第二章 现代分离方法
2.1 色谱法概述
分离科学是自然科学和应用科学的一个重要分支，化学的发展离不开分离科学。
分离方法：物理分离法，化学分离法
物理分离法：以被分离对象所具有的不同物理性质为依据，采用合适的物理手段进行分离 例如：气体扩散法，离心分离法，色谱分离法，过滤，萃取，蒸馏
化学分离法：按被分离对象在化学性质上的差异，通过合适的化学过程使它们获得分离。例如：沉淀和共沉淀，溶剂萃取法，离子交换法
色谱法的发展
1935年，Adams和Holmes,建立离子交换色谱 1938年，建立薄层色谱法 1941年，建立液液分配色谱法 1944年，创立纸色谱法
1952年，产生了气－液色谱法 1953年，发展了气－固色谱法 1959年，提出了大小排阻色谱法 20世纪60年代，高效液相色谱
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色谱分离示意图
在色谱法中，将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相（固
体或液体）称为固定相 ；自上而下运动的一相（一般是气体或液体）称为流动相 ；装有固定相的管子（玻璃管或不锈钢管）称为色谱柱 。当流动相中样品混合物经过固定相时，就会与固定相发生作用，由于各组分在性质和结构上的差异，与固定相相互作用的类型、强弱也有差异，因此在同一推动力的作用下，不同组分在固定相滞留时间长短不同，从而按先后不同的次序从固定相中流出
色谱分析方法的分类 按两相状态分类: 固定相、流动相
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固定相的两种状态
回转吸附剂
按固定相性质分类: 1、柱色谱 2、纸色谱 3、薄层色谱 4、棒色谱 按分离过程的物理化学原理分类: 1、吸附色谱 : 利用吸附剂表面对不同组分有不同吸附能力进行分离
2、分配色谱: 利用不同组分在两相中具有不同的分配系数进行分离 3、其他色谱法: 离子交换色谱法、反应色谱法、纸上电泳法
2.2 色谱理论
分离原理
在色谱分析中，当流动相携带样品通过色谱的固定相时， 样品分子与固定相分子之间发生相互作用，使样品在 流动相和固定相之间进行分配。与固定相分子作用力越大 的组分向前移动速度越慢，与固定相分子作用力越小的组 分向前移动速度越快，经过一定的距离后，由于反复多次 的分配，使原本性质（沸点、极性等）差异很小的组分 之间也可以得到很好的分离。
色谱流出曲线图
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色谱流出曲线图基本参数
1、基线：只有流动相通过检测器所得到的信号，OC 2、峰：流动相含有组分时通过检测器所得到的信号。 （1）峰宽（Wb)峰两侧曲线在拐点作切线而在基线 上相交的线段，IJ
（2）峰高（h)峰最高点至峰底的垂直距离，AB （3）半峰宽（Y ?）峰高一半处峰的宽度，GH （4）标准偏差（σ ）0.607倍峰处色谱峰宽的一半， 1/2EF
保留值：是色谱定性分析的主要依据
（1）死时间（tM) （2） 保留时间(tR) （3） 调整保留时间（tRˊ （4）死体积（ VM
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色谱柱中未被固定相占据的空隙体积，包括进样器和检测器的空间体积
及从进样器到柱和从柱到检测器的连接管路的体积。
V
M = tM * FC
FC ：柱压与柱温下校正后的流动相体积流速，ml/min （5）保留体积（ VR ）
从进样开始到试样色谱峰出现最高点时所流过的流动相体积。
VR
= tR * FC
VR ）
ˊ
（6）调整保留体积（
扣除了死体积后剩下的保留体积。
VR = VR -VM =(tR - tM )* FC
（7）相对保留值（12）
色谱中采用一种物质为标准，其他物质的调整保留值对此标准物质的
调整保留值的比值，称为相对保留值。即
ˊ
r
r12 = tR1ˊ/ tR2ˊ= VR1ˊ/ VR2ˊ
下标1表示其他组分，下标2表示被约定的组分 （8）保留指数（I）
国际上公认并广泛使用的定性指标，是以紧接组分的两个正构烷烃为
基准进行计算的：
IX=100*[(lg tRXˊ- lg tRnˊ)/ (lg tRn+1ˊ- lg tRnˊ)+ n ]
色谱分析
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