时取两者吸光度的平均值。
d) 标准品吸光度:双击标准品浓度列表项,可以在弹出窗口中输入浓度值,注意标准
品浓度顺序必须为由小到大。
8)计算,按试剂说明在窗口中输入:
a) Cut-off公式系数:各钟试剂的定性公式如有不同形式如S/N,(N-S)/N等均可转换
为S/(X*N+Y*P+Fac)的形式。
b) 阴性对照和阳性对照的吸光度范围:对照的吸光度超出上限和下限进分别按上限和
下限计算。例如有试剂要求阴性对照小于0。05按0。05计,则阴性对照下限应设为0。05。
c) 对照:可以任意设置对照,但对照的数量不超过5个,计算时取所有对照吸光度的
平均值。
9)阴阳性判定设置窗口
在此窗口中输入判定阴性和阳性的临界值,吸光度模式下,临界值为吸光度值:Cut-off方式 下,临界值为样本与Cut-off值的比值,定量计算方式下,临界值为浓度值。定性方式分为3类:
a) 正向阈值模式:阴性<阴性临界值,阳性≥阳性临界值,两者之间为灰区,在此区间内
的样本判定为可疑。
b) 反向阈值模式:阴性>阴性临界值,阳性≤阳性临界值。 c) 不需要判定阴阳性:在定性方式 中选择“无。 所有参数设置完毕,按[完成]键。
4.3样品测试
在主菜单中按[样品测试]键,进入如下窗口: a) 布板方向:横向或纵向
b) 进板方式:选择连续方式(<5秒)提高测量速度,选择步进方式(<15秒)获得更高
的测量精度。
c) 振板参数:振板速度分快速,中速和慢速3档,振板时间1~60秒,也可以选择不振板。 设定完以上参数后,按[确定]键,进入布板窗口。
4.4布板 4.4.1样本
任意点击欲设置为样本的孔位,样本号从1起自动递增并显示在该孔位上。如果要修改样本号,可再次点击该孔位。 4.4.2空白
空白孔在项目测试中用以吸光度调零,即其它孔位的吸光度均要减去空白孔吸光度值。根据不同项目测试的要求,可以选择是否设定空白。 旧空白的保存和使用:空白孔的测试结果将自动保存,如果在同一项目的后续测试中不重新设定空白,则系统自动用旧空白进行计算。 第个项目只允许设置一个空白孔,如果在设置空白孔时多次点击不同的孔位,那么只有最后一次点击的孔位被设定为空白孔,前面设置的空白孔被自动清除。 4.4.3依次设置阴性对照和阳性对照。
按[开始]键,系统确认布板无误后,开始走板测试。走板结束,系统自动进入吸光度显示。
4.5关机
在主菜单中按[关机],系统显示关机确认窗口,按[YES]执行关机程序,按[NO]返回主菜单。
5. 仪器维护
1) 保持仪器工作环境的清洁。
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2) 仪器表面的清洁,可以用中性清洁剂和湿布擦拭。 3) 液晶显示器请用柔软的布清洁
4) 勿让任何溶剂,油脂类,腐蚀性物质接触仪器。
二、KHB ST-36W洗板机
1 目的
规范洗板机的操作程序,保证洗板机的正常状态。 2 适用范围
本实验室KHB ST-36W洗板机的操作。 3 操作人员
本实验室实验人员。 4 操作步骤
4.1 拔掉废液瓶口的塞子(接有与洗板机相连的废液管),倒掉废液瓶的废液,再把塞子安紧在废液瓶口上。注意不要让废液管拧紧,以保证废液管的通畅。 4.2 拧开洗液瓶的盖子(接有与洗板机相连的洗液管),倒掉前一天洗液瓶里剩的洗液,倒进新配的洗液。拧紧盖子,注意不要让洗液管拧紧,以保证洗液管 的通畅。
4.3 保证待洗反应板所有的孔处于同一水平位置,以免孔边缘过高碰到洗板机的吸液针。 4.4 开机
