的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌。前者引起霍乱，后者可致食物中毒。
五．简答题
1.简要说明霍乱弧菌的微生物学检查法。
霍乱属于烈性传染病。若遇到可疑霍乱患者，应采集“米泔水”样粪便或呕吐物快速送检，以便尽早确诊，及时隔离治疗。
（1）直接涂片镜检：悬滴法检查有无“鱼群”样排列、运动活拨的细菌。样本中加入抗血清后，运动消失。革兰染色为阴性。 （2）分离培养与鉴定
2.简述霍乱肠毒素的组成及致病机制。
霍乱肠毒素为不耐热的外毒素，是霍乱弧菌重要的致病因素。一个毒素分子由一个A亚单位和4-6个B亚单位组成。A亚单位是毒性亚单位，分为A1和A2两个组分；其中A1具有酶活性，为毒性成分。B亚单位是结合亚单位。当B亚单位与肠黏膜上皮细胞的GM1神经节苷脂结合时，毒素分子变构，A亚单位进入细胞，其A1链作用于腺苷环化酶，使ATP转化为cAMP。大量的cAMP作用于肠黏膜细胞，使其过度分泌钾、钠、碳酸离子及水，导致剧烈的腹泻，从而使水分和电解质大量丢失，血容量明显减少，导致微循环衰竭、电介质紊乱和代谢性酸中毒。病人可因肾衰而死亡。
3．试述霍乱的确诊标准。有下列三项中一项者可以确诊：①有泻吐症状，粪便培养有霍乱弧菌生长者；②流行区人群，有典型症状，但粪便培养无霍乱弧菌生长者，经血清凝集抗体测定效价呈4倍或以上增长者；③虽无症状但粪便培养阳性，且在粪便检查前后5天内曾有腹泻表现，并有密切接触史者。
4．试述霍乱的治疗原则。①严格隔离 病人应按甲类传染病进行隔离，及时上报疫情。确诊患者和疑似病例应分别隔离，病人排泄物应彻底消毒。病人症状消失后，隔日粪便培养一次，连续两次阴性方可解除隔离；②及时补液 包括静脉补液和口服补液。静脉补液适用于重度脱水、不能口服的中度脱水及极少数轻度脱水病人。补液原则为早期、迅速、足量，先盐后糖，先快后慢，纠酸补钙，见尿补钾，对老人、婴幼儿及心肺功能不全的病人补液不可过快，边补边观察治疗反应。口服补液适用于轻、中度脱水病人及纠正低血容量性休克后的重度脱水病人；③抗菌治疗及抑制肠粘膜分泌药物的使用 常用抗菌药物有多西环素、环丙沙星、诺氟沙星等，可选择其中一种连服三日。抗分泌药可选用氯丙嗪、黄连素、消炎痛及肾上腺皮质激素等；④对症治疗 血压低时可用肾上腺皮质激素及血管活性药，急性肺水肿及心力衰竭时应暂停补液，给予镇静、利尿及强心药物治疗。低血钾时补钾，肾功能衰竭时应纠正酸中毒及电介质紊乱，必要时可采用透析治疗。
5．试述霍乱的预防措施。 ①控制传染源 建立、健全腹泻门诊，对腹泻病人进行登记和采集粪便培养。对病人应隔离治疗至症状消失后6日，并隔日粪便培养一次，连续三次阴性。对接触者应严密检疫5日，留粪便培养并服药预防；②切断传播途径 改善环境卫生，加强饮水消毒和食品管理。对病人或带菌者的粪便与排泄物均应严格消毒；杀蛆灭蝇；③提高人群免疫力 接种全菌体死疫苗可减少急性病例，控制流行规模。
