凡可用于纸色谱的显色剂都可用于薄层色谱。薄层色谱还可使用腐蚀性的显色剂如浓硫酸、浓盐酸和浓磷酸等。对于含有荧光剂（硫化锌镉、硅酸锌、荧光黄）的薄层板在紫外光下观察，展开后的有机化合物在亮的荧光背景上呈有色斑点。也可用卤素斑点试验法来使薄层色谱斑点显色。本实训样品本身具有颜色，不必在荧光灯下观察。
柱色谱
1、装柱（湿法）
用镊子取少许脱脂棉放于干净的色谱柱底部，轻轻塞紧，关闭活塞，向柱中倒入溶剂至约为柱高的3/4处，通过一干燥的玻璃漏斗慢慢加入色谱柱用中性氧化铝，打开活塞，控制流出速度为1滴/秒；并用橡皮塞轻轻敲打色谱柱下部，使填装紧密，当装柱至3/4时，再在上面加一片小圆滤纸或脱脂棉。操作时一直保持上述流速注意不能使液面低于氧化铝的上层。 2、上样
当溶剂液面刚好流至滤纸面时，立即沿柱壁加入待分离样品溶液，当此溶液流至接近滤纸面时，立即用少量溶剂洗下管壁的有色物质，如此连续2—3次，直至洗净为止。 3、洗脱
用已配好的溶剂（学生自己配制）洗脱，控制流出速度。整个过程都应有洗脱剂覆盖吸附剂。极性小的色带首先向下移动，极性较大的留在柱的上端，形成不同的色带。观察色带的出现，并用锥形瓶收集洗脱液。 五、实训关键及注意事项：
1、薄层层析时，薄层板的制备要厚薄均匀，表面平整光洁。 2、点样时，各样点间距1—1.5cm，样点直径应不超过2mm。 3、柱层析时，柱子要致密紧实，无气泡。 六、主要试剂及产品的物理常数：（文献值） 沸名 称 偶氮苯 间硝基苯胺 荧光黄 分子量 182.2 138.13 332.3 性状 折光率 比重 1.2000 熔点℃ 点℃ 68 112-115 320 293 水 0.11 醇 4.220 7.120 醚 12 20 7.920 溶解度：克/100ml溶剂 七、思考题
1．在色谱法中，比移值是如何定义的？
2．在一定的操作条件下为什么可利用Rf值来鉴定化合物？ 3．在混合物薄层色谱中，如何判定各组分在薄层上的位置？ 4．展开剂的高度若超过了点样线，对薄层色谱有何影响？ 5．色谱法在有机化学中的应用主要包括哪些？
第三篇、综合性实训
3.1 环己烯的制备
一、实训目的
１、熟悉环己烯反应原理，掌握环己烯的制备方法。 ２、学习分液漏斗的使用，复习分馏操作。 二、实训原理
三、试剂
环己烯 浓硫酸 食盐 无水氯化钙 5% 碳酸钠
四、实训装置
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分馏装置 蒸馏装置
五、实训步骤
在50毫升干燥的圆底烧瓶中，放入15g环己烯(15.6ml，0.15mol)、1ml浓硫酸和几粒沸石，充分振摇使混合均匀。烧瓶上装一短的分馏柱作分馏装置，接上冷凝管，用锥形瓶作接受器，外用冰水冷却。
将烧瓶在石棉网上用小火慢慢加热，控制加热速度使分馏柱上端的温度不要超过90℃，馏液为带水的混合物。当烧瓶中只剩下很少量的残渣并出现阵阵白雾时，即可停止蒸馏。全部蒸馏时间约需lh。
将蒸馏液用精盐饱和，然后加入3—4ml 5%碳酸钠溶液中和微量的酸。将此
液体倒入小分液漏斗中，振摇后静置分层。将下层水溶液自漏斗下端活塞放出、上层的粗产物自漏斗的上口倒入干燥的小锥形瓶中，加入１－２克无水氯化钙干燥。
将干燥后的产物滤入干燥的蒸馏瓶中，加入沸石后用水浴加热蒸馏。收集80—８５℃的馏分于一已称重的干燥小锥形瓶中。产率７－８g。
六、注意事项
１、环己醇在常温下是粘碉状液体，因而若用量筒量取时应注意转移中的损失，环己烯与硫酸应充分混合，否则在加热过程中可能会局部碳化。
２、最好用简易空气浴，使蒸馏时受热均匀。由于反应中环己烯与水形成共沸物(沸点70.8℃，含水l0％)；环己醇与环己烯形成共沸物(沸点64.9℃,含环己醇30.5％)；环己醇与水形成共沸物(沸点97.8℃,含水80％)。因比在加热时温度不可过高，蒸馏速度不宜太快。以减少未作用的环己醇蒸出。
３、水层应尽可能分离完全，否则将增加无水氯化钙的用量，使产物更多地被干燥剂吸附而招致损失，这里用无水氯化钙干燥较适合，因它还可除去少量环己醇。
4、在蒸馏已干燥的产物时，蒸馏所用仪器都应充分干燥。 七、思考题
1、为什么要把环已醇和85%磷酸充分混合？ 2、如果用浓硫酸代替85%磷酸,有什么缺点？ 3、为什么要控制分馏柱顶部温度不得超过73℃？ 4、在蒸馏终止前，出现的阵阵白雾是什么？
5、在粗制的环己烯中，加入精盐使水层饱和的目的何在？ 6、下列醇用浓硫酸进行脱水反应的主要产物是什么?
