50 Som U 低于此值应考虑有广泛的胰腺损害或明显的胰腺功能不全，若已确认为胰腺病变，则amy低于此值往往提示有严重的预后。
120Som U 此值在参考值范围之内，若低于此值，在大多数情况下应排除急性胰腺炎的可能性。另外一些疾病，如消化道穿孔、大量酒精摄入，唾液腺体疾病（流行性腮腺炎）、严重肾病、胆结石等可在此值以上。 200Som U 此水平超过参考值上限、若超过此值，同时其他临床及实验室指标也支持的话，可以确诊为急性胰腺炎。
1.3.23. 谷胺酰转移酶（GGT） 参考值 0～50U/L（37℃）
20U/L 此值在参考范围以内，低于此值可排除部分与GGT升高有关的疾病。此值并可作为病人以前或将来的对照值。
60U/L 高于此值应考虑GGT升高的各种可能情况，测定值在60～150U/L范围内，且ALP在正常范围的病人，很可能在测定前有服药和饮酒的情况。
150U/L 高于此值常有肝胆管疾病，应采取各种确诊措施，并进行积极治疗。 1.3.24. 肌酸激酶（CK）
参考值 男 10～200U/L 女 10～170U/L
100U/L 此值在参考范围以内，低于此值则可排除许多种与CK升高有关的疾病，同时此值也可作为病人的对照，用于与以后的CK测定值比较。
240U/L 急性心肌梗塞后1～2天内，可高于此水平，其他有关诊断试验，如CK-MB，可帮助确诊。
1800U/L 当测定值高于此水平时，患其他疾病的可能性高于患单一急性心肌梗塞的可 能，包括横纹肌炎，震颤性谵妄、癫痫等。此时应及时进行其他项目的检验以便确诊。` 1.3.25. 肌酸激酶同工酶（CK-MB） 参考值 0～10U/L
15U/L 高于此值，且有持续性临床表现（胸痛、心电图显示特异性改变等），提示为急性心肌梗塞，应及时进行治疗。
90U/L 高于此值多由于非心肌性CK-MB释放，如恶性肿瘤，应采取其他有关诊断方法，予以确诊。
1.3.26. 乳酸脱氢酶（LDH）
参考值 100～240U/L（L→P）
170U/L 此值在参考范围以内，等于或低于此值可排除许多与LDH升高有关的疾病，而考虑其他的诊断。此值还可作为病人自身的对照，用来与以前或将来的测定值作比较。 300U/L 高于此水平时，应考虑到可能引起LDH升高的各种疾病，如心肌梗塞、肝病变、传染性单核细胞增多症、进行性肌营养不良等。因此，应作其他各种试验，以作出明确诊断。血清溶血可使测定值增高，应予以注意。
500U/L 高于此值，常见于巨幼细胞性溶血，急性白血病、慢性粒细胞性白血病、转移癌和肝昏迷等，此时应作其他多种检测来作出正确诊断。 1.3.27. C-反应蛋白（CRP） 参考值 <12mg/L
20mg/L 测定值高于此水平，则提示病人有严重的细菌感染、活动性风湿及恶性肿瘤等，应立即给予诊断及采取适当的治疗措施。 1.3.28. 免疫球蛋白G（IgG）
参考值 7.0～16.0g/L(免疫比浊法) 6.0g/L 低于此值多与免疫缺陷病有关
17.0g/L 此水平明显高于参考范围上限，多怀疑有IgG型骨髓瘤，此时应通过骨髓细胞学检查、血清蛋白电泳和免疫电泳来协助诊断。
50g/L 高于此值应高度怀疑患有IgG型单克隆性γ球蛋白病（如IgG型多发性骨髓病）。 1.3.29. 免疫球蛋白A（IgA）
参考值 0.57～4.14g（免疫比浊法）（成年人）
0.40g/L 低于此值与免疫缺陷或IgG、IgM型单克隆γ球蛋白病有关
