2.植物病害对农业生产的危害表现在哪些方面?
实训1-2 植物病害标本采集制作与保存
一、目的要求
了解植物病害标本采集的基本要求，能正确选取、采集、记载、整理具有典型症状的病害材料, 制作并保存干燥、浸渍植物病害标本，熟悉当地常见病害种类的症状特点和发生危害情况。
二、材料、器具及药品
采集标本器具：采集箱、塑料包（袋）、标本夹、吸水纸、捆夹绳、枝剪、手锯、小刀、手铲、镊子、放大镜、塑料袋、小纸袋、标本签、铅笔、采集记录本和数码相机等。
制作标本用具及药品：剪刀、标签、标本瓶、玻璃瓶、玻璃板、塑料绳、水浴锅(或简单的加热装置)、水、大烧杯、量杯或量筒、醋酸铜、硫酸酮、明胶和石蜡等。 三、内容与方法 （一）标本采集 1.采集要求
（1）病状典型 每种标本上的病害种类要单一；不仅要采集某一发病部位的典型病状，还应采集不同时期、不同部位和各种变异的病状。
（2）病征完整 尽量采集带有病征的标本，一些病害可在植物生长的不同时期或枯枝落叶上分别采集，以便对病害做进一步鉴定。
（3）标本完整 标本完整可以保证鉴定的准确性和标本制作的质量。采集时应注意标本完整，避免损坏；对不认识的植物，应注意采集枝、叶、花、果等部分；每种标本采集的数量不能太少，一般叶斑病类标本应在10份以上；用数码相机真实记载和准确反映病害的症状特点和现场环境。
2.采集记载
每份标本都要附有完整的采集记录，其主要内容是：寄主名称、品种及生育
期，病害名称、受害部位、症状与危害,采集地点、栽培环境、采集日期、采集人姓名和标本编号等项目（记载项目可参考表1.1.3）。标本应挂有标签，标签上的编号与同一份标本在记录本上的编号必须相符。填写采集记录本和标签必须用铅笔，以避免日久或遇水时褪色。
表1.1.3 植物病害标本采集记录表
寄主名称： 品种： 生育期：
病害名称： 受害部位：根□ 茎□ 叶□ 花□ 果实□ 其他□ 发生情况：普遍□ 不普遍□ 轻□ 中□ 重□ 症状与危害：
生态环境：坡地□ 平地□ 砂土□ 壤土□ 粘土□ 备注：
采集地点： 采集日期： 年 月 日 采集人： 标本编号：
3.携带整理
（1）临时保存 田间采集茎或叶片类标本先将每一种标本装入一个小采集袋内，再分别放入大采集袋内；不易损坏的标本如木质化的枝条、枝干等，可以暂时放在标本箱中。
（2）防止混杂 病症是霉状物和粉状物等容易混淆污染的标本要分别用纸夹（包）好，以免相互混杂影响对病原的鉴定和病害的诊断。
（3）避免变形 叶片较薄，容易迅速失水、干燥卷缩的标本，应随采随压，或用湿布包好，以免叶片干缩卷曲；腐烂类或多汁的病果，可先用标本纸分别包好，然后放在采集箱中，避免因相互挤压变形或玷污。
（4）及时整理 田间采集的标本需每天及时进行整理、取舍，选择叶片或果实完整、带有典型症状和病征的标本，尽量使标本形状舒展自然。整理比较柔嫩的植物标本时应多加注意，以免破损。对于采集到的症状不典型或暂时观察不到症状稀有标本，不要舍弃，以备日后采取措施进行鉴定。 （二）干制标本制作与保存
干制法适用于一般植物的茎、叶、花及去掉果肉的果皮，制成的标本通常称为蜡叶标本，可以长期保存。
1.压制
适于压制的标本应随采随压或需经过整理后立即压制，以保持标本原形；对含水量大、叶片较厚、不易失水的甘蓝、白菜、马铃薯等叶片标本，应经过1～2d自然散失一些水分，叶片将要卷曲但还未卷曲时再进行压制；茎或枝条过粗或叶
片过多的标本，应先将枝条劈去一半或去掉部分叶片再压制，以免标本因受压不匀或叶片重叠过多而变形；有些需全株采集的标本过长，可将其折成“N”或“V”字形后压制。
将需要压制的标本分层放在标本夹中，一层标本，一层吸水纸,一般每层3～4张，多汁或较厚的标本可多加几张，以利吸收标本中的水分。每个标本夹的总厚度以10cm左右为宜，夹好用绳扎紧。压制标本时应附有用铅笔记录的记载寄主和编号的临时标签。
2.干燥
干制标本干燥愈快，标本保持原色的效果愈好。为使其尽快干燥，避免发霉变质，标本夹应放在阳光充足，通风干燥处自然干燥，同时要勤换标本纸，一般是前3～4d每天至少换干燥的标本纸1次，以后视干燥情况每2～3d换1次，直到标本彻底干燥为止。在换纸时，要特别注意不要混用已经污染了的纸张，同时要注意保留临时标签。在第一次换纸时，趁标本变软，应加以整理，使其保持一定的“姿势”-“状态”？。 对于完全干燥的标本，要小心移动，以防破碎。
除了自然干燥外，必要时也可进行人工加温快速干燥，将标本放在烘箱或土炕上，温度可提高到35～50℃，但换纸要更勤，至少2h换一次纸，对某些容易变黑的叶片标本(如梨叶)可平放在有阳光照射的热沙中，使其迅速干燥，以达到保持原色的目的。此外，多汁或大型不好压制的标本，还可装挂在通风良好处风干或晒干。