插上电源,打开电源开关(按后面板【POWER】键),仪器显示“仪器复位中,请稍候”仪器初始化结束后。仪器显示:“就绪,当前程序 #X 请选择功能键”X处显示的数字(范围0~15之间)表示当前准备就绪的是第几号程序。此时仪器正处于待机状态,用户可进行下一步操作。 4.5 预洗
在待机状态下,使预洗槽处于清洗头下方,按下【预洗/返回】键,清洗头抬起,电磁阀打开,洗液进入预洗槽。清洗头将对预洗槽洗涤3次,清洗容量为400UL,但清洗时没有暂停和浸泡步骤。 4.6 编程
按下【编程】键。进入编程菜单界面。画面最左边有闪动的指示光标“→”,按下【↑】键或【↓】键移动所需要设定的参数前,按下【确定】键,即选中了该参数项,再按下【↑】或【↓】键设定该参数的参数值。 4.7 运行
按下【运行】键,系统将立即按照用户设定的程序执行。 4.8 关机
4.8.1 日常关机 最后一次洗板结束后,将电源开关置于【OFF】位;并将酶标板托盘上的预洗槽用蒸馏水装满,使清洗头浸入预洗槽。
4.8.2 长期关机 将长时间不使用洗板机时,先用蒸馏水冲洗一遍整个系统,再进行日常关机;并且倾倒、清洗废液瓶,保持液体干燥,以免清洗液中的缓冲盐类结晶而堵塞清洗头。 5 键盘功能 5.1 【编程】:进入编程菜单。用来设定仪器的运行方式及各项参数。 5.2 【运行】:执行先定的程序。 【↑】:处于待机状态时,此键用来顺次递增程序号;处于编程状态时,用来使光标“→”上移。 【↓】:处于待机状态时,此键用来顺次递减程序号;处于编程状态时,用来使光标“→”下移。 5.3 【复位】:终止当前操作,使仪器恢复到开机状态。 5.4 【预洗/返回】:处于待机状态时,此键用来使仪器执行预洗程序;处于编程状态时,此
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键可使显示面板界面回到待机状态 5.5 【确定】:确认光标所指示的参数项。 6 编制洗涤程序
编程菜单中包括清洗方式、清洗头数、清洗条数、清洗容量、加洗次数、清洗次数、暂停时间、浸泡时间8种参数项目。 6.1 清洗方式,条洗和板洗。
6.2 清洗头数,可设定为12头或8头。
6.3 清洗条数,或设定在1~12范围内,该参数设置与清洗头数有关,当头数为12时条数最大值为8。反之当头数为8时,条数最大值为12。
6.4 清洗容量,可在50UL、100UL、150UL、200UL、250UL、300UL、350UL、400UL、450UL中选择设定。
6.5 加洗次数,加洗次数可在1~3范围内设定。 6.6 清洗次数,清洗次数可在1~10范围内设定。 6.7 暂停时间,当清洗方式为知洗时,清洗头在注满酶标板每行后启动暂停,时间可在0~10秒内任意设定,增量为1秒;当清洗方式为板洗时,清洗头在每次过板注满水后启动暂停,时间可在0~60秒任意设定,增量为5秒。
6.8 浸泡时间,一般清洗过程中,清洗头在酶标板最后一行中注满水后,即启动浸泡功能。浸泡时间可在0~300秒内任意设定,增量为30秒,但在加洗程序中不能启动浸泡功能。 7 维护保养程序
7.1 平常不用时,拔掉电源插头。
7.2 每天洗板机工作结束时,要对内外其进行清洁,用湿抹布擦洗洗板机的外壁及载物台,以保证其洁净。用蒸馏水将所有的管道清洗一遍,防止洗液的结晶堵塞管道。 7.3 及时倒弃废液,以免废液瓶过满致使废液回流而造成洗板机的故障。 7.4 保证待洗的反应板的孔边缘不要过高且水平,以免造成吸液针损伤。 7.5 定期将洗液及废液管道拆卸下来进行冲洗,以保证管道的通畅。 8 仪器消毒
8.1 消毒试剂:甲醛溶液10%;酒精70%;戊二醛溶液4%。 8.2 消毒步骤
8.2.1 准备10%甲醛溶液200ml,4%戊二醛溶液200ml,70%酒精一瓶,若干医用棉球。 8.2.2 清洗仪器