4.50g/L 此值高于参考值上限，高于此值可怀疑是否有IgG型γ球蛋白病，为此还应做别外的一些试验，如骨髓细胞学检查、血清蛋白电泳、免疫电泳等。
10.0g/L 高于此值则高度怀疑为IgA型γ球蛋白病，如IgG型多发性骨髓瘤。 1.3.30. 免疫球蛋白M（IgM）
参考值 0.50～2.70g/L（免疫比浊法） 0.40g/L 低于此值多与免疫缺陷病有关
3.00g/L 此值超出参考范围上限，高于此值可怀疑有IgM型单克隆γ球蛋白病（如原发性巨球蛋白血症等）
1.3.31. 免疫球蛋白E（IgE）
参考值 成人0～380KIU/L 1～2岁儿童 0～12KIU/L
12KIU/L 1～2岁儿童低于此水平表示无严重过敏的危险性。
60KIU/L 1～2岁儿童高于此水平，提示发生严重过敏的危险性较高。 400KIU/L 成人高于此水平，提示有过敏性疾病，如IgE型骨髓病。 1.4. 生化检验的原理和方法 临床生化检验，主要在技术方法的应用方面上探讨生化检验新技术以及新的标记物的选择和评价，用以帮助诊断，又称“诊断生化”。主要应用了下列技术：光谱技术、电化学分析技术、层析技术、电泳技术、离心技术、抗原抗体特异性反应和标记技术、核酸扩增、杂交及序列分析技术等，其中生化分析仪主要运用了光谱技术中的吸收光谱法和比浊法。分别介绍如下： 1.4.1. 吸收光谱法
比色分析是基于溶液对光的选择性吸收而建立起来的一种分析方法，又称吸收光谱法。有色物质溶液的颜色与其浓度有关。溶液的浓度越大，颜色越深。利用光学比较溶液颜色的深度，可以测定溶液的浓度。
1.4.1.1. 物质的颜色和光的关系
光是一种电磁波。自然是由不同波长（400～700nm）的电磁波按一定比例组成的混合光，通过棱镜可分解成红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等各种颜色相连续的可见光谱。如下图：
如把两种光以适当比例混合而产生白光感觉时，则这两种光的颜色互为补色。下图中处于同一直线关系的两种色光（如绿与紫、黄与蓝）互为补色。
溶液颜色 绿 黄 橙 红 紫红 紫 蓝 青蓝 青 吸收光 颜色 紫 蓝 青蓝 青 青绿 绿 黄 橙 红
波长／nm 400～450 450～480 480～490 490～500 500～560 560～580 580～600 600～650 650～760
当白光通过溶液时，如果溶液对各种波长的光都不吸收，溶液就没有颜色。如果溶液吸收了其中一部分波长的光，则溶液就蜈现透过溶液后剩余部分光的颜色。例如，我们看到KMnO4溶液在白光下呈紫红色，就是因为白光透过溶液时，绿色光大部分被吸收，而其他各色都能透过。在透过的光中除紫红色外都能两两互补成白色，所以KMnO4溶液呈现紫红色。
同理，CuSO4溶液能吸收黄色光，所以溶液呈蓝色。由此可见，有色溶液的颜色是被吸收光颜色的补色。吸收越多，则补色的颜色越深。比较溶液颜色的深度，实质上就是比较溶液对它所吸收光的吸收程度。 1.4.1.2. 吸光度的定义
一束强度为Io的平行单色光通过一个含有浓度为C的吸光物质、厚度为L的吸收池时，如上图，一些光子被吸收，光强从Io衰减为It，则该溶液的吸光度A等于：
其中为透光率。 1.4.1.3. 吸收曲线
如果测定某种物质对不同波长单色光的吸收程度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图可得一条曲线，即物质对光的吸收曲线，可准确地描述物质对光的吸收情况。
