U3000基本操作
频率。 时间常数:
紫外检测器对信号的变化响应有多快的值,一般建议为半峰高处峰宽的10%
左右。在软件中输入半峰宽后,软件会自动计算最佳的采样频率和时间常数。
紫外检测器的时间常数最大为4.55秒,PDA检测器的上升时间最大为5秒。
如果时间常数设定得过长,会降低峰高并造成峰形的不对称。
2.5 分析样品前的准备工作 2.5.1 系统的准备
1. 分析样品前先用甲醇或乙腈冲洗流路约20分钟,平衡活化色谱柱,并赶走管路中的杂质和水分。
2. 若流动相为有机相与水相的混合物,则第1步完成后,按照分析样品的需要调节比例阀的比例后冲洗流路约30分钟后,待基线走平后即可进样。 3. 若流相相中含有缓冲盐溶液、有机/无机酸或其它电解质,则第1步完成后用95%左右的去离子水冲洗流路约20分钟后,再按照分析样品的需要调节比例阀的比例后冲洗流路约30分钟后,待基线走平后即可进样。
2.5.2 分析样品的准备
1. 按照样品的前处理要求处理好样品。例如用甲醇/水溶、超声、萃取、索氏提取、过C18小柱等前处理方法。
2. 注意:大约估计一下待测样品所测成分的浓度或含量,将待测样品与标准品配成浓度大致相当的溶液,以满足线性的要求,保证所测样品的含量或浓度准确无误。
2.5.3 排系统气泡
1. 首先将所需要使用的流动相通道分别在软件泵的控制面板中进行“冲洗”排气泡,详细说明参考前面讲到过的泵的控制面板。
2. 若为手动进样阀,则需将进样阀处的扳手反时针扳到头后,用一次性医用注射器吸几毫升的50%甲醇或流动相,从进样口注入,清洗定量环和管路。 3. 若为自动进样器,则需按软件中自动进样器面板上三个清洗的“启动”键洗针并排掉针中残留的气泡。若仪器长时间未用,可能按一次“启动”键无法排气泡,
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可再按“启动”键,直至气泡排完为止。
4.若仪器较长时间未使用,流通池中可能有气泡,可以不接色谱柱,加大流速冲洗流通池中的气泡。
5.系统气泡排完后,可以参考2.5.1步骤进行系统的平衡。
2.6 采集基线
点工具栏中蓝色小圆点“择UV:
”,开始设置采集基线。将跳出如下窗口,选
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