目录
一、土壤样品采集方法................................................................................................ 3 二、土壤样品处理和保存............................................................................................ 4 三、土壤物理性质项目的测定.................................................................................... 6
1.土壤水分的测定：铝盒烘干法 ........................................................................ 6 2.土壤温度的测定：热敏电阻法、地温计法 .................................................... 6 3.土壤容重的测定：环刀法 ................................................................................ 6 4.土壤田间持水量的测定：环刀法 .................................................................... 7 5.水稳定团粒的测定：湿筛法 ............................................................................ 7 四、土壤化学性质项目的测定.................................................................................... 8
1.土壤pH值的测定：电位计法 .......................................................................... 8 2.土壤有机质含量的测定：马弗炉灼烧法 ........................................................ 8 3．土壤氮含量的测定（硝态氮、氨态氮、全氮） ......................................... 8
3.1硝态氮的测定 ......................................................................................... 8 3.2氨态氮的测定 ......................................................................................... 9 3.3 全氮测定（采用凯氏定氮法） .......................................................... 10 4、土壤磷的测定（全磷、有效磷） ............................................................... 11
4.1 全磷：HClO4—H2SO4法 ....................................................................... 11 2.2土壤速效磷含量的测定：0.5mol·L-1NaHCO3浸提—钼锑抗比色法 . 14 5．土壤钾的测定（速效钾、全钾） ............................................................... 15
5.1.土壤速效钾含量的测定：醋酸铵浸提—火焰光度计法 ................... 15 5.2．全钾：NaOH熔融，火焰光度法（FP640型火焰光度计） ........... 16 6、土壤酶活性的测定 ....................................................................................... 18
1．蔗糖酶活性的测定 ............................................................................... 18 2．蛋白酶活性的测定 ............................................................................... 19 3．碱性磷酸酶活性的测定 ....................................................................... 20 4．脱氢酶活性的测定 ............................................................................... 21 5．FDA水解酶活性的测定 ........................................................................ 22
四、土壤微生物.......................................................................................................... 23
1．分离与纯化 ................................................................................................... 23 2．菌株的鉴定的生理生化实验 ....................................................................... 25
