生化总结(3)

2018-11-19 21:29

真核生物mRNA。绝大多数真核细胞mRNA 3’端有一段长约20~250的poly(A)。poly(A)是在转录后经poly(A)聚合酶的作用添加上去的。poly(A)尾巴可能与mRNA从细胞核到细胞质的运输有关。它还可能与mRNA的半衰期有关:新生mRNA的poly(A)较长,而衰老的mRNA poly(A)较短。

17.核酸变性、复性、杂交概念、Tm 值及影响因素

变性:DNA分子中的双螺旋结构解链为无规则线性结构的现象。变性的本质是维持双螺旋稳定性的氢键断裂,碱基间的堆积力遭到破坏,但不涉及共价键的断裂和一级结构的改变。凡是破坏双螺旋稳定的因素,如加热、极端的ph,有机试剂甲醛、乙醇、尿素及甲酰胺等,均可以引起核酸分子变性。有温度升高称为热变性,有酸碱引起的称为酸碱变性。

变性的特征:溶液粘度降低,旋光性发生改变,紫外线吸收增强

复性:变性的DNA在适当的条件下,又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构。

杂交;两条核酸单链通过序列互补,形成稳定的同源或异源双链分子的过程。 Tm值:通常把加热变性使DNA的双螺旋结构失去一半时的温度称为该DNA的熔点或是溶解温度,用Tm值表示。在一定条件下,Tm值大小与核酸分子的长度有关,核酸分子越长,Tm值越大。

影响因素:1.DNA 的均一性越高,Tm的温度范围越小。

2.G-C含量越高, Tm的值越大,当GC的含量上升1%,则Tm上升0.4℃。马默多蒂(Marmur-Doty)关系式:Tm = 69.3+0.41(G+C)%,或GC%=(Tm-69.3)×2.44

3.介质的离子强度较高时, Tm的值较大。

4.酸性条件下,核酸容易脱嘌呤,碱性条件下,核酸容易变性,通常加NaOH 降低Tm的值。

5.尿素,甲酰胺等化学试剂可以降低Tm的值,称作变性剂。

18.DNA 变性复性与紫外吸收性的变化

变性:紫外吸收增强 即增色效应(hyperchromic effect),指DNA变性后其紫外吸收明显增强的效应。DNA变性后暴露出藏于双螺旋内部的碱基共轭双键,因而分子在260nm处的紫外光吸收将增强。

复性:随着核酸复性,会发生减色效应(hypochromic effect),即紫外吸收降低的现象。

19.碱基配对原则、维持 DNA 结构的作用力

碱基配对原则:在DNA分子结构中,由于碱基之间的氢键具有固定的数目和DNA两条链之间的距离保持不变,使得碱基配对必须遵循一定的规律,这就是Adenine(A,腺嘌呤)一定与Thymine(T,胸腺嘧啶)配对,Guanine(G,鸟嘌呤)一定与Cytosine(C,胞嘧啶)配对,反之亦然。碱基间的这种一一对应的关系叫做碱基互补配对原则。

维持DNA结构的作用力:①两条多核苷酸链间的互补碱基对之间的氢键作用. ②螺旋中碱基对疏水的芳香环堆积所产生的疏水作用力

③上下相邻的芳香环的电子的相互作用即碱基堆积力.这是一种最主要的作用力. ④磷酸基团的氧原子带负电荷,与细胞中的碱性组蛋白,亚精胺以及Mg2+等阳离子化合物结合所形成的离子键,从而抵消负电荷之间的排斥作用.

20.作为生物催化剂的特点

1、高效性 2、专一性 3、活度可被调节性 4、酶易失活

21.酶的专一性?酶分哪六大类,给出一个酶促反应判别酶的类型 (P150-152)

