1、用照射时间或致死率来表示相对剂量
2、一般认为,对于初次进行诱变处理的菌株,采用致死率为90%~99.9%的高剂量处理,而对于已经受过诱变处理的菌株,采用致死率为70%~80%的较低剂量处理为好,或者交替进行
3、一般采用30W或15W紫外灯,30cm 照射一定时间
4、不同细胞敏感性不同,需要确定照射时间与致死率的关系
五、紫外线诱变的基本步骤
1 、出发菌株的准备 2、前培养(预培养) 3、 菌悬液制备 4、 照射 5、冰浴处理 6、后培养 7、稀释涂布分离
六、 主要新型物理诱变剂
离子注入、激 光、微 波
七、化学诱变剂特点
1、化学诱变剂是一类对DNA起作用并引起遗传变异的化学物质,如碱基类似物、烷化剂、移码突变剂等。
2、化学突变剂往往具有专一性,对基因的某部位起作用;突变多为基因突变,主要为碱基的改变,且以转换为多。见p42表4.2
3、绝大对数具有毒性,90%以上是致癌物质或极毒药品,使用时要格外小心,不能直接口吸,避免与皮肤接触;所有物品需要做无公害处理,防止环境污染;未生育者不宜操作
八、 碱基类似物诱变的原理P42
九、 5-BU的诱变机制,图示和文字说明P43
原理:酮式5-BU相当于T,与A配对,而烯醇式5-BU相当与C,与G配对。
十、 烷化剂及其作用机制 P45
十一、 常见烷化剂 NTG、NMU、EMS、DES 、DMS等等
十二、移码突变剂及其诱变机制,图示和文字说明
移码突变剂:分子扁平,可嵌入碱基之间;主要为丫啶类荧光染料,主要有丫啶橙、丫啶黄、原黄素、溴化乙啶(EB)等
机制:嵌入双链碱基间使链拉长,两碱基间距离加宽,在DNA复制时造碱基插入或