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文件编号： 元谋县人民医院 链球菌属纸片扩散法药敏 版本：第一版 微生物室作业指导书 试验标准操作规程 生效日期：2011-11-01 共2页 1．目的
规范链球菌属纸片扩散法药敏试验标准操作规程，确保药敏结果的准确。 2. 适用范围
本操作规程适用于链球菌属细菌。 3. 选药原则
在本规程所列受试抗菌药物主要根据以下因素选择。
3.1 现行版本的CLSI M02和M100对链球菌属细菌纸片扩散法药物敏感试验的要求。 3.2 本单位处方手册中的抗菌药物名册。
3.3 本单位上一年度链球菌属细菌耐药监控数据。 4. 质控
纸片药敏试验应使用肺炎链球菌ATCC49619进行质量控制，质控菌株可接受的抑菌圈范围参见现行版本的CLSI M100-A19。 5. 材料和仪器
5%羊血的MHA培养基、无菌生理盐水、药敏纸片、无菌棉签、35℃孵育箱、测量尺、标准比浊管或比浊仪。 6．操作步骤
参见《药物敏感性试验标准操作规程》。 7. 判断标准 见表1。
表1 链球菌属细菌纸片扩散试验判断标准
药敏纸片
青霉素（10?U） 万古霉素（30??g） 头孢曲松（30??g） 红霉素（15??g） 克林霉素（2??g） 左氧氟沙星（5??g）
判断标准（mm）
敏感 ≥24 ≥17 ≥24 ≥21 ≥19 ≥17
中介 11～13 16～20 16～18 14～16
耐药 ≤16 ≤10 ≤15 ≤15 ≤13
备注
参见结果解释9.1
参见结果解释9.2、9.3
8. 注意事项
抑菌圈直径量取的范围为包括药敏纸片在内的被药物完全抑制的区域（肉眼判断），量取时应打开药敏平板盖子，用反射光源，从上侧测量抑菌圈直径。测量区域应为肉眼观察无明显可见菌落生长的区域，忽略只有用放大镜才能观察到的位于抑菌圈外缘的细菌菌落。 9.结果解释
9.1对青霉素敏感的链球菌菌株可以认为对氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、头孢克洛、头孢唑啉、头孢迪尼、头孢吡肟、头孢罗齐、头孢噻肟、头孢布坦（仅对A群链球菌）、头孢曲松、头孢呋新、头孢泊肟、头孢噻吩、头孢吡硫、厄他培南、亚胺培南、洛比卡比、美罗培南等抗菌药敏感，无需对这些抗菌药进行药物敏感试验。
编写：常晓林 2011-09-10
审核：文佳琼 2011-11-11
批准：文佳琼 2011-11-01
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9.2 青霉素和氨苄西林被推荐用于B群链球菌的围产期预防用药。头孢唑啉被推荐用于非严重青霉素过敏的妇女的治疗，严重过敏的病人应使用红霉素或克林霉素。B群链球菌对氨苄西林、青霉素和头孢唑啉敏感，但可能对克林霉素和（或）红霉素耐药。如果从青霉素严重过敏的怀孕妇女分离到B群链球菌，必须进行克林霉素和红霉素的药物敏感试验并报告结果。
9.3 红霉素耐药，克林霉素敏感的菌株应检测菌株对克林霉素的诱导性耐药性，对克林霉素和诱导性耐药性可通过“D”试验进行确认，即将红霉素和克林霉素纸片间隔15-26mm，35℃孵育16-18小时观察结果，如克林霉素抑菌圈在朝向红霉素纸片的方向出现“D”型变化，该菌株为对克林霉素诱导耐药的菌株，该菌株对克林霉素的药敏结果应修正为耐药。
参考文献
[1] CLSI. Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing; Nineteenth Informational Supplement.CLSI document M100-S19.Wayne,PA:Clinical and Laboratory Standards Institute,2009
[2] 叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南formn大学出版社，2006
编写：常晓林 2011-09-10
审核：文佳琼 2011-11-11 批准：文佳琼 2011-11-01