病原微生物评估报告(9)

2019-08-31 14:25

冰箱中进行冷增菌。结果:产单核李斯特菌在血琼脂平板上能产生狭窄的β-溶血环,菌落呈灰白色,直径1~2mm;在肉汤中呈均匀混浊生长表面形成薄膜;在半固体培养基内,可形成倒伞形生长。

5、生化鉴定 本菌可发酵多种糖类如葡萄糖、果糖、覃糖、麦芽糖核水杨素,产酸不产气。甲基红和V-P实验阳性,触酶阳性,可使石蕊牛乳缓慢产酸并使其脱色,能水解精氨酸产氨。不还原硝酸盐、不形成吲哚、不液化明胶和凝固血清,不分解尿素。能水解七叶苷,有时还可形成硫化氢。 6、血清学实验 用已知的李斯特菌1型、4型和多价抗血清玻片凝集试验对可疑菌进行鉴定。

7、动物结膜点种试验 取幼兔或豚鼠一只,用本菌24h肉汤培养物1滴,滴入实验

8、动物一侧的结膜囊内,以另一侧为对照,观察5天。一般产单核李斯特菌会在接种后的24~36h内,出现化脓性结膜炎。

四、细菌的生物安全防护

根据《病原微生物生物实验室生物安全管理条例》中的有关规定,人间传播的微生物名录(待颁布)产单核李斯特菌属于三类,BSL-2。相关的防护事宜包括:

(1)操作要求

1、实验时,未经实验室主任同意,限制或禁止进入实验室。

2、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。

3、对于污染的锐器,必须时刻保持高度的警惕,包括针、注射器、玻片、加样器等。

4、注射和吸取感染材料时,只能使用针头固定注射器或一次性注射器(即注射器和针头是一体的)。用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射器上去掉,或在丢弃前进行人工处理,要不将之小心放入不会被刺穿的、用于收集废弃锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中,转移至处理区消毒,最好高压杀菌。

5、打碎的器皿不能直接用手处理,必须用其它工具处理,如刷子和簸箕、夹子或镊子。盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在倒掉前,应按照相关的规定进行消毒。

6、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前,均应使用可行的消毒方法进行消毒,如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内,密封运出实验室。离开该系统进行消毒的物料,在转移前应包装,其包装应符合有关的法规。

7、按日常程序、在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其他

传染源污染后,实验室设备和工作台面应当使用有效的消毒剂消毒。污染的设备在送去修理、维护前,要按照相关的规定消毒;在离开设施转移前,要按照相关的规定打包运输。

(2)安全设备

1、正确使用和保养生物安全柜、最好是二级生物安全柜、或其他合适的人员防护设施、或物理遏制装置。

2、涉及高浓度或大体积的传染源时,若选用密封转头或带安全罩的离心机,若转头或安全罩仅在生物安全柜中打开,则可在开放实验室内离心。

3、当必须在生物安全柜外处理标本时,需采取面部保护措施(跟镜、口罩、面罩、或其他防溅装置),以免传染源或其他有害物溅或洒到面上。

4、在实验室内,必须使用专用的防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非实验室区域时,防护服必须留在实验室内。防护服可以在实验室内处理,也可以在洗衣房中洗涤,但不能带回家中。

5、可能接触潜在传染源、被污染的表面或设备时,要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重复使用,不能用于接触“洁净”的表面(键盘、电话等),也不应当戴着到实验室外。要备有带滑石粉的乳胶手套。脱掉手套后,要洗手。

不动杆菌的危害评估报告

一、细菌的传播与致病

不动杆菌为机会致病菌,广泛分布于外界环境中,但主要是在水和土壤中,营养要求不高,适宜在潮湿环境中生长,如自来水、各种导管、液体去污剂、牛奶及冷冻食物中均有检出的可能。健康人群的皮肤、咽喉、结膜、尿、粪、阴道分泌物中亦能分离到不动杆菌,25%的正常人皮肤带菌,7%的健康人咽部带菌。

不动杆菌是院内感染常见菌之一,感染易发生于外科手术后,有严重原发病及免疫功能低下者,老年和早产儿、新生儿,气管切开插管、静脉导管、空气湿化、广谱抗生素的应用及监护室环境中等。从各种临床标本中都有分离到该菌的报道,而且近年来其分离率还有增加的趋势,已成为院内感染的重要致病菌之一。

不动杆菌导致的临床表现包括:(1)呼吸道感染 经受外科手术,应用广谱抗菌药物,有严重原发病,需要用人工呼吸器及气管切开插管者最易感染本菌。肺部X线检查可表现为多叶性气管支气管肺炎,偶有脓肿形成及渗出性胸膜炎,菌血症少见,如不及时治疗,则病死率较高;(2)败血症 在革兰阴性败血症中,不动杆菌大多经由呼吸道、尿路、伤口和皮肤入侵。病情轻重不一,轻者为一过性菌血症,伴有休克的重症患者或有多种菌混合感染者病死率可达22%。并发症有心内膜炎、腹腔脓肿及血栓性静脉炎等; (3)伤口与皮肤感染 创伤的伤口、烧伤创面、手术切口均易继发本菌的皮肤感染,并常与其他细菌如肠杆菌、绿脓杆菌、肠球菌、葡萄球菌或化脓链球菌造成混合感染。静脉导管污染本菌可引起严重的皮肤蜂窝织炎。严重的创口感染常合并败血症; (4)其他 本菌属还可引起膀胱炎、尿道炎、肾盂肾炎在眼科可引起结膜炎、角膜溃疡及穿孔、白内障手术后眼内炎。在新生儿可引起不动杆菌脑膜炎,常与肺炎球菌一起致病。颅脑外伤或神经外科手术后亦偶见该菌引起的脑膜炎。此外,不动杆菌尚可引起心内膜炎、骨髓炎、口腔脓肿、化脓性关节炎以及胰腺、肝脓肿。