六．病案分析
患者，男，29岁，因腹泻12小时2004年8月5日入院。患者在12小时前开始出现腹泻，大便10余次，为黄色水样便，曾呕吐2次，为胃内容物。无发热、腹痛及里急后重感，起病后曾自服氟哌酸4片，但效果欠佳。既往体健，无肝炎、结核等病史。病前一天曾进食过海鲜。体查：体温36.8℃，脉搏96次/分，呼吸22次/分，血压87/60mmHg,神志清，皮肤弹性差，口唇干燥，眼窝凹陷。心肺听诊未闻异常，腹平软，无压痛反跳痛。肝脾肋下未触及，肠鸣音活跃。膝、跟腱反射存在，病理反射未引出，脑膜刺激征(－)。实验室检查：
9
外周血象：白细胞9.8×10/L,嗜中性粒细胞79％，血色素165g/L。大便常规：白细胞0～3个/HP,红细胞0～2/HP。
⑴ 试述本病例的诊断和诊断依据
⑵ 试述本病例要进行的进一步检查项目，以明确诊断。 ⑶ 试述本病例具体治疗措施 答案要点
⑴ 本例的诊断为霍乱。诊断依据为：①流行病学资料 夏天发病，病前有外出进食海鲜史；②临床表现 起病急，为无痛性腹泻，无发热、无里急后重；大便为黄色水样，无粘液脓血便；体查血压偏低，有脱水表现；③外周血象白细胞偏高，以嗜中性粒细胞为主，血色素升高，有血液浓缩现象；大便常规基本正常。
⑵ 为明确诊断，本例除作大便悬滴检查外，应作大便培养，先用PH8.4～8.6的1％碱性蛋白胨水增菌6～8小时，后转种到霍乱弧菌能生长的选择性培养基，再挑选典型菌落作玻片凝集试验确定致病菌。
⑶ 本病例具体治疗措施如下：①按霍乱疑似病例严格隔离，及时上报疫情。病人排泄物应彻底消毒。病人症状消失后，隔日粪便培养一次，连续两次阴性方可解除隔离；②及时补液 按中度脱水补充液体，可选用静脉补液和口服补液。原则为早期、迅速、足量，先盐后糖，先快后慢，同时注意纠正电介质紊乱或酸中毒；③适当使用抗菌及抑制肠粘膜分泌药物，抗菌药物可选用多西环素或环丙沙星、诺氟沙星等，连服三日；抗分泌药可选用氯丙嗪、黄连素等；④对症治疗 本例血压偏低，如在补足液体后血压仍较低，可加用肾上腺皮质激素及血管活性药。
第十三章 厌氧性细菌 一．填空题
1.破伤风杆菌是机体正常菌群中的一个组成部分，主要寄生在人体的 部位。肠道。 2.破伤风杆菌的芽胞位于菌体的 部位，使菌体呈 状。顶端，鼓槌。 3.破伤风类毒素是破伤风外毒素经 处理后， 消失而 完整的人工主动免疫制剂。3%甲醛，毒性，抗原性。
4.破伤风的治疗应给予注射 中和游离的毒素以及大剂量 杀伤繁殖体的破伤风杆菌。破伤风抗毒素，青霉素。
5.破伤风痉挛毒素作用部位是 ，作用机理是 。脊髓前角，封闭抑制性神经介质释放。
6.破伤风杆菌可产生 和 两种毒素。α溶血素，破伤风痉挛毒素。 7.注射破伤风类毒素进行预防接种，主要对象是儿童、 和 。军人和极易受外伤人员。
8.DPT三联疫苗是由 、 和 三种成分组成。白喉类毒素、百日咳死疫苗和破伤风类毒素。
