3.1.2.2 其他香豆素类化合物的代谢
于治国等研究了大鼠单剂量灌胃给药6,7-二甲氧基香豆素后各生物样品中主要代谢产物。大鼠口服6,7-二甲氧基香豆素后，在胆汁中存在2个主要代谢产物(M1和M2)，在血样和尿样中则以M1为主，而在粪样中未检出，M1和M2的含量占生物样品中代谢物总量的80%以上。推测6,7-二甲氧基香豆素在大鼠体内的2个主要代谢产物(M1和M2)为6,7-二甲氧基香豆素经水解脱甲基生成的羟基化合物，均以硫酸酯结合物形式存在，且互为同分异构体。
Yuan等研究了香豆素化合物甲氧基欧芹素肝微粒中的代谢情况，采用LC-MS-MS鉴定了5种代谢产物，其一是发生了去甲基化后生成的代谢产物去甲基甲氧基欧芹素(desmethylosdzol)；其他是发生脱氢反应后生成的代谢产物去氢甲氧基欧芹素(dehydro-osthol)，共4种顺反异构体，由此说明了甲氧基欧芹素生物利用度低的原因主要是由细胞色素P450酶系引起的快速I相代谢导致。Yoo等研究了当归中前胡醇当归酰酯( decursino1ange late)在人肝粒体中的代谢反应，前胡醇当归酰酯发生氧化作用生成二氢二醇的代谢物，由于CY P2A6的影响，中间可能会产生环氧化物；此外还和GSH发生结合反应。
K leiner 等通过研究发现橙皮油素(auraptene, AUR ), 乙氧基香显素(ethox ycoumarin，ETC )，环氧橙皮油素(epoxyauraptene，EPO)等香豆素类化合物经大鼠S9孵育后都可以转化为7-羟基香豆素，进而进一步生成3,7-羟基香豆素和6，7-二羟基香豆素(图2)。在大鼠血浆和尿液中加入葡萄糖醛酸转移酶和硫酸转移酶后，给药ETC后的生物样品中7-羟基香豆素的含量显著高于AUR，提示AUR在体内的存留时间长于ETC，其原因可能是AUR含有牛儿氧基（gerany bxyl）侧链。
图2 AUR, ETC, EPO几种香豆素类化合物的代谢反应
当归中的香豆素成分8-甲氧基补骨脂内酯服用后在体内几乎全部被代谢，可经脱甲基生成代谢物8-羟基补骨脂内酯、呋喃环开环形成羧酸6-（羧甲基)-7羟基-8-甲氧基香豆素及羟化代谢物5-羟基-8-甲氧基补骨脂内酯，研究还发现生成的代谢产物均具有活性。秦皮中促进尿酸排泄的香豆素衍生物秦皮苷经过体内代谢后，在大鼠尿液中发现5个代谢产物，分别是秦皮亭-7-O硫酸酯、秦皮亭-7-O-β-葡糖苷酸、秦皮亭、6,7, 8-三羟基香豆素和秦皮素定。由于肠内细菌的作用，秦皮苷被水解成秦皮亭，经过代谢后脱甲基形成6,7,8-羟基香豆素。在肝脏，秦皮亭通过儿茶酚邻位甲基转移酶而被甲基化。 3.1.2.3 香豆素代谢与酶的诱导
研究表明，香豆素的代谢反应主要是通过CYPl, CYP2和CYP3等P450同工酶的诱导作用而发生。刘志锋通过研究发现补骨脂素、异补骨脂素、欧前胡素及异欧前胡素4种香豆素化合物在高浓度时均表现出对CYP2A6的抑制作用，同时欧前胡素和异欧前胡素还对CYP1A2和CYP2E 1表现出普遍而强烈的抑制作用。香豆素是CYP2A 6特异性的底物，能被CYP2A6代谢为7-羟基香豆素；由于含有羟基，易在GSH酶、葡萄糖醛酸转移酶和硫酸转移酶的作用下发生结合反应，导致极性变大，较易排出体外。直到现今都一直用代谢香豆素的能力将CYP2A 6活性分为强代谢个体或者弱代谢个体，用来评估个体间CYP2A 6活性的差异。
3.2 香豆素生理活性
香豆素不仅类别多，而且具有多方面的生理活性，不少具有药理作用，但有的却具有毒性。 3.2.1 抗菌作用
不少香豆素具有抗菌活性，如七叶内酯及其苷、来自链霉菌代谢物的新生霉素( novobiocin)、具有抗菌活性的色原酮香豆素frutinone A，以及最近从蕨类植物Cyclosorus interruptus 中分离得到的含亚乙二氧基(ethylenedioxy)的新香豆素interrptin G等。 3.2.2 肝脏毒性