二、细菌的生物学特性

多年来,不动杆菌属的分类与命名历经变迁,现命名为不动杆菌属(Acinetobacter),仅有一个菌种,即醋酸钙不动杆菌(A.calcoaceticus),分两个变种:硝酸盐阴性杆菌(A.anitratus)和洛菲不动杆菌(A.lwoffi),它们致病性较强,并对多种抗菌药物耐药。

本菌为革兰阴性球状或球杆菌,约1.0~1.6μm×1.5~2.5μm,静止期呈多形性,成对排列或呈短链,极易与脑膜炎球菌混淆。涂片时因革兰染色不易脱色而呈假阳性。无芽胞及鞭毛,无动力,有荚膜。严格好氧,在20~30℃生长,大部分菌株最适生长温度33~45℃。在所有普通综合培养基上均能生长。

氧化酶阴性,触酶阳性。多种菌株能在含有单一碳源的铵盐无机盐培养基上生长良好,利用酒石酸盐或硝酸盐为氮源,不需要生长因子。D-葡萄糖是一些菌株可以利用的惟一

六碳糖。五碳糖如D-核糖、D-木糖、L-阿拉伯糖亦可成为某些菌株的碳源专性需氧,硝酸盐反应及氧化酶试验阴性,可以此与肠杆菌科及奈瑟菌属鉴别。硝酸盐阴性杆菌与洛菲不动杆菌的区别在于前者可发酵乳糖。

本菌的抗原结构比较复杂,有菌体抗原和荚膜抗原,应用血清学技术可以将醋酸钙不动杆菌分为30个血清型,将洛菲不动杆菌分为10个血清型等。

三、细菌的实验室检查

1、标本采集 来自与临床的各种标本如血液、尿液、脓汁、下呼吸道分泌物以及脑脊液等。

2、涂片镜检 除血液标本外其他采集标本均应做革兰染色以及动力检查。

3、分离培养 采用普通、血平板、MAC培养基等。该菌在普通培养基上迅速生长;在血琼脂平板上经18~24小时培养可见圆形、灰白色、光滑、边缘整齐的菌落,直径2~3mm,洛菲不动杆菌的菌落略显微小。一般不产生色素。在MAC平板上形成的菌落为无色或粉红色。

4、生化鉴定 动力阴性、氧化酶阴性、硝酸盐还原阴性、吲哚阴性,不发酵糖类等。

四、细菌的防治

由于不动杆菌的耐药菌株逐年增多且出现多重耐药,因而实验室获得阳性培养结果后,应即进行药敏测定,选用有效药物。对不动杆菌有效的抗菌药物有哌拉西林、β-内酰胺类与酶抑制剂的复合制剂,头孢他啶的作用优于其他同类药物、亚胺培南、SMZ-TMP、多粘菌素B、氧氟沙星、环丙沙星等。大多数不动杆菌菌株对妥布霉素或阿米卡星敏感。

治疗成功与否,其关键是及早选用有效抗菌药物并及时纠正引起本病的诱因,如尽早减量或停用皮质激素、拔除静脉导管等。目前常采用β-内酰胺类抗生素或氟喹酮类药物联合氨基糖甙类治疗严重感染患者。

五、细菌的生物安全防护

根据《病原微生物生物实验室生物安全管理条例》中的有关规定,人间传播的微生物名录(待颁布)不动杆菌属属于三类,BSL-2。相关的防护事宜包括:

(1)操作要求

1、实验时,未经实验室主任同意,限制或禁止进入实验室。

2、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用橱柜或冰箱中。

3、所有的操作过程应尽量细心,避免溅出。

4、对于污染的锐器,必须时刻保持高度的警惕,包括针、注射器、玻片、加样器等。

5、打碎的器皿不能直接用手处理,必须用其它工具处理,如刷子和簸箕、夹子或镊

子。盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在倒掉前,应按照相关的规定进行消毒。

6、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前,均应使用可行的消毒方法进行消毒,如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内,密封运出实验室。离开该系统进行消毒的物料,在转移前应包装。

8、按日常程序、在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其他传染源污染后,实验室设备和工作台面应当使用有效的消毒剂消毒。污染的设备在送去修理、维护前,要按照相关的规定消毒;在离开设施转移前,要按照相关的规定打包运输。

(2)安全设备

1、正确使用和保养生物安全柜、最好是二级生物安全柜、或其他合适的人员防护设施、或物理遏制装置。

2、当必须在生物安全柜外处理标本时,需采取面部保护措施(跟镜、口罩、面罩、或其他防溅装置),以免传染源或其他有害物溅或洒到面上。

3、在实验室内,必须使用专用的防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非实验室区域时,防护服必须留在实验室内。

5、可能接触潜在传染源、被污染的表面或设备时,要戴手套。一次性手套不用清洗、不能重复使用,不能用于接触“洁净”的表面(键盘、电话等),也不应当戴着到实验室外。要备有带滑石粉的乳胶手套。脱掉手套后,要洗手。


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