1.举例说明蛋白质的一级结构与功能之间的关系。 2.举例说明蛋白质的空间构象与功能之间的关系。
3.一个含有13个氨基酸残基组成的十三肽的氨基酸组成为:Ala、Arg、Asp2、Glu2、Gly3、Leu、Val3。部分水解得到以下肽段,其序列由Edman降解法测定后确定,试推断出该肽链的原始氨基酸序列。
4.实验分析题:有一蛋白质混合液含有3种蛋白质,他们的相对分子质量和等电点如下,
蛋白质 相对分子质量 等电点
A 20 000 8.5 B 21 000 5.9 C 5 000 6.0 请设计一个实验来分离这3种蛋白质。
5.有人纯化了一个未知肽,其氨基酸组成为:Asp1,Ser1,Gly1,Ala1,Met1,Phe1和Lys2,又做了一系列分析,其结果如下:(1)DNFB与该肽反应再用酸水解得DNP-Ala;(2)胰凝乳蛋白酶CT消化后,从产物中分离出一个纯四肽,其组成为:Asp1,Gly1,Lys1,Met1,此四肽的DNFB反应降解产物为DNP- Gly;(3)胰蛋白酶T消化该肽后又可以得到组分分别为Lys1,Ala1,Ser1及Phe1, Lys1,Gly1的两个三肽,以及一个二肽,此二肽被CNBr处理后游离出自由天冬氨酸。请列出八肽的全顺序并简述推导过程。
6.某天然九肽的组成为:Gly2,Phe2,Tyr1,Met1,Asp1,Arg1和Pro1,经胰凝乳蛋白酶CT水解后,可得到一个五肽和一个四肽,四肽的组成为:Phe1,Tyr1,Gly1和Pro1。此九肽的CNBr处理物经阳离子交换树脂层析并洗脱的一个组成为Arg1,Phe1和Gly1的三肽;此九肽如经胰蛋白酶水解可得Phe,如用DNFB反应后再水解测得DNP-Tyr。请写出此九肽的全顺序解析过程。
7.Lys、Arg、Asp、Glu、Thr和Ala混合液在pH值为12时,加到阴离子交换树脂上,用连续递减的pH值溶液洗脱时,请预测这些氨基酸的洗脱顺序。 8.(1)一个Ala、Ser、Phe、Leu、Arg、Asp和His的混合液在pH 3.9时进行纸电泳,指出哪些氨基酸向阳极移动,哪些氨基酸向阴极移动?(2)带相同电荷的氨基酸,如Gly和Leu在纸电泳时常常稍能分开,解释其原因。(3)假如有一个Ala、Val、Glu、Lys和Thr的混合液,在pH 6.0时进行纸电泳,然后用茚三酮显色。请画出电泳后氨基酸的分布图,分别标明向阳极或阴极移动、停留在原点、分不开的氨基酸的位置。
9.用阳离子交换树脂分离下列氨基酸,用pH 7.0的缓冲液来洗脱时,那种氨基酸先被洗脱下来?(1)Asp和Lys;(2)Arg和Met;(3)Glu和Val;(4)Gly和Leu;(5)Ser和Ala;
10.用酸水解一种六肽,定量回收得到甘氨酸及另一种氨基酸。用胰蛋白酶处理该肽生成的产物,在不同的层析和电泳系统中均只有一个单一的斑点,但迁移率与未经处理的六肽不同。用胰凝乳蛋白酶水解原来的六肽,生成的产物中有一游离氨基酸并有紫外吸收,试从上述实验结果排出该六肽的氨基酸顺序。 11.根据实验结果推断一多肽链的氨基酸顺序:(1)酸水解和氨基酸组成为Ala2,Arg,Lys2,Met,Phe,Ser2;(2)羧肽酶A水解得一氨基酸为Ala;(3)胰蛋白酶水解得4个肽段,其氨基酸组成分别是①Ala,Arg,②Lys,Phe,Ser,③Lys,④Ala,Met,Ser;(4)溴化氰水解得两个肽段,其氨基酸组成是①Ala,Arg,Lys2,Met,Phe,Ser;②Ala, Ser;(5)嗜热蛋白酶水解得两个肽段,其氨基酸组成如下①Ala,Arg,Ser;Phe,②Ala,Lys2,Met,Ser。
12.某同学洗衣服,将羊毛衫和丝绸裙子放进热水中清洗后,再放入电干燥器中烘干,结果发现羊毛衫变小了,而丝绸裙子却没有什么变化,请运用生物化学知识解释此现象。 五.计算题(每题5分)
1.已知天冬氨酸的解离常数精氨酸的pK(α-COOH)=2.09,pK(α-NH3+)=9.82,pK(R基)=3.86,其pI值为求天冬氨酸的等电点是多少?在pH=7的缓冲液中,天冬氨酸带何种电荷?