9.肉毒杆菌主要通过 感染，引起以 为主要症状的肉毒中毒。消化道，肌肉麻痹。 10.肉毒杆菌的芽胞位于菌体的 部位，使菌体形成 状。次极端，网球拍。 11.产气荚膜杆菌在血平板上形成 溶血环，在牛乳培养基中出现 现象。双，汹涌发酵。
12.产气荚膜杆菌的芽胞位于菌体的 部位，比菌体 。次极端，小。 13.破伤风杆菌经 感染 ,其感染条件是伤口要具备 .致病因素是 . 伤口,厌氧环境.破伤风痉挛毒素
14.目前已知毒性最强的生物毒素是 . 肉毒毒素
15.在无芽胞厌氧菌感染中,以 最常见 ,临床分离的厌氧菌70%～80%是该菌 。 脆弱类杆菌
16.破伤风感染条件是 、 和 。窄而深的伤口、局部组织供血不足和混合有需氧菌及兼性厌氧菌的感染。 17。厌氧芽胞杆菌只有一个属，即梭状芽胞杆菌属，革兰染色阳性菌。主要包括破伤风梭菌，产气荚膜梭菌和肉毒梭菌。
18．破伤风梭主要存在于土壤、人和动物肠道中，以芽胞形式存在。 19．破伤风梭菌主要经创口伤口感染，致病物质破伤风痉挛毒素。
20、在牛乳培养基中生长繁殖的是产气荚膜梭菌，可以产生为该菌特点之一的汹涌发酵。 21、肉毒梭菌的主要致病物质是肉毒毒素，可致肌肉弛缓。
三.A型选择题
1.长期使用抗生素易引起
A.无芽胞厌氧菌感染； B.厌氧芽胞杆菌感染； C.病毒感染； D.缺陷病毒感染； E.梅毒螺旋体感染
2.以下关于厌氧芽胞杆菌的描述正确的是
A. 厌氧芽胞杆菌属于厌氧芽胞梭菌属； B.多数为病原菌，少数为腐生菌； C.内、外毒素同时致病； D.多引起内源性感染； E.繁殖体抵抗力强于其他无芽胞细菌 3.注射TAT的目的是
A.对易感人群进行预防接种； B.对可疑破伤风患者治疗及紧急预防； C.杀灭伤口中繁殖体的破伤风杆菌； D.主要用于儿童的预防接种； E.中和与神经细胞结合的毒素 4.血平板上形成双层溶血环的细菌是
A.葡萄球菌； B.肺炎球菌； C.破伤风杆菌； D.产气荚膜杆菌； E.白喉杆菌 5.引起气性坏疽的细菌是
A.乙型溶血性链球菌； B.肉毒杆菌； C.炭疽杆菌； D.分枝杆菌； E. 产气荚膜杆菌 6.疱肉培养基可用来培养
A.枯草杆菌； B.炭疽杆菌； C.百日咳杆菌； D. 产气荚膜杆菌； E.流感嗜血杆菌 7.肉毒毒素的特点是
A.可被肠道蛋白酶水解； B.引起肌肉强直性收缩; C.引起肌肉大块坏死; D.主要经过消化道吸收; E.细菌生活状态下释放 8.肉毒梭菌的芽胞特点是
A.椭圆形 ,位于菌体顶端; B.椭圆形 ,位于菌体次极端; C.正圆形 ,位于菌体顶端; D. 正圆形 ,位于菌体次极端; E. 椭圆形 ,小于菌体 9.肉毒毒素的作用部位是
A.脊髓前脚; B.脊髓后脚; C.外周神经-肌肉接头处; D.呕吐中枢; E.血管内皮 10. 肉毒毒素的致病机制是
A.抑制细胞蛋白质合成; B.阻碍乙酰胆碱释放; C.激活腺苷酸环化酶; D.与Ab Fc段非特异性结合; E.破坏CD4 T细胞 11. 高倍镜下形成＂汤勺状＂的细菌是