2.1糖类发酵与氧化实验 ........................................................................... 25 2.2过氧化酶测定 ....................................................................................... 26 2.3 细胞色素氧化酶测定 .......................................................................... 26 3．微生物鉴定 ................................................................................................... 27 4. 土壤微生物生物量的测定 ............................................................................ 29
一、土壤样品采集方法
土壤样品的采集方法对分析结果和评价至关重要。因此，采集的样品必须具有代表性。由于土壤自然条件、类型和污染状况不同，采样的方法也不同，常用的方法有：
1、对角线采样法。这种方法适宜于受到废水污染或污水灌溉的田块。由田块进水口向对角引一条斜线，将此线分成三等份或五等份，在每等份的中央点取样。
2、蛇形采样法。这种方法适宜于面积较大，地形不平坦，土壤不均匀的田块。采样品按蛇形多布置一些。
3、棋盘形采样法。对于面积适中、地势平坦，地形完整的田块，适合用这种采样法。如土壤不均匀，布置10个以上的采样点．土壤均匀，采样点可少些。
4、梅花形采样法。对于面积不大，地势平坦，土壤较均匀的田块，适合用这种方法。梅花形采样的布点以5—10个为宜。
方法名称 梅花形采样法 棋盘式采样法 蛇形采样法 注意事项：
中等面积、地势平坦、地形完整、但土壤较不均匀的田块 面积较大、地势不太平坦，土壤肥力不够均匀 20个以上 10个以上 适宜面积较小、土势平坦、土壤较均匀的田块 5～10个 适用田块 采样点数
1、采样深度，对一般土地采样深度15—30cm即可。对根深的作物可取至50cm的深度。
2、采样时间，可在作物的收获季节采集土壤样品．随时采样分析。 3、采样量，1—2kg土量。
4、每个采样点的取土深度及重量应均匀一致，土样上层和下层的比例也要相同。采样铲或筒形取样器应垂直于地面，入土至规定的深度；斜插或入土角度不同，有可能使各样点的取土深度不够一致。
二、土壤样品处理和保存
1、样品登记编号：根据试验情况标记土样。
2、鲜样保存：测定土壤水分、亚铁、铵态氮、硝态氮等项目时，需用新鲜土样。
为了能真实地反映土壤在田间自然状态下的某些理化性状，新鲜样品要及时送到化验室处理，先用粗玻璃棒或塑料棒将样品弄碎混匀，然后迅速称样进行分析测定。新鲜样品一般不宜贮存，如需暂时贮存时，可将新鲜样品装入塑料袋，扎紧袋口，放在冰箱冷藏室或进行速冻处理。
3、湿样晾干：在晾干室将湿样放置晾样盘（白瓷盘）中，摊成2厘米厚的薄层自然阴干，并间断地用木棰敲碎、翻拌、拣出碎石，砂砾及植物残体等杂质。
4、一个样品准备四个装样瓶(或样品袋)，把装样瓶洗净晾干，填好样品标签并贴好。
5、样品缩分：将晾干敲碎的样品反复混合均匀，然后铺成一圆形，过圆心画十字线将圆分为四等分，取对角线二份(另二份弃去)，照此方法继续缩分，最终留500克左右制样。
6、样品粗磨：将风干样于白色搪瓷盘中用木棰、木棒再次压碎样品，全部过20目尼龙筛。过筛后的样品全部置于有机玻璃板上混匀。
7、样品细磨：取粗磨样品100克，用磨样机或研钵磨至全部过60目尼龙筛；
再取粗磨样品100克，用磨样机或研钵磨至全部过100目尼龙筛。
8、样品分装：将过20目、60目和100目样品分别装入相应的样品瓶中(各100克)，作为检测样品，剩余的约200克过20目筛样品装入另一个样品瓶中，作为自备库存样备用。过20目筛(孔径0.9毫米)粗磨样可直接用于土壤pH、土壤代换量、土壤速测养分含量、元素有效性含量分析；过60目筛(孔径 0.25毫米)样品用于农药或土壤有机质、土壤全氮等分析；过100目(孔径0.149毫米)土样，用于土壤重金属和元素全量分析。
制样注意事项：
1、晾样时不得将样品铺放在报纸等不洁净的纸张上；样品不得在阳光下直接暴晒；因时间关系需烘干样品时，需在45℃以下温度烘烤；不得在晾样前缩分样品；制样中，采样时的土壤样品标签与土壤样品始终放在一起，严禁混错；每个样品经风干、磨碎、分装后送到实验室的整个过程中，使用的工具与盛样容器的编号必须始终一致，以免搞错；制样所用工具每制备一份样品后擦洗一次，严防交叉污染。
2、在一个采样单元中，如果用多个样点的样品分别进行分析，其平均值或其他统计值（如标准差或置信区间等）的可靠性，无疑要比单独取一个样品的分析结果更大，但这样做的工作量比较大。如果把多个样点的土样等量地混合均匀，组成一个“混合样品”进行测定，工作量就可大为减少，而其测定值也可得到相近的代表性，因为混合样品的测定值，实际上相当于各个样品分别测定的平均值。如果采样点较多而使混合土样太多时，可以把全部土样放在盘子或塑料布上，用手捏碎混匀，用四分法淘汰。
四分法的方法是：将采集的土壤样品弄碎，混合均匀，铺成四方形，划分成如“田“字形的四份（见下图），保留对角的两份（1，4）土样，混合后留作样品，而把另外两份（2，3）弃去。如果一次分取后仍嫌土样太多，可再次四分，直到样重1kg左右为止。采集水稻土或湖沼等烂泥土样时，四分法往往难以应用，可改为在塑料盆（或桶）中用塑料棒将各样点烂泥搅匀后，再取出所需数量的土样。注明采样地点、日期、采样深度、土壤名称、编号等。同时做好采样记录。