2.1.0毫克纯酶的氨基酸分析得到58.1微克的亮氨酸(分子量=131.2),36.2微克的色氨酸(分子量=204.2),计算此酶的最小分子量。
3.一个大肠杆菌细胞中含106个蛋白质分子,假设每个蛋白质分子的平均相对分子量为40000,并且所有分子都处于α-螺旋构象,试计算每个大肠杆菌细胞中的蛋白质多肽链的总长度。(设氨基酸残基的平均相对分子量为118)
4.某蛋白质多肽链有一些区段为α螺旋构象,另一些区段是β折叠构象,该蛋白质相对分子量为240000,多肽外形总长5.06×10-5cm,计算多肽链中α螺旋构象占分子长度的百分之多少?(设氨基酸残基的平均相对分子量为120)
5.已知牛血清白蛋白含色氨酸0.58%(按质量计),色氨酸的相对分子量为204,(1)计算最低相对分子质量;(2)用凝胶过滤测得牛血清白蛋白的相对分子质量大约为70 000,问牛血清白蛋白分子中含有几个色氨酸残基?
6.人的头发每年以20cm的速度生长,头发主要是α-角蛋白纤维,是在表皮细胞的里面合成和组装成的―绳子‖。 α-角蛋白纤维的基本结构单元是α-螺旋。如果α-螺旋的生物合成是头发生长的限速因素,请问,α-螺旋链每秒钟合成多少个肽键才能解释头发每年的生长速度。
第二章 核酸的结构与功能
一、选择题(每题1分)
1.组成核酸的基本结构单位是( )。
A.单核苷酸 B.戊糖和脱氧戊糖 C.磷酸和戊糖 D.含氮碱基 2.下列DNA双链中,Tm值最高的是( )。
A.(G+C)﹪=25﹪ B.(A+T)﹪=25﹪ C.(G+C)﹪=60﹪ D.(A+T)﹪=55﹪ 3.G—C含量越高,Tm值越高的原因是( )。
A.G—C之间形成了离子键 B.G—C之间形成了两个氢键 C.G—C之间形成了一个共价键 D.G—C之间形成了三个氢键 4.将脱氧核苷酸彻底水解时产物中含有( )。
A.D-α-脱氧核糖、磷酸、含氮碱基(A、G、T、C) B.核糖、磷酸 C.D-核糖、磷酸、含氮碱基(A、G、U、C) D.脱氧核苷和核糖 5.下列关于DNA变性的表述( )是正确的。
A.随温度逐渐升高,紫外吸收值逐渐增大 B.Tm值只与DNA分子的大小有关而与构成无关 C.DNA变性从微观考虑是个瞬时过程 D.溶液的构成对DNA分子的Tm值没有影响 6.核苷中核糖与碱基之间的连接键是( )。
A.戊糖的C1与嘧啶的N1形成的N-糖苷键 B.戊糖的C6与嘧啶的N2形成的N-糖苷键 C.戊糖的C4与嘧啶的N1形成的N-糖苷键 D.戊糖的C4与嘧啶的N2形成的N-糖苷键 7.下列关于DNA的描述中,( )是错误的。
A.在二级结构基础上往往形成超螺旋结构 B.维持二级结构的作用力主要是氢键 C.线粒体中的DNA呈环状
D.提出DNA双螺旋结构的主要依据是chargaff原则和X射线衍射图谱 8.下列DNA碱基组成规律( )是错误的?
A.分子中A=C,G=T B.分子中A+G=C+T
C.同一个体不同组织器官其DNA碱基组成相同 D.年龄、营养状态及环境的改变不影响DNA碱基组成 9.DNA的一级结构是指( )。
A.各核苷酸之间的连接键性质及核苷酸的排列顺序 B.核糖与含氮碱基的连接键性质 C.各核苷酸中核苷与磷酸的连接键性质
D.DNA分子由数目庞大的C.A.U.G四种核苷酸通过3’,5’-磷酸二酯键连接而成
10.热变性的DNA分子在适当条件下可以复性,条件之一是( )。
A.骤然冷却 B.缓慢冷却 C.浓缩 D.加入浓的无机盐 11.下列关于核酸的描述中,( )是错误的?
