干扰性较强，受溶血干扰较轻，但血红蛋白＞3.5g/L时依然有较大的干扰，只能测定总胆红素。
7. DPD法商品试剂多为干粉/冻干品单一试剂，复溶后保存时间较短，在自动生化分析仪使用不方便。该法测定总胆红素呈色为红色，易受溶血的干扰，对脂血的抗干扰性较好。 8. 2，5-DCB-4FB法商品试剂为液体双试剂，重复性好，但易受溶血的干扰；经改良的2，5-DCB-4FB法对溶血的抗干扰增强（Hb≤5g/L），但该法易受尿蓝毋干扰，试剂开瓶稳定性不及氧化法。
9. 氧化酶法是胆红素测定较好的一种方法，由于胆红素氧化酶（BOD）在碱性环境中可氧化所有胆红素成分，包括大部分（＞85%）的Bδ，这一特性可用于总胆红素测定；而在酸性条件下，mBc、dBc和大部分Bδ均被氧化，只有Bu不被氧化，这一特性可用于Bc（结合胆红素或直接胆红素）的测定；故可根据不同胆红素反应的最适pH差别，可分别定量测定总/直胆。该法特异性强、灵敏度高、重复性好，对溶血、脂血等抗干扰性强，操作简单，适用于自动化测定等。但该法所涉及的工具酶价格昂贵，故商品试剂价格昂贵。同时在酶法测定中胆红素氧化酶容易受到血清蛋白，尤其是白蛋白的影响，这主要由于作为底物的胆红素在掺入血清白蛋白的α螺旋链时，底物便不能接近酶分子中的活性中心（这一现象称为立体障碍）。从这一点考虑，也可推测与血清白蛋白结合的δ胆红素在保持白蛋白α螺旋链的pH范围内对胆红素氧化酶的作用有抵抗性。自1990年日本学者Kondo向欧洲的专利中提到：低分子量的无机氧化剂、过渡元素等在一定条件下都可氧化胆红素，因而可用来开发测定胆红素的方法后，化学氧化法开始得到长足发展。在化学氧化法中，反应分子与酶不同，属小分子，因此δ胆红素立体障碍所致的反应降低，与重氮法反应程度相类似，相关性良好，这也是开发化学氧化测定试剂的原因。在化学氧化法中，总胆红素测定需要选择适合的氧化剂、反应促进剂、非特异反应抑制剂、抗干扰剂；而结合胆红素的测定来在反应体系中还必需具有非结合胆红素反应抑制剂和吸收剂。近年国外学者在这方面做了不少报道。
10. 1993年日本和光株式会社Kuniaki Tokuda等率先开发出商品钒酸盐胆红素氧化法试剂，并在临床推广应用，它继承了氧化酶法的抗溶血、抗黄疸、抗脂血等许多优点，能够测定总胆红素和直接胆红素；同时该试剂具有良好的稳定性，试剂开瓶稳定性极佳，总胆红素试剂可室温存放。国内不少学者对该试剂也做了不少系统的评价。随着钒酸盐氧化法试剂在临床的应用推广，2001年日本东洋纺绩株式会社又推出亚硝酸盐氧化法，其与改良J-G法、改良2，5DCB-4FB法、钒酸盐氧化法相关较好，弥补了钒酸盐氧化法的某些不足，如个别干扰样品会出现直接胆红素比总胆红素高的现象，但溶血样品对直胆测定有较明显干扰。与此同时，国内不少学者先后开发出过硫酸盐氧化法、综合氧化剂法等。
11. 综合氧化剂法是国内最近开发的一种方法，反应速度快、线性范围宽。但目前尚无配套总/直胆校准品，如以重氮法校准品替代则结果偏低，抗溶血能力相比钒酸盐氧化法试剂低、直胆反应特异性尚待提高。从目前来看，国产试剂在这些方面解决得尚不理想，存在一定问题，尤其是直接胆红素测定更为突出。 A.7.4 白蛋白（清蛋白）与A/G
白蛋白（albumin,Alb）系由肝实质细胞合成，在血浆中的半寿期约为15-19天，是血浆中含量最多的蛋白质，占血浆总蛋白的40%-60%。其合成率虽然受食物中蛋白质含量的影响，但主要受血浆中白蛋白水平调节，在肝细胞中没有储存，在所有细胞外液中都含有微量的白蛋白。
A.7.4.1 白蛋白的测定方法
几十年前，临床检验技术很差，以盐析法沉淀去大部分球蛋白后，测定底层清液中蛋白量作为白蛋白量。盐析法采用的盐类不同、使用浓度不同，结果可以有很大差异，许多年前一直在探索如何和纸电泳的结果相符，球蛋白沉淀不完全使清蛋白结果偏高；球蛋白沉淀完全必
然又带走部分白蛋白，使白蛋白结果偏低。
目前关于血浆或血清白蛋白的测定，最常使用的方法是利用其与某些染料如溴甲酚绿
