冲洗。 3、使用高压蒸汽消毒器时，应定期校核压力表。
4、测定悬浮物较多的水样时，在过硫酸钾氧化后可能出现沉淀，遇此情况，可吸取氧化后的上清液进行紫外分光光度法测定。 八、思 考 题
1、过硫酸钾氧化—紫外分光光度法测定总氮的过程中过硫酸钾起什么作用？ 2、紫外分光光度计和可见光分光光度计有什么不同？
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实验九 磷的测定
一、实验目的
1、了解总磷的几种测定方法。
2、了解钼锑抗分光光度法测定总磷的过程中各种试剂的作用以及使用方法。 3、掌握钼锑抗分光光度法测定总磷的原理和方法。
4、学会标准曲线的多种绘制方法（如描点法、最小二乘法等）。 二、实验原理
采集的水样立即经0.45μg微孔滤膜过滤，其滤液供可溶性正磷酸盐的测定。滤液经强氧化剂的氧化分解，测得可溶性总磷。取混合水样（包括悬浮物），也经下述强氧化剂分解，测得水中总磷含量。
三、教学重点与难点
教学重点：总磷的几种测定方法，钼锑抗分光光度法测定总磷的原理和方法，测定总磷的过程中水样预处理的方法, 高压蒸汽消毒器的使用；教学难点：钼锑抗分光光度法测定总磷方法。 四、实验学时数和学时分配
实验学时数：4学时
学时分配：1、检查学生实验预习情况—5分钟；2、教师讲解本次实验内容—30分钟；3、学生分工协作开始实验—150分钟；4、学生讨论，处理实验结果—30分钟；5、教师对本次实验情况进行点评，布置下次实验内容—25分钟。 五、实验准备
仪器：高压蒸汽消毒器、分光光度计、移液管、比色管。试剂（略） 六、实验过程
1、水样的消解（预处理） 2、校准曲线的绘制 3、样品的测定
4、数据处理及分析 七、注意事项
1、如采样时水样用酸固定，则用过硫酸钾消解前将水样调至中性。
2、如试样中浊度或色度影响测量吸光度时，需做补偿校正。在50ml比色管中，水样定容后加入3ml浊度补偿液，测量吸光度，然后从水样的吸光度中减去校正吸光度。
3、室温低于13℃时，可在20－30℃水浴中，显色15min。
4、操作所用的玻璃器皿，可用1+5的盐酸浸泡2h，或用不含磷酸盐的洗涤剂刷洗。 5、比色皿用后应以稀硝酸或铬酸洗液浸泡片刻，以除去吸附的磷钼蓝显色物。 八、思 考 题
1、测定磷的过程中，如果加入试剂顺序颠倒了，会出现沈阳的结果？
2、用分光光度计测吸光度时，如果比色皿中有气泡对结果有什么影响？如果比色皿外壁有水痕对结果有什么影响？
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实验十 余氯的测定
（N,N-二乙基对苯二胺光度法）
一、实验目的
1、进一步熟悉分光光度计的使用、标准曲线的绘制以及有关计算。
2、掌握N,N-二乙基-1,4苯二胺光度法测定余氯的原理和方法。 二、实验原理
氯以单质或次氯酸盐形式加入水中后，经水解生成游离性有效氯，包括含水分子氯、次氯酸和次氯酸盐离子等形式，其的相对比例决定于水的pH和温度，在一般水体的pH下，主要是次氯酸和次氯酸盐离子。
游离性氯与铵和某些含氮化合物起反应，生成化合性有效氯。氯与铵反应生成氯胺：一氯胺、二氯胺和三氯化氮。游离性氯与化合性氯二者能同时存在于水中。氯化过的污水和某些工业废水的出水，通常只含有化合性氯。
水中余氯的来源主要是饮用水或污水中加氯以杀灭或抑制微生物；电镀废水中加氯以分解有毒的氰化物。
氯化作用产生不利的影响是可使含酚的水产生氯酚臭；还可生成有机氯化物，并可因存在化合性氯而对某些水生物产生有害作用。
N,N-二乙基对苯二胺光度法测定余氯原理：游离氯在pH6.2～6.5 与N,N-二乙基-1,4苯二胺（DPD）直接反应生成红色化合物，用分光光度法进行测定。 三、教学重点与难点
教学重点：N,N-二乙基对苯二胺光度法测定余氯方法，722S型分光光度计使用，标准曲线的绘制。
教学难点：N,N-二乙基对苯二胺光度法测定余氯方法。 四、实验学时数和学时分配
实验学时数：4学时
学时分配：1、检查学生实验预习情况—5分钟；2、教师讲解本次实验内容—50分钟；3、学生分工协作开始实验—120分钟；4、学生讨论，处理实验结果—40分钟；5、教师对本次实验情况进行点评，布置下次实验内容—25分钟。 五、实验仪器
容量瓶、分光光度计。试剂（略） 六、实验过程
1、试样制备
2、校准曲线的绘制 3、测量
4、干扰校正 七、思 考 题
1、为什么要测定水样中的余氯？ 2、水样中的氯有哪些存在形式？
3、水样在测定前要调到重中性，为什么？
4、测定过程中比色皿没有清洗干净，对结果有什么影响？
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实验十一 化学需氧量（CODCr）的测定
（重铬酸钾法）
一、实验目的
1、了解化学需氧量的测定方法。
2、掌握重铬酸钾法测定化学需氧量的原理和方法。 3、掌握滴定管的使用。
4、熟练掌握滴定终点的控制方法。 二、实验原理
化学需氧量（COD），是指在一定条件下，用强氧化剂处理水样时所消耗氧化剂的量，以氧的毫克/升来表示。化学需氧量反映了水中受还原性物质污染的程度。水中还原性物质包括有机物、亚硝酸盐、亚铁盐、硫化物等。水被有机物污染是很普遍的，因此化学需氧量也作为有机物相对含量的指标之一。
重铬酸钾法测定COD原理：在强酸性溶液中，一定量的重铬酸钾氧化水样中还原性物质，过量的重铬酸钾以试亚铁灵作指示剂、用硫酸亚铁铵溶液回滴。根据用量算出水样中还原性物质消耗氧的量。
三、教学重点与难点
教学重点：COD测定操作顺序，冷凝回流装置、滴定器、定量提取器、数控厢式电炉的使用方法，滴定终点的控制。
教学难点：COD测定操作顺序，冷凝回流装置、滴定器、定量提取器、数控厢式电炉的使用方法，滴定终点的控制。
四、实验学时数和学时分配
实验学时数：4学时
学时分配：1、检查学生实验预习情况—5分钟；2、教师讲解本次实验内容—30分钟；3、学生分工协作开始实验—150分钟；4、学生讨论，处理实验结果—30分钟；5、教师对本次实验情况进行点评，布置下次实验内容—25分钟。 五、实验准备
回流装置、加热装置、酸式滴定管、移液管。试剂（略） 六、实验过程
1、取水样， 2、加药
3、加热回流
4、冷却，冲洗冷凝管，再冷却，稀释。 5、加指示剂，滴定 6、结果计算 七、思考题
1、为什么要测定化学需氧量？
2、重铬酸钾法测定化学需氧量的过程中，硫酸汞和硫酸—硫酸银各起什么作用？ 3、分析测定的数据，说一说影响结果的因素有哪些？
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