答:(一)酶的专一性是指酶对催化的反应和反应物有严格的选择性,包括反应专一性和底物专一性。反应专一性是指酶只催化一种或一类反应,几乎不产生副反应。底物专一性又分为结构专一性、立体专一性和几何专一性。其中结构专一性又有绝对专一性和相对专一性之分。绝对专一性指有些酶只作用于一个特定的底物,如脲酶只能催化尿素水解。相对专一性指有些酶的作用对象是一类化合物或一类化学键,如胰凝乳蛋白酶能选择性地水解含有芳香侧链的氨基酸残基。立体专一性指酶能够专一性地与手性底物结合并催化这类底物发生反应,如淀粉酶只水解D-葡萄糖形成1,4-糖苷键。几何专一性指某些酶只催化某种几何异构体底物的反应,如延胡索酸酶只能催化延胡索酸水合生成苹果酸。

(二)酶可以分为以下六大类:

(1)氧化还原酶类:A-2H+B≒A+B-2H(这类酶包括脱氢酶、氧化酶、过氧化物酶、加氧酶)

如乳酸脱氢酶:乳酸+NAD+≒丙酮酸+NADH+H+ (2)转移酶类:A-B+C≒A+B-C

如谷丙转氨酶:谷氨酸+丙酮酸≒α—酮戊二酸+丙氨酸

(3)水解酶类:A-B+H2O≒A-OH+B-H(这类酶包括淀粉酶、酯酶、蛋白酶、核酸酶)

如ATP酶:ATP+H2O≒ADP+H3PO4

(4)裂合酶类(裂解酶类):A-B≒A+B(这类酶包括醛缩酶、水化酶、脱氨酶) (5)异构酶类:A≒B

(6)合成酶类:A+B+ATP→A+B+ADP+Pi

22.全酶构成?各成分在酶促反应中作用? 答:全酶包括

23.酶的活性中心与必需基团? 24.最适 pH,最适温度

25.米氏方程,Km、Vmax 的意义、求法。

26.竞争性抑制剂与非竞争抑制剂对酶的抑制用方式?对 Km,Vmax 影响? 27.酶的活性单位、酶的比活力 28.何谓同工酶,乳酸脱氢酶为例说明 29.呼吸链、氧化磷酸化、P/O 比 30.抑制剂与抑制部位、解偶联剂的作用

2

31.NADH+H+和 FADH 在传递电子方面有何不同? 32.线粒体外 NADH+H+转运入线粒体内的两条途径? 33.糖酵解途径及能量变化、作用部位、酵解的调节:限速酶 34.三羧酸循环及能量变化(氧化磷酸化、底物磷酸化)、作用部位

35.糖的异生作用,怎样理解葡萄糖异生途径不是糖酵解途径的逆转。 1

36.丙酮酸是如何异生成糖的?糖酵解和糖异生途径的关键酶。 37.丙酮酸的去路。

38.磷酸戊糖途径有哪些生物学意义

答:磷酸戊糖是合成核苷酸辅酶及核酸的主要原料 39.脂肪酸的活化、肉毒碱穿梭系统

40.阐述脂肪酸β氧化:部位,每 4 步一个循环、能量变化 41.饱和脂肪酸彻底氧化能量计算 42.何谓酮体

43.氧化脱氨、转氨基作用、转氨酶的辅酶、联合脱氨:两种方式 44.尿素在人体内如何合成的?尿素循环或鸟氨酸循环。 45.联合脱氨作用,氨基酸→σ酮酸经三羧酸循环彻底氧化

ATP 能量变化

46.何谓“一碳单位”?一碳单位与嘌呤核苷酸/嘧啶核苷酸代谢的联系? 47.嘌呤环和嘧啶环的元素来源 48.脱氧核糖核酸如何生成?

49.遗传信息传递的中心法则,半保留复制

50.复制的半不连续性,冈崎片断,前导链(领头链)、滞后链、复制子、复制叉 51.转录,模板链,不对称转录、逆转录及逆转录酶的三种活性 52.复制和转录过程有何相似和不同

53.参与 Pr 生物合成的三种 RNA(tRNA、rRNA、mRNA)的作用。 54.真核生物中 mRNA 转录后加工 55.密码子与反密码子碱基配对、方向性

A-U,G-C,T-A,C-G,5’到3’

56.遗传密码有哪些特点?

1、方向性:5’到3’

2、简并性和摆动性:同一种氨基酸可以由两种或两种以上的密码子所决定的叫做同义密码子

3、通用性:使用同一套氨基酸编码方法 4、不重叠、无标点


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