第一步：发酵液预处理。发酵液离心沉淀除去大量杂质。保留上清液。
第二步：初步提取。因为黑曲霉代谢产物-酶是胞外产物，所以无需破碎细胞，直接采用冷
藏有机溶剂乙醇在4℃过夜沉淀得到白色絮状物。循环几次后，合并白色絮状物。
第三步：乙醇分级后的黑曲霉代谢产物-酶仍含有许多杂质，这时用一些层析技术，如离子
交换层析。最后收集层析液。
第四步：收集层析液真空干燥，测分子量。
2010-2011学年第一学期《生物工程下游技术》试题（B卷）答案
二、选择题（将正确的答案写在横线上，可选的答案个数不固定，每题全对3分，共30分）
1. 生化分离技术特点( BCD )
A. 均一性的绝对性 B. 成分复杂 C. 含量甚微 D. 易变性
2. 动物细胞培养的操作方式有哪些 ( ABCD )
A. 分批式 B. 流加式 C. 连续式 D. 灌注式
3. 珠磨法提高细胞破碎率的方法有 ( BCD )
A. 适当的增加压力B. 增加装珠量C. 延长破碎时间D. 提高转速
4. 分配系数Kd表示为 ( ACD )
A. Kd＞1表示凝胶与分离组分有亲和作用或者其它作用
B. 0＜Kd＜1表示是部分渗透分子，进行是组别分离
C. Kd= 0表示是全排阻分子，Ve=Vi
D. Kd= 1是全渗透分子，Ve=Vi+V0
5. 下列表述错误的有 ( AD )
A. 阳离子交换剂- Q B. 阳离子交换剂-CM
C. 阴离子交换剂- DEAE D. 阴离子交换剂-SP
6. 细胞浓度的间接测量方法有 ( ABC )
A. 核酸 B. 蛋白质
C. ATP D. 浊度法
7. 理想的凝胶过滤层析载体 ( ABC )
A. 对样品不产生非特异性吸附作用 B. 有高度亲水性，又要不溶于水
C. 具有化学和物理稳定性 D. 是孔径较小的多孔性材料
8. 影响SDS-PAGE分离效果因素 ( CD )
A. SDS分子大小 B. SDS分子质量
C. 凝胶浓度 D. 电泳缓冲系统
9. 下列膜分离技术中，膜过滤分离机理为筛分效应的是 ( BD )
A. RO B. UF
C. NF D. MF
10. 影响电泳迁移率的因素 ( ABD )
A. 电场强度 B.溶液的pH值
C. 溶液的等电点 D. 溶液的离子强度
三. 简述题（5小题，每小题7分，共35分）
1. 常用的细胞破碎方法？
(一)高速匀浆法 (二)珠磨法 (三)超声破碎法 (四)酶溶法 (五)化学渗透法 (六)微波加热法
(七)其他方法 1.X-press法2.渗透压法3.反复冻结-融化法4.干燥法
2. 浓度极化产生的原因及如何降低浓度极化？