湖北农
业科学
２０１１年
的不同种群进行种类鉴定，发现无论在门、目，还是在近缘种水平。该基冈都具有较好的鉴定功能。近年来．随着相关研究Ｔ作的开展．进一步确立了以ＣＤ，基因为基础的ＤＮＡ条形码技术的有效性。很多国际组织自行建立的ＤＮＡ条形码数据库构成整个ＤＮＡ条形码项目的重要组成部分．有较大影响或规模的组织包括ＡＬＬ
Ｌｅｐｓ、ＦＩＳＨ ＢＯＬ、ＣａｎａｄｉａｎＦａｕｎａ
别结果更精确。客观；②能在生物不同生长阶段取样鉴别：③利用生物体小块组织鉴别，如通过鉴别胃里的食物小块重建食物链；④不需要专门的物种
鉴定专家．只需要设计好鉴别的实验流程，鉴别过
程是可以机械重复的：⑤鉴别过程迅速，量大，一个
标准ＤＮＡ数据库的建立．利用试剂盒，ＰＣＲ仪等基础实验设备．可以一次性鉴定大量的标本。
当然．ＤＮＡ条形码技术在物种鉴定中体现快速、高效的同时．也避免不了技术上的缺陷，主要表
和Ｂｉｒｄｓ等。６，１２］。同样．ＣＯｌ基因特定片段作为ＤＮＡ条形码在真菌的鉴定研究中也取得了有价值的结果。有学者对Ａｓｅｏｍｙｅｏｔａ、Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｅｏｔａ、Ｃｈｙｔｒｉｄ．ｉｏｍｙｃｏｔａ等的３１个真菌物种的Ｃ０１基因进行了研究，结果显示约６００ｂｐ的ＣＯｌ基因片段长度可以准确鉴定真菌物种．表１总结了ＤＮＡ条形码技术在生物分类学中的应用现状。４
现在：①如何选择合适的基因标记序列，作为ＤＮＡ
条形码的标记基因．一方面应该足够保守．以便于能够利用通用引物扩增大范围的物种．另一方面要包含足够的变异可区分不同物种。理论上不存在普遍适用的标记基因．因此在鉴别不同的物种种类
ＤＮＡ条形码技术在生物分类学应
时，需要根据实际情况选择标记基因。②如何确定
不同长度的ＤＮＡ序列对物种进行有效区分的意义：该技术是否适合区分关系密切或快速进化的物种等需要进一步验证。ＤＮＡ条形码技术主要是对物种进行鉴定．重点在于种内和种间差异的限定．但种内和种间定义并不太明确．不同物种的变异范围并不一样．没有一个统一的标准界限。此外，碱基的二次变异．线粒体ＤＮＡ的修剪机制，对快速进化物种和杂交新品种在鉴定上带来『目难．近缘物种间的基因交流．同属物种间较低的差异也会给物种分类鉴定带来困难。另外．植物的线粒体ＤＮＡ因杂交和基因渗入而变异很少．利用线粒体基因通常不能成功地鉴别．这些类群的标记基因至今仍没有明确报道．需要进一步探讨。
用中的优势及存在的问题
形态学分类有其局限性…：例如。表型可塑性和遗传可变性容易导致鉴定不准确：形态学方法无法鉴定许多群体中普遍存在的隐存分类单元：形态学鉴定受生物性别和发育阶段的限制．因此很多生物很难鉴定。同时．分类学家识别能力也有局限性，能够正确鉴定１０００个物种的分类学家极少．对地球上ｌ亿，１０亿个物种而言就需要１万～１０万个分类学家来支撑这个物种的识别体系。
ＤＮＡ条形码技术在弥补传统分类不足上的潜力巨大。它提供了一个更加敏感、精确、客观的分子
差别模式。其优势表现在：①鉴别过程快速简便。鉴
表１
ＤＮＡ条形码技术在生物分类学中的应用列举
万方数据