下图是几种不同浓度的KMnO4溶液的吸收曲线，溶液对波长525nm附近的绿光吸收量最强，而对其他波长的光吸收较弱。光吸收程度最大处的波长叫做吸收波长，用λmax表示。不同浓度的KMnO4溶液所得的吸收曲线，最大吸收波长都一致，只是相应的光被吸收的程度不同。
吸收曲线可作为比色分析中波长选定的依据，测定时一般选择λmax 的单色光作为入射光。这样即使被测物质含量较低也可得到较大的吸光度，因而可使分析的灵每度较高。 若所测定的溶液无色，可在测定前加入适当的显色剂，通过与待测成分的化学反应使溶液晱色即可测定此待测成分。 a. Lamber-Beer定律
其中为吸光系数，有两种表示方法摩尔吸光系数和比吸光系数，摩尔吸光系数的意义为1摩尔浓度的溶液在厚度为1cm时的吸光度，比吸光系数的意义为浓度为1%(w/v)的溶液在厚度为1cm时的吸光度；C为溶液的浓度；L为吸收池的厚度（单位为cm，亦称光径）。 Lamber-Beer定律的意义为：某溶液的吸光度等于该物质的吸光系数、浓度C和光径L（cm）的乘积，当光径不变时，浓度和吸光度成正比。这是生化分析仪利用吸收光谱法进行定量测定的基础，见下图：
Lamber-Beer定律成立的前提条件是：(1)被吸收光为单色平行光，(2)待测定溶液为稀溶液。 b. 比浊法
比浊法分两类：透射比浊法和散射比浊法。
带有小粒的悬浮液和胶体溶液都具有向四面八方散射入射光的性质，当一束平行光通过含有悬浮质点的悬浮液或胶体溶液时，同时受到散射和吸收两个因素的影响，使光的强度减弱。在光源的光路方向上测量透射光（实际上还包括散射光）强度与入射光强度比值，并通过该比值测定出悬浮液或胶体溶液中质点的溶度，称为透射比浊法，在光路的其他方向上测定测量散射光强度，从而测定出悬浮液或胶体溶液中质点的溶度，称为散射比浊法。 免疫学方法是以被检测物质作为抗原，然后用免疫动物的方法制备相应的抗体，利用抗原抗体的特异性结合反应来对被检测物质进行定量。影响免疫比浊的因素：1.抗原抗体比例。抗原抗体比例对复合物的数量和颗粒大小关系极大，当抗体>抗原时成正相关，当抗体<抗原时成负相关。2.抗体纯度和效价。3.增聚剂。在免疫反应中，为增强抗原抗体反应常使用增聚剂，如3-4％的聚乙二醇等，利用其破坏抗原抗体的水化层，促进其靠近反应，但如浓度
不适合，高了会影响其它溶质或产生非特异性聚集影响结果。 透射比浊法
一束强度为Io的平行单色光通过一个含有悬浮质点（颗粒大小与光源波长接近）的悬浮液或胶体溶液时，如上图，其透射光强度I可用下式表示：
式中，L为悬浮液或胶体溶液在光前进方向上的长度，τ为浊度系数，与悬浮质点的浓度C成线性关系。令τ=2.3KC，则：
该式与Lamber-Beer定律相似，这是生化分析仪利用透射比浊法进行定量测定的基础，该法可以与吸收光谱法共用一个检测器，所有生化分析仪，不需增加任何部件，均可利用此法进行测定。大部分特种蛋白，如载脂蛋白类（apoAI,apoB等）、补体类（C3、C4等）、免疫球蛋白类（IgG，IgM等）等，配以相应的试剂，可利用此法在生化分析仪上进行测定。 散射比浊法
一束强度为Io的平行单色光通过一个含有悬浮质点(颗粒大小远小于光源波长)的悬浮液或胶体溶液时，如上图，与入射光垂直方向上，其散射光强度I可用下式表示：
式中，n1、n2分别表示质点与介质的折射率，ν表示单位体积内的质点数，r表示质点半径。可见散射光强度与悬浮质点的浓度成正比，这是利用散射比浊法进行定量测定的基础，因另需在光路垂直方向上增加一检测器，目前只有极少数生化分析仪可利用散射比浊法进行定量测定，而几乎所有的特种蛋白分析仪、免疫分析仪等都能利用散射比浊法进行定量测定。 1.5. 生化试剂的作用和分类 1.5.1. 生化试剂的作用 a) 显色性
