3）由于pH ,离子强度，温度等变化因素，分离过程易造成失活和污染现象；
4）性质不稳定，随时间变化。
1.迅速加工,缩短停留时间,
2.控制好操作温度和pH,
3.减少或避免与空气接触受污染的机会,
4.总体设计好各组分的分离顺序.
2.浓度极化产生的原因及如何降低浓度极化？
浓差极化是指在超滤过程中，由于水透过膜，因而在膜表面的溶质浓度增高，形成梯度，在浓度梯度的作用下。溶质与水以相反方向扩散，在达到平衡状态时，膜表面形成一溶质浓度分布边界层，它对水的透过起着阻碍作用.
通过改变诸如速度、压力、温度和料液浓度之类的操作参数，可以降低浓差极化效应。
3.简述离子交换法的一般步骤。
1．上样阶段，此时离子交换剂与平衡离子结合；
2．吸附阶段，混合样品中的分子与离子交换剂结合；
3．开始解吸阶段，杂质分子与离子交换剂之间结合较弱而先被洗脱，目标分子仍处于吸附状态；
4．完全解吸阶段，目标分子被洗脱；
5．再生阶段，用起始缓冲液重新平衡层析柱，以备下次使用。
4. 凝胶过滤分辨率及影响分辨率因素？
层析分离常采用分辨率（RS）来描述两种物质之间分离效果的好坏。分辨率定义为两个洗脱峰峰顶对映的洗脱体积之差比上两峰在基线上峰宽的和的平均值。
分离两种物质时分辨率取决于这两种组分的洗脱体积和峰宽。
而决定组分洗脱体积和峰宽的因素包括两种组分的分子大小，
凝胶柱的选择性和柱效。
5.简述亲和层析的分离过程。
1)选择合适的配体。
2)将配体固定在载体上，制成亲和吸附剂，而配体的特异性结合活性不被破坏。
3)当样品液进入亲和柱时，其中的特定生物分子与亲和吸附剂相结合，而被吸附在柱上。
4)未被吸附的杂质可随缓冲液洗掉。
5)用洗脱液将结合在亲和吸附剂上的特定生物分子洗脱下来。
四. 论述题（每小题15分，共15分） 请根据下游技术的一般工艺过程及它们的主要技术特点设计一套经济的且技术可行的提取纯化方案。（至少要涉及三种技术）
发酵液 提取 原材料：酵母 处理对象：酵母蔗糖酶
第一步：离心要沉淀。
第二步：破碎细胞。因为酵母蔗糖酶是胞内产物，所以要破碎细胞把酵母蔗糖酶释放出来，采用氨解法。 第三步：用氨解法抽提粗酶还含有大量杂质，需要进一步分离纯化，采用有机溶剂乙醇沉淀。
第四步：乙醇分级后的蔗糖酶仍含有许多杂质，这时用一些层析技术，如离子交换层析。
最后检测蔗糖酶纯度和得率。
2009-2010学年第一学期《生物工业下游技术》试题（A卷）答案.
二、选择题（将正确的答案写在横线上，可选的答案个数不固定，每题全对3分，共30分） Rs Ve2 Ve1(Wb1 Wb2)/2