（bromcresolgreen,BCG）或溴甲酚紫（bromcresolpurple,BCP）特异性的结合能力而加以定量。在pH4.2的条件下，BCG可与白蛋白定量地、特异地结合，而不受血浆中其它球蛋白的干扰。结合后的复合物在628nm有特殊吸收峰，而可与游离的染料相区别，这一吸收峰一般不受血浆中可能存在的其它化合物（如胆红素、血红素等）的影响，测定时应控制染料的浓度、反应的pH和时间。这是很实用的方法。一般用血浆量为20μl，在白蛋白10-60g/L浓度范围内呈良好线性关系、批内C?V值<3%，正常成人参考值为35-50g/L，在直立姿势采血，由于血浓缩其值可略高3g/L。 A.7.4.2 两种方法的差异
传统的溴甲酚绿法测定血清白蛋白会受到非白蛋白类蛋白质的非特异性干扰，而BCP试剂的最适pH值为5.20，接近a-和b-球 蛋白的等电点，能抑制这两种球蛋白与BCP的非特异性反应，因此对测定白蛋白具有更高的特异性。本试验的结果表明，BCP法测定 血清ALB的精密度较好，回收率高，线性范围可达10~80g/L，比传统的BCG法更宽，而且不易受溶血、黄疸和脂血等临床常 见干扰因素的干扰。 BCP和BCG这两种方法测定ALB结果的差异，不同的研究者对不同人群检测的结果不尽相同。Blagg等认为，采用溴甲酚绿长 反应时间测定法检测健康人血清白蛋白的差值可比溴甲酚紫法高11g/L。与标准的电免疫测定法(eletroimnunoassay)相比，采用BCG短反应时间法测定的非肾病病人血清ALB会偏高7g/L，肾病病人则偏高8g/L。Joseph则认为， BCG法测定ALB与散射比浊法的结果较一致，而BCP法比BCG法测定结果偏低5.2g/L；行血液透析的病人比腹膜透析者偏 低更严重。Clase等则认为BCP法测定肾病与非选择性患者、血液透析与其他肾病患者血清ALB的表现一致，比BCG法约偏低 5.5g/L，这一观点与Joseph相反。Blagg等的研究表明，BCP法比BCG法偏低5g/L。最近，Carfray认为，BCP法测定血透病人ALB的结果与\金标准\的散射比浊法结果更接近，BCG法测定ALB结果偏高(尤其是高白蛋白血症患者偏高更为显著)，通常比BCP高3.5g/L。 因为缺乏可供比较的\金标准\，本试验的结果并不能说明BCG的结果偏高、BCP结果偏低，抑或两者皆有。国外学者的观点也不尽 相同，Joseph等认为BCG法更接近\金标准\，而Blagg、Carfray等却认为BCP法更佳，这也许与各自所采用的 标准不同有关。在短时间内，大家不可能接受单一的测定ALB的方法为最终标准方法，更不可能在临床上都应用那一种方法。这两种方 法在临床上都广为应用，尽管有人提出放弃BCG法，但这种观点并未被普遍接受，BCP法的人源质控血清和技术转换在一定时间内仍存在一定的困难。因此，BCP和BCG这两种测定ALB的方法在相当一段时间内仍将共存。 A.7.4.3 A/G的意义
临床多年来习惯使用A/G作为观察肝功能的内容。认为A/G的参考范围为1.5-2.5，大多数是出自国内《实用临床检验》中所述的23% 硫酸钠盐析法的内容。现今都已普遍采用染料结合法作白蛋白测定，国际上也已建立了白蛋白染料结合法作白蛋白测定，国际上也已建立了清蛋白测定标准。溴甲酚绿（BCG）和BCP的染料结合直接比色法测定白蛋白结果已广泛应用，方法简单、实用，完全摆脱了盐析法中白蛋白结果不可靠的困惑。由于BCG法的特异性较差，在测定低浓度时与其他蛋白质反应，使得结果比BCP法偏高，而高浓度时干扰相对弱，所以与BCP法较接近。
国内临床和检验交流不多，是造成至今还在探讨A/G可靠性的根源。其实在20年前国外的检验书和临床著作已不再将A/G列为检验项目。因为A/G失去临床使用价值。2000年美国临床生化学会经10余年反复验证提出的最新肝损害检验项目中更清楚说明A/G的应用。它早应退出“肝功能重要指标”的历史舞台。本实验结果中可反映出肝硬化病人的A/G下降的
趋势，但不能和病人临床状况同步。因此在检验技术已有长足进步的今天，淘汰A/G应该到时候了。
作为过渡阶段，若还需要使用A/G时，必须和现今应用的检验方法相结合，更正原有参考范围，依据实验的资料，大致上可认为染料结合法测A/G范围为1.2-1.9。