8.2.2.1 给仪器注入蒸馏水,抬起清洗头,用戊二醛溶液注满托盘预洗槽。 8.2.2.2 用清洗头抽干托盘预洗槽,再用蒸馏水注满托盘预洗槽,抽干。 8.2.2.3 移走酶标板架和清洗头,将它们浸泡在戊二醛溶液中24小时。 8.2.2.4 倾倒液体瓶。
8.2.2.5 切断电源,拨掉电源线。 8.2.3 仪器消毒
8.2.3.1 用浸透70%酒精的棉球为仪器外壳消毒。
8.2.3.2 拆离主机和液体瓶,并打开液体瓶瓶盖,将仪器放入一个大的塑料袋中。 8.2.3.3 把在10%甲醛溶液中浸透的棉球放入塑料袋。 8.2.3.4 密封塑料袋24小时。 8.3 消毒后期处理
8.3.1 从袋中取出仪器。
8.3.2 用中性清洗液清洁仪器。 8.3.3 用70%酒精擦去污染物质。
8.3.4 把清洗头和酶标板架从戊二醛溶液中取出并用蒸馏水漂洗,把它们重新安装在仪器上。
8.3.5 在试剂瓶内注入蒸馏水并执行预洗程序,以冲洗系统的液体流动通路。 8.3.6 在仪器上贴上注有消毒日期的已消毒标识。
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9 注意事项 9.1 操作环境
实验室中经常遇到传染性标本和腐蚀性液体,进行实验室操作时应穿戴好防腐实验服和手套。处理危险样品时,参考实验室操作手册进行操作。 9.2 操作前
9.2.1 必须严格按照仪器说明书安装好仪器,保证正确连接管路,以免出现渗漏。 9.2.2 洗板机长期不用后再度使用时,需预洗整个系统4次。 9.3 操作中
9.3.1 按下【运行】键前,需确认:已装上正确清洗头;酶标板已正确放置;已选择适当的程序及参数值。
9.3.2 为防止液体进入泵,及时倾倒废液。
9.3.3 如果仪器表面有生物危险物质污染,用中性消毒液清洁。 9.3.4 保持滑道的清洁干燥。避免堵塞,若有液体溅出,及时擦干。
9.3.5 在洗板过程中,如需仪器停止运行,请按键盘上的【复位】键,不要用手或物体强制仪器停止运行。 10 职责
10.1 实验室工作人员应该严格按照本SOP进行操作。
10.2 本SOP的改动,可由任一使用本仪器的工作人员提出,并报经本实验室负责人、科主任签字批准方可通过。
三、电热恒温水箱
原理
接通电源,通过控温器设定温度值,电热管加热,水温升到设定温度时,电源断开,停止加热;当水温低于设定值时,电源接通,重新加热,如此循环工作。 使用方法
1) 使用时应平放在固定台面上,将蒸馏水加至屉板50mm以上。 2) 指示灯:绿灯亮为加热状态;红灯亮为恒温状态。
3) 温度设定应按所需温度的90%预设。如:需37℃,则预设温度为37℃×90%=33 4) 调节面板上“手动再调(RST)”电位器,调节至所需温度。温度要求:37℃±0.5℃
注意事项
1) 使用时必须先加水,后通电,水位不得低于电热管,否则将烧坏电热管。 2) 待温度恒定后方可使用。
3) 长期不用,应将水放净擦干,保管在相对湿度80%,无腐蚀性气体和通风良好的
室内。
维护与保养
1) 每天对仪器外表面进行清洁。
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2) 定期检查水面高度,不符合要求时应及时加水。
3) 箱内因温度适宜,利于细菌生长繁殖,故箱内应定期清洁消毒,防污染。
使用记录
每天检查温度2次,上班时1次,下班前1次,并作好相关记录。发现问题应及时处理,若无法处理则及时上报解决。
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