白，在增溶时应加入还原剂打开蛋白质中所有二硫键，对于没有二硫键的目标蛋白有时也应使用还原剂，因为含二硫键的杂蛋白会影响包涵体的溶解，同时还应加入金属螯合剂用来螯合Cu2+、Fe3+等金属离子以防止其与还原状态的巯基发生氧化反应。 1分
复性过程错误发生的主要原因是：在去除变性剂的同时，重组蛋白质在体外折叠，分子间存在大量错误折叠和聚合，复性效率往往很低，包涵体蛋白折叠复性的效率实际上取决于正确折叠过程与聚集过程之间的竞争。1分
复性方法的优点：透析、稀释和超滤复性法，这三种方法是最传统也是应用最普遍的蛋白质折叠复性方法，使变性剂浓度降低到蛋白质能恢复折叠的浓度。1分
复性方法的缺点：复性活性回收率低，而且难于与杂蛋白分离。稀释法大大增加溶液体积，不利于后续的分离纯化；透析法耗时长，易形成无活性蛋白质聚集体；超滤法在膜上聚集变性，易造成膜污染；稀释法处理量太大，不利于工业放大。1分
LC复性是最好的原因：与传统的稀释法和透析法相比，液相色谱复性的优点是：
①
②
③
④
2.何谓生物工程下游技术？举例论述在设计下游分离过程中，必须考虑哪些问题方能确保我们所设计的工艺过程最为经济、可靠。
答：生物工程下游技术：它是描述回收生物产品分离过程原理和方法的一个术语.是指对于由生物界自然产生的或由微生物菌体发酵的、动植物细胞组织培养的、酶反应等各种生物工业产生过程获得的生物原料，经提取分离、加工并精制目的成分，最终使其成为产品这个过程中所采用的方法和手段的总称．2分 生物工程下游技术一般处理步骤： 细胞分离 成 品制作 2分
首先要了解提取对象和杂质的理化性质,生物学性质；明确目的物要达什么样的纯度和收率来设计工艺过 程。 1分 ①控制好下游技术提取步骤
生化分离技术的步骤越多，提取收得率也越低． 1分 ②对于原料来说
来源丰富,含量相对较高,杂质尽可能少. 1分 明确整个阶段的任务
初始阶段: 主要任务在于从相对较大体积的抽提液中除去大量杂质,同时能浓缩样品和保障样品处于稳定的环境中. 1分
中间阶段: 主要任务是进一步除去大量杂质,但这些杂质与目的物的性质差异相对较小,所以选择分离方法要有较高的分辨率. 1分 精制阶段: 主要任务是除去微量杂质,使最后的产品获得高纯度. 1分 总之产品的收得率和质量控制应是贯穿生物工程下游技术工艺过程的主线.
在进样后可很快的除去变性剂；1分 色谱固定相对变性蛋白质的吸附可明显的减少、甚至完全消除变性蛋白质分子在脱离变性剂环境后在蛋白质复性的同时，可使目标蛋白质与杂蛋白分离达到纯化的目的，使复性和纯化同时进行1分 便于回收变性剂，降低废水处理成本。 1分 的分子聚集，从而避免了沉淀的产生，提高蛋白质复性的质量和活性回收率；1分