与生物制药考试相关的一些思考题解答
杂交瘤细胞、转化细胞为悬浮型。形态常为球形,可悬浮培养。
3、兼性贴壁细胞。不严格的依赖支持物,某些情况下可在培养基中良好悬浮生长。
动物细胞的生理特征:
1. 细胞分裂周期长( 12~48h )
2. 细胞生长需贴附基质,存在接触抑制
3. 正常二倍体细胞生长寿命有限
4. 对周围环境十分敏感
5. 对培养基要求高:氨基酸、维生素、无机盐、细胞生长因子、贴壁因子、血清等。
6. 对蛋白合成途径和修饰与细菌不同(糖基化)
动物细胞种类:
1原代细胞:直接取自动物组织、器官,经粉碎、消化得到的细胞悬液。特点:需要大量动物,例:鸡胚细胞、原代兔肾或鼠肾细胞、血液淋巴细胞。
2. 二倍体细胞系:通过筛选、克隆从原代培养细胞中获得的具有某种特征的有限细胞株。特点:有限增殖、2n、贴壁、接触抑制。例:MRC-5、WI-38
3、转化细胞系:通过某个转化过程形成, 常由于染色体断裂成为异倍体。特点:自发形成,啮齿动物细胞多发;病毒感染后转化;直接从动物肿瘤组织中建立的细胞系。转化细胞具有无限生命力,一般倍增时间短、对培养条件和生长因子要求较低。
4、融合细胞系:细胞融合:两个或两个细胞合并成一个细胞的过程。主要为杂交瘤细胞。
5、重组工程细胞系:构建含目的基因的真核细胞表达载体(病毒载体、质粒载体)导入动物细胞,通过选择标记筛选工程细胞。
细胞库类型:
1、原始细胞库(master cell bank,MCB):二倍体细胞:群体倍增水平尽可能低的细胞(传代次数尽可能少的细胞),记录详细档案
2、工作细胞库(working cell bank,WCB):生产用细胞库(manufacturer’s working cell bank,MWCB)
血清的作用是什么?
合成培养基成分明确、组分稳定,主要由成分包括:
1、氨基酸 必需氨基酸、半胱氨酸、酪氨酸及其他种类氨基酸;
2、维生素
3、能源物质(葡萄糖、谷氨酰胺)
4、无机盐
5、缓冲体系
6、其他成分 如核酸前体物质(腺苷、鸟苷等)、脂类物质等
血清作用:
1、提供细胞生长所需的各种生长因子和激素
2、提供细胞生长所需的贴附因子和伸展因子
3、提供可识别金属离子、激素、维生素、脂质的结合蛋白
4、提供细胞生长所必须的脂肪酸和微量元素。