黄曲霉素具有对肝脏的高毒性，其中黄曲霉素B1和G1为主要成分，但以AfB1毒性最高。必要的结构是呋喃环上的双键和不饱和内酯环。这种毒性随双键饱和而降低，高温加热可因内酯环开裂而便毒性大部分被破坏。
3.2.3 光敏作用
光敏作用主要来自呋喃香豆素，光敏所致生物过程包括致突变、病毒和微生物的灭活、皮肤红斑、致肿瘤和酶的失活等。在一定剂量下，呋喃香豆素可用于治疗某些皮肤病如牛皮癣和覃样霉菌病。利用盐水虾（brine shrimp)曾筛选了数种己知香豆素的光毒性作用，如几种常见的线型呋喃香豆素的光毒活性次序为：补骨脂内酯>香柑内酯>花椒毒内酯。 3.2.4 抗凝血作用
双香豆素(dicoumarol)的抗凝血作用早在20世纪初叶就已发现，现已知其活性必需结构是一个完整的4-羟基香豆素带有C-3取代的碳链。3-和4-苯基香豆素一般也具有弱的抗凝活性，其中以海棠果内酯活性最显著。 3.2.5 扩冠作用
具有血管扩张作用的凯林内酯酰化物的共同特点是C-3'和C-4'为顺式构型，这可能是其扩冠的活性必需结构。近年进一步证实从白花前胡根中分得的白花前胡丙素( praeruptorin C)可以降低心脏对氧的需求，这可能就是前胡在临床上能抗心绞痛的一个作用机制。 3.2.6 抗HIV作用
( + )-calanolide A是胡桐内酯类中抗HIV-1活性最强者，由于它只选择性地抑制HIV-1-RT，这一特点使之可能成为新的具有潜在药用作用的一类非核苷的HIV-RT抑制剂，构效关系研究表明C-10和C-11的两个甲基处于trans及12β-OH是活性的重要基础。 3.2.7 i-NOS抑制活性
对诱导型NO合成酶(i-NOS)的抑制是近年发现某些香豆素的新活性，现已知东茛菪内酯能剂量依赖地抑制i –NOS mRNA和i -NOS蛋白质的表达。从苦枥白蜡树(Fraxinus rhynchophylla)根中也找到东茛菪内酯作为抑制NO合成的活性成分。对Angelica属植物中的17种呋喃香豆素抑制NO合成的药理筛选，发现角型具活性的一般多于线型，6-OMe的存在似乎是增强活性所必需。 3.2.8 雌激素样活性
从高等植物中寻找非甾体的植物雌激素近年已取得不少进展。最近报道从黄连木中分得的4-芳基二氢香豆素3-3”二聚体是第一个双香豆素被证明具有雌激
素样活性。体外试验表明该双香豆素对雌激素受体的结合能竞争性对抗雌[3H]雌二醇，并证明具有雌激素激动剂的活性，可见双-4-芳基香豆素有可能成为一种新类型的植物雌激素。
4. 香豆素研究举例
4.1云南羌活中新的补骨脂内醋单糖苷
云南羌活为伞形科植物心叶棱子芹的干燥根，主产于云南丽江、鹤庆等地并在该省部分地区以商品羌活人药。从中分离得到4个苷类成分，其中新化合物IV的分离和鉴定如下:
(1)提取分离
生药10kg粗粉，以95% EtOH室温渗漉，提取物经石油醚脱脂和EtOAc萃取后，再用水饱和的正丁醇萃取，得提取物260g，经反复硅胶及十八碳硅胶柱色谱，依次分离。从中得到化合物IV。 (2)结构鉴定
