填写操作和处理记录。
9.3 将实验区内的污染材料高压处理（121℃高压20min）后，再集中高压处理。
附件5
埃博拉病毒IgG抗体检测方法（间接法ELISA）
1 目的
检测埃博拉病毒特异性IgG抗体。 2 适用范围
适用于人血清或血浆中埃博拉病毒特异性IgG抗体的检测。 3 实验前准备
（1）核对被检样品（血清或血浆）患者的姓名、编号及检测项目等。 （2）检测前应将60℃ 1小时热灭活的待测样品置于BSL-3实验室生物安全柜内的冰上。
4 检测项目
本方法检测项目为检测血清或血浆中埃博拉病毒特异性IgG抗体 5 检测仪器设备和材料
加样器、温箱、洗板机、含波长450nm的酶标仪、埃博拉病毒IgG抗体检测试剂盒，或实验室自备材料：
（1）抗原：
阳性抗原：原核表达埃博拉病毒核蛋白。 阴性抗原：原核表达汉坦病毒核蛋白。 （2）辣根过氧化物酶标记的抗人IgG抗体； （3）汉坦病毒IgG阳性、阴性对照血清； （4）缓冲液：
包被液：pH9.6碳酸缓冲液； 稀释液：pH7.4 PBS（含5%脱脂奶）
洗涤液：pH7.4 PBS－T（0.05％吐温－20）； （5）显色液：A/B液 （6）终止液：4NH2SO4 （7）酶标板、酶标仪。
6 检测步骤：
（1）用包被液按工作浓度稀释埃博拉病毒抗原和阴性对照抗原，100μl/孔，4℃过夜；
（2）弃去包被液，用PBS-T重复洗涤3次；
（3）将待检血清用稀释液从1：100开始作2或4倍连续稀释，加入抗原孔，100μl/
孔，同时设汉坦病毒阴、阳性血清对照，37℃水浴30 分钟； （4）弃去血清，用洗涤液洗涤5～6次；
（5）加酶结合物，用稀释液按工作浓度稀释，100μl/孔，37℃水浴30分钟； （6）弃去酶标抗体，用洗涤液洗涤6次；
（7）加显色液：于各反应孔内加A/B液各一滴，37℃，避光3～5分钟； （8）加终止液于每反应孔，100μl/孔。 7 结果判断：
7.1于450nm（TMB）待检血清孔OD值与阴性对照孔OD比值≥2.1，则标本为埃博拉病毒IgM抗体阳性，反之阴性。（阴性对照孔OD值小于0.05按0.05记，若大于0.05按实际数值计算）.
7.2 阴性对照的正常值范围：阴性对照孔A≤0.1。 7.3 汉坦病毒阳性对照的正常值范围：0.8≤A≤1.5. 8 意义：
阳性结果，表明曾受到埃博拉病毒感染；恢复期血清抗体阳转，或抗体滴度比急性期抗体滴度有4倍及以上升高则可确诊。
9 清场与消毒
9.1 操作结束后，及时清理生物安全柜内的物品，用0.5%次氯酸钠溶液和75%乙醇擦试外表面后，移出生物安全柜放入冰箱中。
9.2 未使用完的感染性生物材料销毁或放入BSL-3级实验室－70℃冰箱，并如实填写操作和处理记录。
9.3 将实验区内的污染材料高压处理（121℃高压20min）后，再集中高压处理。
附件6
埃博拉出血热相关标本实验活动意外应急预案
1 总则 1.1目的
为有效预防、及时发现和有效控制发生在实验室范围内的埃博拉病毒相关感染性样品实验活动意外，最大限度的减轻意外事件对实验室人员和环境造成的危害，指导和规范生物安全工作，保障实验室工作人员身体健康、生命安全和环境的安全，保障埃博拉病毒实验室相关检测活动的顺利进行，特制定本预案。
1.2编制依据
《中华人民共和国传染病防治法》 《突发公共卫生事件应急条例》 《实验室生物安全手册》（第三版） 1.3 原则
以“安全第一、预防为主”为应急处置原则。 ? 适用范围
1.4.1埃博拉病毒的实验室污染事件 1.4.2工作人员发生埃博拉病毒实验室暴露 1.4.3埃博拉病毒被泄露出实验室
1.4.4由于停电、火灾等不可预测因素所引起的实验室其他污染事件 1.5 启动条件
当实验室发生意外事故的紧急情况下，可启动该预案。 2 应急组织体系及职责 2.1 应急指挥机构
在本单位实验室生物安全委员会或相应的部门及本单位各行政职能部门统一领导下，负责组织、协调实验室重大突发事件的应急处理工作，制定本部门的应对意外事故处理的应急预案。
2.2实验室管理部门
单位实验室管理部门应组织实验室相关人员进行实地演练。 2.3实验室负责人
实验室负责人应对急救用品进行检查和补充，组织实验室内部人员进行生物安全培训。
3预防和预警机制 3.1预防
3.1.1加强实验室生物安全规范化操作管理，按《实验室生物安全通用要求》 做出明确规定。
3.1.2建立实验室应急物资和设备的储备，配置个人防护、消毒药品和医疗救援药品，定点存放和定人定期维护保养。
3.1.3埃博拉病毒相关感染性材料需登记使用，提高警惕，加强安全保卫，防止不法分子盗窃和抢劫埃博拉病毒相关感染材料，用于生物恐怖攻击。
3.1.4建立实验室工作人员健康档案，定期体检。发现与实验室生物安全有关的人员感染或伤害应立即报告。
3.1.5加强对实验操作人员的生物安全业务培训和演练。 3.2预警
3.2.1建立有效的预警机制，为埃博拉病毒相关感染性材料建立档案和使用记录，发现遗失或被盗，立即报告（见处理程序）。
3.2.2完善实验室人员健康档案，发现与实验室生物安全有关的人员感染或伤害立即报告。
3.2.3定期开展自查，及时发现各类安全隐患，发出预警通报。 4.突发事件的报告及应急响应 4.1报告人
4.1.1实验室工作人员为法定报告人。
4.1.2除实验室工作人员外任何单位和个人如发现有实验室感染事故均可报告. 4.1.3任何单位和个人不得隐瞒、缓报、谎报、或者授意他人隐瞒、缓报、谎报。 4.2报告程序和方式