4. 讨论 4.1. 菌株的筛选
本实验通过90℃水浴20min预处理,杀死无芽孢菌体,再以弱选择性淀粉培养基和稀释涂布平板法对土壤中产淀粉酶芽孢杆菌进行初步筛选,又通过分区划线法对初筛菌株进一步分离纯化,得到纯培养。对比同班同学的其他筛选方案,如先获得纯培养,再筛选产淀粉酶的菌株等,本实验方案的实行效率更高,操作也较为简单。 4.2. 生理生化鉴定
本次实验通过多项生理生化试验鉴定菌种,在实验过程中,由于缺乏经验,操作不熟练,通常导致实验结果不稳定,甚至是错误。例如,糖发酵试验,我们对培养了24h的糖发酵管进行观察,没发现现象,便将其倒掉,而不是继续培养观察,还有其他几项生理生化试验也是如此,后来在对照伯杰式细菌学手册时,发现没有相吻合的菌种,最后才通过从新实验,获得真实数据。 4.3. 酶活力测定
本次实验在酶活力的测定过程中,标准曲线的制作存在较大的误差,主要原因有一下几点:首先,是标准曲线制作的方法不标准,大多是来源于豆丁网的文档;其次,操作不规范,包括移液器的使用,分光光度计的操作等;最后是,仪器的误差。 4.4. 实验心得
本次综合实验收获很多,主要是在理论知识,实验技能,团队合作三个方面提升较大。
在理论知识方面,我们的收获主要是对理论课上学到的知识,通过实践更加深化地进行理解,加深印象,以及对一些实验的细节知识的学习。例如:对紫外杀菌,高压蒸汽灭菌,干热灭菌,的工作原理更加深刻的理解,通过实验,对划线分离,涂布稀释的分离纯化的方法有更加形象的认识。
在实验技能方面,我们的收获主要是加强了基本的实验操作技能,以及优化实验进行的先后顺序。基本的实验操作技能主要包括:配制培养基和无菌操作。表面上看,这些基本实验技能都相对容易,但是实际操作起来却是比较难的,例如配制培养基用时过长,无菌操作划线或涂布时划破培养基,染菌,以及由于操作不熟练,经常出现的被酒精灯烫伤,打翻培养皿等情况。但通过这段时间的练习已经能熟练进行实验操作。优化实验进行的先后顺序有利于我们节省实验操作的时间,提高实验效率。综合实验前期,由于缺乏经验,时间安排不合理,经常导致实验时间过长,实验结果也比较不理想。但经过这次综合实验,我们懂得了,灭菌的时候可以先去吃饭,明天要用的平板可以今天先倒好,于培养箱空培过夜,这样既可以减少冷凝水产生,又可以增强凝固程度。
在团队合作方面,我们的收获主要是分工明确,加强组员之间的讨论交流,分享经验。在综合实验之前,我们组员之间没有合作过实验,日常交流也比较少。通过这次综合实验,我们组员之间一起讨论方案,一起完成实验,尤其到了综合实验的后期,已经可以形成一种队友之间的默契,有时候自己想要一个试剂或者是器材之类的,其他组员会主动取来我想要的东西。
参考文献
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