西南科技大学本科生毕业论文 Ⅲ
3.2 粉碎处理的紫穗槐果实的乙醇萃取结果
方案二得到如图3-3、3-4的液相质谱图：
图3-3粉碎紫穗槐提取物的乙醇溶液液相谱图(48h)
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图3-4粉碎紫穗槐提取物的乙醇溶液质谱图（48h）
图3-3紫穗槐提取物的乙醇溶液（48h）为以甲醇为流动相，ESI源的液相色谱图，由于使用甲醇为流动相，甲醇极性很大，在很短时间内把紫穗槐提取物的乙醇溶液中大部分的有机成分都洗脱出来，由此可得一个总量的大峰，第一幅图为洗脱出的总的成分的量为红色曲线；在相同反应量以及相同反应条件的情况下，由图3-3的液相色谱图可以看出最高峰值要比未粉碎的种子提取物高10 G Counts，可以说明种子经过粉碎之后提取效果明显好于未粉碎的。
从图3-4紫穗槐提取物的乙醇溶液质谱图（48h）可以看出，由原来未进样前的质荷比(m/z)为：301.0，313.0，310.9，319.0，324.0，339.0，350.1，369.0（其中339.0为上一个样中残留的待测物的峰值）逐渐变为339.0、350.1直到最后完全为质荷比(m/z)为339.0，340.0的峰，图2-5可以看出以质荷比(m/z)为339.0与其他峰相比相对丰度比值接近10：1，有力的证明了在我们本土生长的紫穗槐种子中，含有一定量的Amorfrutin。
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3.3 粉碎处理的紫穗槐果实甲醇萃取结果
由方案三得到3-5和3-6的质谱图： 方案三得到3-5和3-6两个质谱图。 图3-5 粉碎紫穗槐提取物的甲醇溶液液相谱图(48h)
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图3-6粉碎紫穗槐提取物的甲醇溶液质谱图（48h）
图3-5粉碎后的紫穗槐种子提取物的甲醇溶液（48h）是以甲醇为流动相，ESI源的液相色谱图，由于使用甲醇为流动相，甲醇极性很大，在很短时间内把紫穗槐提取物的甲溶液中大部分的有机成分都洗脱出来，由此可得一个总量的大峰，第一幅图为洗脱出的总的成分的量为红色曲线；第二幅图为在相同的时间进度下，Amorfrutin的量的曲线图，通过对比可以看出在总的甲醇中所含成的Amorfrutin所占的比重约60~70%，由此可知在甲醇的萃取液中含有大多数的Amorfrutin，证明萃取步骤正确活性物质在甲醇相。
从图3-6粉碎后的紫穗槐种子提取物的乙醇溶液质谱图（48h）可以看出，由原来未进样前的质荷比(m/z)：301.0、311.0、313.0、339.0、350.1、369.0（其中339.0为上一个样中残留的待测物的峰值）变为图上的324.1、338.2、339.0、340.0、363.1，在所测样进入色谱仪中之后，大约半分钟内质荷比为339.0以及质荷比340的峰逐渐增高，之后的一段时间内质荷比(m/z)为339的相对丰度与其他峰的比值接近20:1。其中339.0为Amorfrutin裂解掉一个H自由基所得质荷比，质荷比(m/z)为340为Amorfrutin未裂解的质荷比，两者的相对丰度与其他峰比较相差巨大，有力的证明了在萃取后的甲醇溶液中，含有一定量的Amorfrutin，由此证明萃取方法的正确性，而具体的 Amorfrutin A、Amorfrutin B的分类则有待进一步实验的分析。
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而对于甲醇萃取液的进一步处理，在本文中没有提及。下一阶段的具体实验将对甲醇萃取液进行进一步处理。将甲醇提取液旋转蒸发蒸出一定量的甲醇，控制剩余溶液的量，以便过硅胶柱。通过过柱分出含有Amorfrutin范围的几个点，在进一步过柱洗脱出Amorfrutin，但目前存在一个问题我们没有Amorfrutin纯产品，所以无法对紫穗槐种子中Amorfrutin的含量进行定量分析，过柱分离也存在一定难度（因无法对其极性进行判断，导致薄层色谱分析无法确定产物），现在一方面寻求得到Amorfrutin纯品，另一方面对其洗脱出的各种物质进行鉴定，来判断何种产物为Amorfrutin。
3.4 总结
通过以上三步不同条件下的实验以及实验结果分析，可以初步确定紫穗槐种子里含有Amorfrutin并且其含量远大于前期预测值。通过第一步和第二步进行比较可以发现，经过粉碎后的紫穗槐种子提取出来的目标产物要多于未粉碎过的紫穗槐种子。由于粉碎后的紫穗槐种子粉末在烧瓶里颗粒较小，粘性比较大，导致不易搅拌，而且影响到实验装置的气密性，导致乙醇的大量挥发。为解决此问题，在第三步实验里面通过采用不搅拌进行对比实验，提取紫穗槐种子里的Amorfrutin。由图3-5和图3-6里面产物的相对丰度可以看出，不搅拌和搅拌的反应结果提取物产量相差不大，且Amorfrutin大多数存在于甲醇相中，对紫穗槐种子中Amorfrutin的进一步提取提供了有效的数据。
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