在测定前向血清中加入适当的显色剂（试剂），与待测成分的化学反应使溶液变色即可测定此待测成分。 b) 单一性
不同的试剂和血清中的不同成分反应，引起了吸光度的变化。 1.5.2. NAD+－NADH（NADP+－NADPH）指示系统 1.5.2.1. 反应原理
NADH和NADPH在340nm有特征性吸收峰，而NAD+和NADP+在340nm无特征性吸收峰，利用其偶联的脱氢酶(工具酶)反应，根据340nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。
目前利用此指示系统进行测定的临床项目有：ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、α-HBDH 、Glu（己糖激酶法）、UREA、NH4+ 、CO2等 1.5.2.2. 举例说明
ALT（GPT）的测定原理（中生试剂，IFCC） 试剂成分和反应公式：
R1： NADH 、乳酸脱氢酶（LDH）； R2： L-丙氨酸、α-酮戊二酸。
原理：NADH的减少，引起340nm吸光度的下降，下降速率与ALT活性成正比(动力学法)。
a-HBDH（LDH1）的测定原理（罗氏试剂，DGKC） 试剂成分和反应公式：
R1：磷酸盐缓冲液，a-酮基丁酸，防腐剂； R2：NADH，防腐剂。
原理：NADH的减少，引起340nm吸光度的下降，下降速率与a-HBDH活性成正比(动力学法)。
1.5.3. p-NP和p-NA指示系统 1.5.3.1. 反应原理
p-NP和p-NA在405nm有特征性吸收峰，根据405nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活。目前利用此指示系统进行测定的临床项目有ALP、ACP、r-GT、AMY等。 1.5.3.2. 举例说明
ALP（AKP）的测定原理（罗氏试剂，IFCC） 试剂成分和反应公式：
R1：AMP缓冲液，镁离子，锌离子，PH＝10.44； R2：对硝基苯磷酸，防腐剂，PH＝8.5
原理：在镁离子和锌离子的存在下，碱性磷酸酶解离对硝基苯磷酸形成磷酸盐和对硝基苯酚，引起405nm吸光度的上升，上升速率与ALP活性成正比（动力学法）。 GGT的测定原理（罗氏试剂，IFCC） 试剂成分和反应公式：
R1：NaOH，双甘肽，PH＝7.7；
R2：L－r－谷氨酰－3－羟基－4－硝基苯氨，防腐剂。
原理：5-氨基-2-硝基苯甲酸的生成，引起405吸光度的上升，上升速率与GGT活性成正比。
1.5.4. H2O2偶联的指示系统 1.5.4.1. 反应原理
H2O2在过氧化物酶的作用下，可使单一个或成对的无色的色素原氧化成有色的色素，导致某一波长吸光度的增加，因此可用来测定物质的浓度或活性。 1.5.4.2. 举例说明
GLU的测定原理（中生试剂） 试剂成分和反应公式： R1：4-氨基安替吡啉、抗坏血酸氧化酶；R2：葡萄糖氧化酶（GOD）、过氧化物酶（POD）、酚。
测定原理：醌亚胺的生成，导致500nm吸光度的增加，增加的程度与Glu的含量成正比。 CHOL的测量原理（德赛试剂） 试剂成分和反应公式：
R1：Good’s缓冲液PH＝6.7，苯酚，4－氨基安替比林，CHE（胆固醇脂酶），CHO（胆固醇氧化酶），POD（过氧化物酶）。