A.白喉杆菌; B.枯草杆菌; C.炭疽杆菌; D.产气荚膜杆菌; E.肉毒梭菌 12. 肉毒病的感染途径是
A.食用污染食物;B.污染伤口;C.节肢动物叮咬;D.吸入污染的空气;E.接触肉毒患者的用品 13. 人体肠道正常菌群中占绝对优势的细菌是
A.大肠杆菌; B.无芽胞厌氧菌; C.链球菌; D.变形杆菌; E.白色念珠菌 14. 破伤风特异性治疗可应用
A.抗生素; B.抗毒素; C.类毒素; D.细菌素; E.破伤风菌苗 15. 关于厌氧芽胞杆菌 ,下列哪项是错误的
A.均为革兰阳性杆菌;B.都能形成芽胞;C.都能通过伤口感染; D.都是厌氧菌;E.主要分布于土壤
16. 关于产气荚膜杆菌的致病性 ,正确的是
A.可引起严重的创伤感染;B.以组织气肿、水肿、坏死为主要病理表现; C.致病因素为毒素和酶；D.可致食物中毒; E.以上均对 17. 下列哪项不是肉毒梭菌的特点
A.肉毒毒素是毒性最强的物质;B.肉毒毒素作用于胆碱能神经末梢,抑制乙酰胆碱的释放; C.食入含有肉毒毒素的食物致病;D.革兰染色阳性,形成芽胞,有荚膜;E.肉毒中毒死亡率高 18. 破伤风抗毒素治疗破伤风的机制是
A.中和游离的外毒素; D.中和与神经细胞结合的外毒素; C.抑制破伤风杆菌生长; D.在补体参与下溶解破坏破伤风杆菌; E.减轻临床症状 19. 正常情况下无芽胞厌氧菌不存在的部位是 A.子宫腔; B.尿道; C.肠道; D.阴道; E.上呼吸道 20. 下列能产生细胞毒物质的细菌是（ ）
A.破伤风杆菌; B.结核杆菌; C.幽门螺杆菌; D.产气荚膜杆菌; E.肉毒梭菌
1.A 2.D 3.B 4.D 5.E 6.D 7.D 8.B 9.C 10.B 11.E 12.A 13.B 14.B 15.C16.E 17.D 18.A 19.A 20.B 21.关于破伤风梭菌感染的条件，错误的是：C
A. 由伤口侵入机体B. 伤口污染了该菌C. 伤口还需污染其他共生菌D. 伤口为厌氧环境 E. 该菌必须在伤口局部繁殖产生外毒素 22.有利于白喉杆菌形态学鉴定的结构A
A. 神经细胞B. 皮肤粘膜C. CD4细胞D. 成纤维细胞E. 呼吸道粘膜细胞
23.咽喉假膜标本涂片染色后,镜检出有异染颗粒的棒状杆菌,其临床意义在于诊断 C A.结核病 B.军团病 C.白喉 D.脑脊髓膜炎 E.百日咳 24.真菌毒素对人类的危害有：ABCD
A. 致癌作用B. 致畸作用C. 慢性中毒D. 急性中毒E. 变态反应 25.痢疾杆菌的致病物质及其作用有：ABC
A. 菌毛：能粘附于肠粘膜细胞B. 内毒素：大多数菌株都可产生
C. 外毒素：个别菌株可产生 D. 鞭毛：使细菌产生运动而扩散 E. 侵袭性酶类 26.培养时需厌氧环境的细菌是E
A:绿脓杆菌B:鼠疫杆菌C:变形杆菌D:伤寒沙门菌E:脆弱类杆菌 27.关于破伤风梭菌的叙述，其正确的是C
