论文
第4期 程海娜等:产植酸酶菌株的筛选及产酶条件的研究 345报道的培养基的最佳含水率比较结果偏低,主要是因为没有把麸皮中的含水量计算在内
.
2.2.2 发酵时间对产酶的影响
在250ml三角瓶中,每瓶装15g固体发酵培养基,从72h开始每隔6h测一瓶培养物的酶活.从图3中可以看出在90～120h酶活都比较高,在114h时酶活最高,84h以前产酶量较低.2.2.3 不同培养温度对产酶的影响
配制相同的麸皮培养基3瓶,分别在30℃、33℃和37℃培养.结果发现在37℃时产酶最高,30℃和33℃分别是37℃酶活的89.5%和
图2 培养基加水量对AN00101产植酸酶的影响
Fig.2 Effectofwateraddedtomediumonproducing
phytase
96.8%.
2.2.4 不同pH的提取液对酶收率的影响
配制pH为5.5、6.5和7.50.25molΠL乙酸缓冲液,用NaOH和HCl调自来水pH至5.5、6.5、7.5、8.5,.
,当57.5时酶活明显
,在pH7.5时酶活最高,(其pH为7.5)提取的效果比乙酸缓冲液稍好些,这说明在提取时不仅pH对酶收率有影响,而且不同提取液所要求的最适pH也不同.
图3 发酵时间对AN001011产酶的影响
Fig.3 Effectoffermentedtimeonproducingphytase
表1 不同pH的提取液对酶收率的影响
Table1 EffectofdifferentpHextractsolutiononproducingphytase
提取液Extractsolution
-1酶活PhytaseactivityΠIU ml
-1
乙酸缓冲液Acetatebuffer(0.25Πmol L)自来水Runningwater
pH5.5295
pH6.5312
pH7.5362
pH8.5307
pH5.5334
pH6.5339
pH7.5315
2.2.5 不同浓度CaCl2提取对酶活的影响
根据资料CaCl2对植酸酶有稳定作用,用自来水配制浓度为0%、1%、2%、3%、4%CaCl2,分别对发酵物进行提取.结果(图4)发现CaCl2的确对酶有稳定作用,不同浓度的CaCl2对酶的作用效果也不同,1%、2%对酶的促进作用较小,当浓度达到3%时,酶活最高,浓度为4%时酶活明显降低,随着CaCl2的浓度的升高,Ca可能对植酸酶产生竞争性抑制,反而使酶活下降.2.2.6 加水量、硫酸铵和硫酸镁的正交实验
2+
资料硫酸铵和硫酸镁对产酶有一定的促进作用,
各算一个因子B和C.采用3因子3水平的正交
4
试验,试验采用L9(3)正交表.结果如表
2.
在结果2.2.1中培养基的加水量与其它报道的比较相对较低,而水分对产酶影响较大,所以将加水量算作一个因子A,对其进一步验证,另根据
图4 不同浓度CaCl2提取对酶活的影响
Fig.4 Effectofdifferentconsistencychlorideclciumonproducingphytase