①3－甲基－l－丁醇 ②3－甲基－２－丁醇 ②3，3－二甲基－2－丁醇
3.2 正丁醚的制备
一、实训目的
1、掌握醇分子间脱水制备醚的反应原理和实训方法。 2、学习使用分水器的实训操作。
二、实训原理 2C4H9OH
副反应 CH3CH2CH2CH2OH
三、药品和仪器
药品：正丁醇，浓硫酸，50%硫酸，无水氯化钙
仪器：100ml三口烧瓶，球形冷凝管，分水器，温度计，分液漏斗，25ml蒸馏瓶。
四、实训装置（如图）
C4H9-O-C4H9 + H2O C2H5CH=CH2 + H2O
五、实训操作
1、在干燥的100ml三口烧瓶中，加入15.5ml正丁醇、2.5ml浓硫酸,充分摇匀后，加入几粒沸石。
2、按上图所示，装上温度计和分水器，和橡皮塞。
注意：温度计插入液面以下，且水银球距三口烧瓶壁要留有1-2mm的距离，这样所测的温度才是反应液的温度；先在分水器内放置(V－1.7)ml水（先装满水，再打开活塞，用小量筒量取）分水器的上端接一支回流冷凝管；另一口用塞子塞紧。
3、然后将三口烧瓶放在石棉网上用电热套小火加热至微沸，进行分水。随着反应进行，分水器液面增高，这是由于反应生成水，以及未反应的正丁醇，以
冷凝管冷凝后聚集于分水器中，由于相对密度不同，水在下层，而上层较水轻的有机相积到分水器支管时即可返回反应瓶中。如果分水器中的水不断增加，可打开活塞，放出少量水于量筒中，以防分水器支管回流到烧瓶中。大约经1.5h后，三口瓶中反应液温度可达134—136℃。
4、当三口瓶中的温度达到138—140℃时，立即停止加热。若继续加热，则反应液变黑并有较多副产物烯生成。
注意：反应终点是以反应物温度达到140℃为标准，当观察到分水器中的水分增加很慢时，要特别注意及时停火，否则反应液极易碳化变黑且有副产物烯生成。
5、冷却到室温后，将反应液连同分水器里的水和少量有机物都倒入盛有25mI水的分液漏斗中，充分振摇，静置后弃去下层液体。
6、将上层粗产物用16ml 50%硫酸分两次洗涤，再用10ml水分两次洗涤后，将粗产物倒入干燥的锥形瓶中，用1g无水氯化钙干燥（约10min）。
注意：干燥时要间歇振荡，否则干燥时间要更长；若干燥时间太短，在140℃以前的馏分将会增多，使产率降低。
7、干燥后的产物滤入30ml蒸馏瓶中蒸馏，收集140—144οC馏分，称量产量（约为3.5-4g）。
纯正丁醚的沸点142.4οC， nD201.3992 本实训需6h。
六、实训注意事项
1、本实训根据理论计算失水体积为1.5ml，故分水器放满水后先放掉约1.7ml水。
2、制备正丁醚的较宜温度是130—140℃，但开始回流时，这个温度很难达到，因为正丁醚可与水形成共沸点物(沸点94.1℃含水33.4%)；另外，正丁醚与水及正丁醇形成三元共沸物(沸点90.6℃，含水29.9%，正丁醇34.6%)，正丁醇也可与水形成共沸物(沸点93℃，含水44.5%)，故应在100—115℃之间反应半小时之后可达到130℃以上。
3、反应终点是以反应物温度达到140℃为标准，当观察到分水器中的水分增加很慢时，要特别注意及时停火，否则反应液极易碳化变黑且有副产物烯生成。
七、思考题
1、分水器分出的水分为什么比理论计算量多？ 2、如何得知反应已经比较完全？
3、反应物冷却后为什么要倒入25ml水？各步的洗涤目的何在？
4、能否用本实训方法由乙醇和2-丁醇制备乙基仲丁基醚？你认为用什么方法比较好？