A:属于兼性厌氧菌B:为革兰阴性杆菌C:外毒素致病D:可以引起败血症E:可以引起骨骼肌弛缓性麻痹
28. 破伤风的紧急预防应注射C
A:类毒素B:抗生素C:抗毒素D:干扰素E丙种球蛋白 29.破伤风梭菌的致病机制是：B
A:破伤风梭菌通过血流侵入中枢神经系统大量增殖致病
B:破伤风痉挛毒素侵入中枢神经系统疾病C:破伤风溶血毒素侵入中枢神经系统疾病 D: 破伤风梭菌产生内毒素引起休克 E破伤风梭菌引起败血症 30.可以引起食物中毒的病原菌是E
A:炭疽杆菌B:破伤风梭菌C:脆弱类杆菌D:产气荚膜梭菌E产黑色素杆菌 31.“汹涌发酵”现象是用于鉴定E
A:炭疽杆菌B:艰难杆菌C:肉毒梭菌D:破伤风梭菌E产气荚膜梭菌 32.肉毒梭菌引起的食物中毒是以C
A:消化系统症状为主B:呼吸C:神经D:泌尿E循环 33.目前已知的细菌毒素中毒性最强的是D
A:破伤风痉挛毒素B:金葡菌肠毒素C:霍乱肠毒素D:肉毒毒素E志贺毒素
四、名词解释
1．汹涌发酵：产气荚膜梭菌，在庖肉培养基中培养后，可分解肉渣中糖类并产生大量气体，肉渣呈淡红色。在牛乳培养基中培养18-24小时，该菌分解乳糖产酸，使牛奶中酪蛋白凝固，同时产生大量气体，冲散凝固的酪蛋白，并将封固液面的凡士林层顶开，甚至冲掉试管口棉塞，气势凶猛，称“汹涌发酵”(stormy fermentation)
2．肉毒毒素：肉毒毒素毒性最强，比氰化钾强1万倍。小鼠经腹腔注射，LD50为0.00625ng，1mg纯化的毒素能杀死2亿只小鼠，对人致死量约0.1μg。肉毒毒素是嗜神经性毒素，通过胃肠道吸收后，经血流作用于外周神经肌接头处、通过重链与突触前膜神经节苷脂结合，阻止胆碱能神经末梢释放乙酰胆碱，影响神经冲动的传递，导致肌肉麻痹。
五.问答题
1.试述破伤风梭菌的感染条件、致病机制和防治原则
（1）感染条件：破伤风梭菌是一种非侵袭性细菌，芽胞广泛分布于自然界中，一般不引起疾病。当机体存在窄而深的伤口，或伴有需氧菌及兼性厌氧菌的同时感染，或坏死组织多、泥土或异物污染伤口而形成局部缺血缺氧，造成局部厌氧环境则有利于破伤风梭菌的繁殖。 （2）致病机制：破伤风梭菌感染易感伤口后，芽胞发芽成繁殖体，在局部繁殖并释放破伤风痉挛毒素及破伤风溶血素。前者作用于脊髓前角运动细胞，封闭了抑制性神经介质，导致全身肌肉强直性收缩出现角弓反张。
（3）防治原则：由于破伤风痉挛毒素能迅速与神经组织发生不可逆性结合，故一旦发病治疗困难，所以预防尤为重要。如遇到可疑伤口应做到清创、扩创，同时使用大剂量青霉素抑
制细菌繁殖。用破伤风抗毒素对患者进行紧急预防，对已发病的人要进行特异性治疗。易感人群如儿童、军人和易受外伤人群应接种破伤风类毒素，儿童应采用白百破三联疫苗进行接种预防。
2.试述无芽胞厌氧菌的致病条件
(1) 机械性或病理性损伤:由于手术、拔牙、肠穿孔等屏障功能受损，细菌侵入非正常寄居组织。（2）菌群失调。（3）局部或全身免疫力下降。（4）局部厌氧环境的形成。 3.无芽胞厌氧菌的感染特征包括哪些?