3.保存
（1）纸套保存 用胶版印刷纸(或牛皮纸、报纸) 叠成15×33cm的纸套，将标本装入纸套内，并在纸套上贴好标签（图1.1.1）。
图1.1.1 植物病害标本纸袋折叠方法
（2）玻面标本盒保存 教学及示范用病害标本，用玻面标本盒保存比较方便。玻面标本盒的规格不一，一般适宜大小为28cm×20cm×3cm。标本和标签粘标本盒底部，在标本盒侧面注明病害的种类和编号，以便于存放和查找。通常一个标本室内的标本盒应统一规格，整齐美观且便于整理。
干制标本装入标本纸套和玻面标本盒后，可按寄主种类或病原类别分类在标本室和标本柜中长期保存。标本室和标本柜应保持干燥以防生霉，同时可将樟脑放于标本袋和盒中并定期更换,以防虫蛀。
（二）浸渍法与浸渍标本保存 1. 浸渍法
浸渍法适用于保存多汁的病害标本，如果实、块根或担子菌的子实体等，易保持原来的形态和色泽，但保存的时间有限，且需占用比较大的空间，一般用于制作教学和示范标本。浸渍液种类很多，有防腐的，有防腐兼保持标本原色的。
（1）防腐浸渍法 此法仅能防腐而无保色作用，将不要求保色的标本，洗净后直接浸于以下溶液中。
普通防腐浸渍液：福尔马林50ml，95%酒精300 ml，加水至2000 ml。 （2）保持绿色标本的浸渍液及浸泡法
①醋酸铜保（绿）色浸渍法 将结晶醋酸铜逐渐加到50%的醋酸溶液中至饱和为止（每1000ml约加15g），将原液加水稀释3～4倍后使用。溶液稀释浓度因标本的颜色深浅而不同，浅色的标本用较稀的稀释液，深色标本用较浓的稀释液。将稀释后的溶液加热至沸腾，投入标本，标本的绿色最初会褪去，经3～4min，至绿色恢复后，将标本取出，用清水漂净，保存于5%的福尔马林中，或压制成干燥标本亦可。
醋酸铜浸渍液反复用多次后保色能力会逐渐减弱，重复使用时需补加适量的醋酸铜。另外，用此法保存标本的颜色稍带蓝色，与植物的绿色略有不同。
②硫酸铜保（绿）色浸渍法 将洗净标本在5%的硫酸铜浸渍液中浸6～24h，取出后用清水漂洗3～4h，然后保存于亚硫酸液中。亚硫酸液的配法有两种：一种是用含5～6%的SO2的亚硫酸溶液45ml加水1000ml，另一种是将浓硫酸20ml，稀释于1000ml水中，然后加16g亚硫酸钠。配成的溶液在密封条件下可以贮藏。
本法保持叶片及绿色果实等颜色比醋酸铜法自然，是常用的浸渍标本保存方法。应用本法保存标本应密封瓶口，每年更换一次亚硫酸浸渍液。
（3）保存黄色和橘红色标本的浸渍液 将亚硫酸(含SO25%～6%)配成4%～10%的水溶液，可保存含有叶黄素和胡萝卜素的果实如杏、梨、柿、黄苹果、柑橘
和红辣椒等标本。亚硫酸有漂白作用，浓度过高会使果皮褪色，但浓度过低能力不足，因此对各种标本的适宜浓度要通过反复试验确定。使用较低浓度时，可加少量酒精增加防腐能力。在浸渍液中加少许甘油，可以防止标本开裂。
（4）保存红色标本的浸渍液 保存标本红色较难，因为红色是水溶性的花青素，很难保存。常用Hesler浸渍液保存，成分是：氯化锌50g，福尔马林25ml，甘油25ml，水1000ml。将氯化锌溶于热水中，加入福尔马林，如有沉淀，用其澄清液。此溶液适用于由于花青素而显红色的标本，如苹果、番茄等。
2.浸渍标本保存
制成的浸渍标本应存放于标本瓶中或试管中，为了防止标本下沉和上浮，可绑在玻璃条上然后再放入标本瓶，贴好标签保存。因为浸渍液所用药品多数具有挥发性或易氧化，浸渍标本最好置于暗处，以减缓药液的氧化。瓶口一般需要密封，方法如下：
（1）临时封口法 用蜂蜡和松香各1份，分别熔化后混合，加少量凡士林油调成胶状，涂于瓶盖边缘，将瓶盖压紧封口；或用明胶4份在水中浸3～4h，滤去多余水分后加热熔化，加石蜡1份，继续熔化后即成为胶状物，趁热封闭瓶口。
（2）永久封口法 胶和熟石灰各1份混合，加水调成糊状物后封口。干燥后因酪酸钙硬化而密封；也可将明胶28g在水中浸3～4h，滤去水分后加热熔化，再加重铬酸钾0.324g和适量的熟石膏调成糊状即可封口。
四、作业
1.采集制作10种以上病害标本并作采集记录。 2.制作合格干制标本三份，液浸标本一份。
3.列举植物病害标本采集过程中认识的植物病害种类、症状特点及其危害性。 五、思考题
1.为什么要尽量采集症状典型和带有病征的植物病害标本?
2.哪些标本适合制成干燥标本?哪些标本适合制成浸渍标本?为什么？ 3.植物病害标本是否必须压制或浸渍保存？
第二节 植物生物性病原及其所致病害识别