IV为浅黄色粉末状结晶，熔点290℃ ( dec. )，紫外光下显黄色斑点，IR KBr ( cm - 1 ) ：3405 (羟基),1700(C=0},1634、1598(芳环)、1148、1130、 1095、 1061、1045（苷类C-O） 。EI-MS m/z (苷元)，HRFABMS m/z：[M+H]+381.0839（C17H17O10，计算值381 .0822 )。1H-NMR(DMSO-d6)δ：8.50（1H,d,J=9.8Hz,H-5）、6.35(1H,d,J=9.8Hz,H-6)、8.01（1H,d,J=2.3Hz,H-2）、7.32（1H,d,J=2.3Hz,H-3）、显示4,9位二取代线型呋喃香豆素特征，在δ10.29(1H, s)有一酚羟基峰，在δ4.70(1H,d,J=7 . 8 Hz, g1-H)有β-D-糖苷1位异头质子信号，同时在氢谱中出现一系列糖碳上的质子和羟基峰。在13C-NMR（DMSO-d6）中的δ105.0(d, gl-C),77.1(d, g5-C) 、73.7(d, g2-C) 、69、6(d, g4-C) 、60.8(t, g6-C)进一步表明为β-吡喃葡萄糖苷，从而推定该化合物为补骨脂内酯的4, 9-二羟基化合物的单糖苷。由于其NOESY及ROESY谱显示糖苷的1位质子(δ 4.70)与呋喃环的β位H-3质子(δ 7.32)间存在NOE ,在HMBC谱中，此g1-H与C-4相关，故推定葡萄糖是与4位羟基成苷，确定其结构为9-hydroxy-4-O-β-D-glu-copyranosylpsoralen。所有NMR信号由1H-1H COSY ，1H-13C COSY及HMBC指定，HMBC数据列于表4-1所示。
表4-1 化合物IV的HMBC数据 H(δ) 6（6.35） 5（8.50） 3（7.32） 化合物IV
相关C（δ） 7（159.8），4a（108.8） 7（159.8），4a（108.8），4（138.5） 4（138.5），3a（117.3），9a（146.2） 4（138.5） 9a（146.2），9（126.6），8a（139.1） g1（4.07） OH（10.29） 4.2 瑞香狼毒的新双香豆素
瑞香科(Thymelaeaceae)植物瑞香狼毒(Stllera chamaejasme L.)其根用做中药，临床多用以治疗疥癣、顽固性皮肤溃疡，恶性肿瘤，慢性支气管炎和结核病等。从其根的乙醇浸膏的石油醚和乙醚部位中分离得到13个化合物，包括多种香豆素，其中一个新的双香豆素(1)，定名为Bicoumastechamin的分离和结构鉴定如下：
(1)提取分离
植物的干燥根(20kg)粉碎后，用95%EtOH提取，部分提取液经浓缩后，相继用石油醚和乙醚进行分配萃取，得石油醚提取物（830g)和乙醚提取物(1750g)。乙醚提取物经硅胶柱反复色谱，用己烷和丙酮混合物进行极性递增梯度洗脱，收集己烷-丙酮(1：2)流分，蒸去溶剂后的水不溶部位进一步以RP-8柱色谱分离，40%EtOH洗脱，得1(9 mg)。
(2)结构鉴定
1为黄色正方形结晶，熔点264~255℃，分子式为C19-H12-O6 (HRMS,m/z:[M]+336.0612),13C-NMR(DMSO-d6)显示19个碳信号。有两对典型的H-3和H-4信号，一对为δ 6.24(1H, d, J=9.7Hz，H-4')和7.93(1H, d, J=9.7Hz，H-4')表明分子由两个C-3和C-4未被取代的香豆素部分组成，符合从分子式算得的不饱和数14。此外，两个相关的质子：δ 7.75（1H, d, J=8.7Hz，H-5）和7.18（1H, d, J=8.8Hz，H-6），两个单峰信号：δ 6.89（1H, s，H-8’）和7.46（1H, s，H-6’），连同两部分香豆素的联结位置均可由NOESY实验决定。
在NOESY谱中，可见H-4' (δ7.93)和H-5'（δ7.46）、H-8'（δ6.89）和OH（δ10.62）、H-4（δ8.04）和H-5（δ7.75）以及H-6（δ7.18）和7-OMe（δ3.79）这几对信号之间的NOE效应。据此，表明两个香豆素部分是经C-8与C-6’相连。1的结构可由EI-MS裂解碎片进一步加以确证。