（1）发生在口腔、鼻咽部、胸腔、腹腔、盆腔的感染及其他深部脓肿。（2）分泌物带血或呈黑色，有恶臭。（3）血培养阴性的败血症、感染性心内膜炎等。（4）分泌物直接镜检有菌，但一般培养无菌生长。（5）使用氨基甙类抗生素如链霉素、卡那霉素、庆大霉素等治疗无效。 4.简述肉毒梭菌的致病机理
肉毒梭菌在厌氧条件下能产生毒性极强的肉毒毒素，主要随污染的食品经消化道吸收经血液或淋巴液作用于中枢神经核及外周神经-肌肉接头处，阻碍乙酰胆碱释放，影响神经冲动的传递，导致肌肉迟缓性麻痹。 5．简述破伤风梭菌的致病机制
破伤风梭菌芽胞广泛分布于自然界，可由伤口侵入人体。该菌的侵袭力不强，仅在伤口部位繁殖，但能产生毒性极强的外毒素。破伤风外毒素亦称破伤风痉挛毒素(tetanospasmin)。 破伤风痉挛毒素对中枢神经系统，尤其是脑干神经和脊髓前角细胞有高度亲和力。毒素通过运动神经终板吸收，利用突触逆向运输进入脊髓前角细胞，上行达脑干细胞。毒素也可经淋巴吸收，通过血液到达中枢神经。在中枢神经系统，由于突触囊泡蛋白-II 的作用，使神经介质小泡锚于突触前膜，释放神经介质，引起正常的冲动反应。破伤风痉挛毒素降解突触囊泡蛋白-II，阻断神经介质小泡的锚泊作用，从而阻止甘氨酸能中间神经元和?-氨基丁酸能神经元释放抑制性介质甘氨酸和γ-氨基丁酸，致使屈肌、伸肌同时强烈收缩，骨骼肌强直痉挛，造成破伤风特有的角弓反张、牙关紧闭等症状。此外，破伤风痉挛毒素还可影响神经肌接头处神经突触的传递活动，促使乙酰胆碱积聚，产生松弛性麻痹。 6． 试述产气荚膜梭菌的致病物质及其所致疾病
产气荚膜梭菌产生12种外毒素，根据4种主要毒素的抗原性不同，将本菌分为A、B、C、D和E 5个血清型。对人致病的主要为A和C型。A型引起气性坏疽、食物中毒，C型引起坏死型肠炎。产气荚膜梭菌的毒素，相互间毒性差别较为悬殊。α毒素（alpha toxin）亦称卵磷脂酶（lecithinase），是气性坏疽最为重要的毒素。β毒素(beta toxin) 由B型和C型细菌产生，是人类坏死性肠炎的致病物质。ε毒素(epsilon toxin)主要由D型细菌产生，具有坏死和致死作用。ι毒素(iota toxin)具有致死作用。能引起皮肤坏死和血管通透性增高。肠毒素（enterotoxin）由A、C和D型菌株产生。引起腹泻；亦可作为超抗原刺激淋巴细胞释放淋巴因子而致病。θ毒素(theta toxin)亦称产气荚膜梭菌溶素O（perfringolysin O）, 对氧敏感，具有溶血、致死、坏死、杀白细胞等活性。κ毒素(kappa toxin)为胶原酶，是一种出血因子，注入动物血管内，可引起血管破坏和出血。λ毒素(lambda toxin)是明胶酶，μ毒素(mu toxin)是透明质酸酶，ν毒素(nu toxin)是DNA酶。产生该类毒素均有利于细菌的扩散。
感染产气荚膜梭菌后可引起多种疾病：（1）气性坏疽（gas gangrene） 是严重的急性感染，以组织坏死、水气肿、全身中毒为特征。此病通常由几种菌混合感染，最多见的是产气荚膜梭菌（60%-90%），其次是水肿杆菌（30%-40%）和败血杆菌（10%-60%）。致病条件与破伤风梭菌相似，常见于战伤、大面积开放性骨折及软组织损伤，同时伴有创口的污染。一般在细菌感染伤口后8-48小时内产生大量毒素和酶类，由于卵磷脂酶和透明质酸酶等的作用，细菌易侵入肌肉组织。细菌分解肌肉组织中的糖类，产生大量气体，形成组织气肿，挤压软组织和血管，影响血液供应，引起肌肉坏死。（2）食物中毒 主要由产肠毒素的A型菌株引起。因食入被该菌大量污染的食物而发病，一般在食后8-12小时突发腹痛、腹泻、便血等症状，约1-2天自愈，严重者亦可致死。（3）坏死性肠炎 是产气荚膜梭菌C型菌株所致，致病物质为β毒素。β毒素能引起肠道运动神经麻痹和坏死。一般潜伏期约 24h，起病急，有剧烈腹痛、腹泻、肠黏膜出血性坏死伴有血粪。可并发肠梗阻和肠穿孔，病死率高达40%。