与生物制药考试相关的一些思考题解答
在合成培养基的基础上加入哪些成分?
无血清培养基的优点:提高了细胞培养的重现性、减少了血清带来的污染问题、供应充足、产品易于纯化。
在合成培养基中添加一些特殊成分而成:
1、激素和生长因子 (胰岛素和表皮生长因子等)
2、结合蛋白(铁传递蛋白、白蛋白)
3、帖附和伸展因子(纤维结合蛋白胶原、一些多肽)
4、其他有利于细胞生长的因子和元素(谷胱甘肽、硒等)
动物细胞大规模培养方法:
1、悬浮培养:适用于非贴壁依赖性细胞,如杂交瘤细胞。适应于兼性贴壁细胞。
2、贴壁培养:细胞贴附在固体表面生长以单层膜的形式生长,适用于贴壁依赖性细胞与兼性贴壁细胞。
3、假悬浮培养(微载体培养、微囊化培养):
微载体培养指将细胞贴附在微载体上进行悬浮培养。
微囊化培养指将动物细胞包裹在亲水的球状半透性薄膜形成的微囊内。营养成分能透过,但细胞不能出来。适用于贴壁依赖性细胞和非贴壁依赖性细胞。
包埋培养采用各种凝胶进行包埋后培养,主要的凝胶载体为海藻酸凝胶、琼脂糖等。动物细胞包埋后细胞活性不高,很少采用。
结团培养某些结团生长的细胞本身作为贴附基质,可加入直径较小的颗粒(20um)促进结团。很少采用。
哪些特性?
微载体培养:指将细胞贴附在微载体上进行悬浮培养。微载体为直径为100~250um,适用于贴壁细胞生长的球状颗粒。
优点:
1、培养体系的比表面积大,可随载体浓度的改变而改变,细胞培养密度较高
2、培养体系均匀,培养重复性好
3、培养基的利用率高
4、取样后很容易通过显微镜观察载体表面的细胞生长状况
5、收获细胞和细胞产物简单
6、放大容易
7、对人工和空间的需求低
优良的微载体一般要具有以下特性:
1、载体表面与细胞相容性良好,带较低的正电荷,适于细胞的附着和生长
2、微载体的相对密度略大于培养基,在1.03~1.05之间,轻度搅拌就能时载体悬浮起来,停止搅拌很很快沉淀
3、颗粒粒度分布均匀,表面光滑利于细胞铺展
4、载体透明,容易用显微镜直接对细胞观察
5、材料无毒性
6、载体材料为非刚性材料,避免培养过程中相互碰撞损伤细胞
7、可以高温灭菌
8、惰性,不吸收或少吸收培养基组分
9、能重复使用,价廉