A.多核苷酸链的3’端为磷酸基团 B.核酸分子具有极性
C.多核苷酸链的5’端为磷酸基团
D.核酸链的书写方向为5’→ 3’方向,其5’端总是在左边 12.组成DNA的两条核苷酸链是( )。
A.反向平行绕同一中心轴构成双螺旋 B.交叉扭在一起 C.顺向平行绕同一中心轴构成双螺旋 D.均为左手螺旋
13.在适宜条件下,核酸分子两条链通过杂交作用可自行形成双螺旋,这取决于( )。
A.DNA的Tm值 B.碱基序列的重复程度 C.核酸链的长短 D.碱基序列的互补 14.tRNA的分子结构特征是( )。
A.有密码环 B.有反密码环和3’端有-CCA序列 C.有反密码环和5’端有-CCA序列 D.5’端有-CCA序列 15.具5’-CGGTA-3’顺序的单链DNA能与下列( )RNA杂交。
A.5’-GCCA-3’ B.5’-GCCAU-3’ C.5’-UACCG-3 D.5’-TACCG-3’ 16.真核生物染色质的基本结构单位是( )。
A.核小体 B.DNA C.染色单体 D.核心颗粒 17.RNA和DNA彻底水解后的产物是( )。
A.核糖相同,部分碱基不同 B.碱基相同,核糖不同 C.部分碱基不同,核糖不同 D.碱基不同,核糖相同 18.真核生物细胞中核小体的组成是( )。
A.DNA和组蛋白 B.DNA和酸性蛋白 C.rRNA和组蛋白 D.核心颗粒 19.下列关于mRNA描述 ( )是错误的?
A.原核细胞的mRNA在翻译开始前不需要加―polyA‖尾巴 B.原核细胞的mRNA在翻译开始前需要加―polyA‖尾巴 C.真核细胞的mRNA在5’端有特殊的―帽子‖结构
D.真核细胞的mRNA在3’端有特殊的―尾巴‖结构 20.核酸溶液的紫外吸收峰在波长( )nm处。
A.260 B.280 C.230 D.220 21.核酸的紫外吸收特性来自( )。
A.嘌呤、嘧啶、碱基 B.戊糖 C.磷酸二酯键 D.磷酸核糖 22.核酸变性后,可发生( )效应。
A.失去对紫外线的吸收能力 B.增色 C.最大吸收峰波长发生转移 D.减色 23.DNA变性是指( )。
A.链间氢键断裂,双螺旋结构解开 B.分子中3’-5’磷酸二酯键断裂 C.核苷酸游离于溶液中 D.黏度增加,ε(P)值低 24.下面关于Tm值的论述中( )是错误的。
A.含G-C多的DNA,其Tm值较低 B.不同种属的DNA有其特定的Tm值 C.Tm值与介质中离子强度有关 D.介质离子强度低时,DNA的Tm值也低 25.某DNA双螺旋的一条多核苷酸碱基序列为ACCTTAGA,另一条链的碱基顺序为( )。
A.TGGAATCT B.AGATTCCA C.TCTAAGGT D.ACCTTAGA 26.下列( )为tRNA三级结构的描述。
A.具有倒L型高级结构 B.呈三叶草形
C.三个突环好像三片小叶 D.双螺旋结构区为三叶草的柄 27.tRNA的氨基酸接受臂的特点是( )。
A.3’-端有CCA结构 B.5’-端有羟基 C.3’-端有磷酸基 D.富含腺嘌呤 28.DNA螺旋结构的特点之一是( )。
A.碱基朝向螺旋内侧 B.碱基朝向螺旋外侧 C.磷酸核糖基朝向螺旋内侧 D.碱基平面与螺旋轴平行 29.关于tRNA下列表述( )是错误的?
A. tRNA的二级结构是三叶草型 B. 是RNA中含量最多的分子 C. 是RNA中稀有碱基最多的 D. tRNA的3’端几乎都有CCA结构 30.DNA样品中G-C含量高时,( )。
A. Tm值高 B. Tm值低 C.不影响Tm值 D.Tm值范围宽 31.DNA溶液离子强度高时,( )。
A. Tm值高 B. Tm值低 C.不影响Tm值 D.Tm值范围宽