临床微生物学与微生物检验
clinical microbiology and Microorganism laboratory
课程编号：Z6500b018 课程类别： 专业课程 实验课性质：独立设课 适用专业：检验医学
实验学时：57 实验学分：4.5 先修课程：临床检验病原生物学实验指导 实验指导书：临床微生物学与检验实验指导
开课实验室名称及地点：临床医学实验中心 6号实验教学大楼 一、实验教学目的和基本要求
（1）通过实验加深和巩固对理论知识的理解。
（2）通过实验课中学生的亲自动手操作，使学生熟悉、掌握临床微生物基本操作技能，为以后从事临床微生物学检验和科学研究等工作打下坚实的基础。 （3）通过实验课的实验操作，帮助学生树立无菌观念，掌握无菌操作技术。 （4）通过实验帮助学生熟悉和掌握临床常见病原微生物的生物学性状、分离培养和鉴定方法，培养学生发现问题、分析问题和解决问题的基本能力。 （5）同时通过在实验课中对临床各种标本的微生物检测，培养学生将理论知识应用于临床实践及评价检验方法诊断价值的综合能力。
二、实验课程内容和学时分配（见附表）
三、考试方法及成绩评定方法： 1、考试方法：
（1）实验带教老师对实验报告进行评分； （2）操作技能考试；
2、成绩评定方法：
（1）实验操作技能占70%；
（2）平时表现占10%； （3）实验报告占20%； 四、适用专业及年级：检验医学 五、主要仪器设备
恒温培养箱、冰箱、光学显微镜、高压蒸汽灭菌锅、净化工作台、酒精灯、接种针、接种环、试管及其它玻璃器皿等。
六、实验指导书：吴爱武.《临床微生物学与检验实验指导》.北京：人民卫生出版社，2007年
学 时 分 配 实 验 属 性 实 验 类 型 每 组 人 数
实验课程内容和学时分配
实 验 要 求 指 导 教 师 已开/ 未开 序号 实验项目 名称 实验内容 普通光学显微镜的使用与保养；不1 细菌形态学检查 染色标本检查；革 兰染色和细菌基本形态观察；培养基的制备 高压蒸气灭菌法；2 消毒灭菌与培养基制备技术 压力蒸气灭菌器、灭菌效果的监测方法 标本的平板划线分离法，斜面接种法，液体接种法，穿刺接种法，倾注平板法，涂布接种法；生化鉴定；血清学鉴定；数字编码鉴定。 葡萄球菌的鉴定实验；链球菌的鉴定实验 3 3 专 业 基 础 专 业 基 础 验 证 性 1 必 做 胡雪飞 已开 验 证 性 1 必 做 胡雪飞 已开 专 3 3 细菌分离培养鉴定技术 业 基 础 验 证 性 1 必 做 胡雪飞 已开 4 球菌培养与鉴定（一） 专 3 综 合 性 综 合 性 1 1 业 类 专 必 做 陈开森 已开 5 球菌培养与鉴定（二） 脑膜炎球菌的鉴定实验 铜绿假单胞菌，不动杆菌属的菌落观察；铜绿假单胞菌，不动杆菌属的形态染色；铜绿假单胞菌，不动杆菌3 业 类 专 必做 陈开森 已开 非发酵革兰阴性6 杆菌的培养和鉴定；苛养菌的培养和鉴定 验 证 性 1 3 业 类 必 做 贾坤如 已开 属的鉴定；肺炎链球菌和嗜血杆菌的鉴定。 苛养菌的培养与鉴定 流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌及肺炎链球菌的培养与鉴定。 炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、产单核细胞李斯特菌、白喉棒状杆菌的菌落形态观察，生化鉴定 真菌培养的菌落观察；真菌的形态染色（革兰染色）；墨汁负染色。 专 3 业 类 验 证 性 1 必 做 7 胡龙华 已开 革兰阳性需氧杆8 菌，棒状杆菌属培养和鉴定 专 3 业 类 验 证 性 1 必 做 胡意 已开 真菌学检验基本技术 9 分枝杆菌属，放10 线菌属与诺卡氏菌属培养鉴定 抗酸染色；结核分枝杆菌的菌落观察，形态特征。 支原体的培养鉴定；支原体“油煎蛋”样集落观察；衣原体的色标试验。 弧菌属的菌落观察；弧菌属的形态染色；弧菌属的生化反应；霍乱弧菌的血清学试验。 大肠埃希菌、沙门菌属、志贺菌属、克雷伯菌属，变形杆菌属分离培养鉴定。 肠杆菌属、枸橼酸专3 业基础 专 3 业 类 验 证 性 1 必 做 彭卫华 已开 验 证 性 1 必 做 廖晚珍 已开 11 支原体，衣原体的鉴定 专 3 业 类 验 证 性 1 必 做 胡晓彦 已开 专 3 业 类 验 证 性 1 综 合 性 综 1 1 必 做 12 弧菌属培养和鉴定 徐建民 已开 13 肠道细菌培养和鉴定（一） 专 3 业 类 3 专 必 做 胡龙华 已开 14 肠道细菌培养和必 胡龙华 已开 鉴定（二） 菌属和沙雷菌属分离培养鉴定。 破伤风梭菌、产气荚膜梭菌的菌落观察，形态染色；厌氧菌标本采集与运送；类杆菌的形态染色；厌氧培养、化反应。 钩端螺旋体形态观察；钩端螺旋体血清凝集试验；梅毒螺旋体血清凝集试验。 纸片琼脂扩散法药敏试验；β－内酰胺酶检测。 血液、骨髓、尿液、粪便、痰液、脓液、脑脊液等标本的接种，检验方法和报告方式。 业 类 合 性 做 15 厌氧菌的培养和鉴定 专 3 业 类 验 证 性 1 必 做 桂炳东 已开 专 3 业 类 专3 业 类 专3 业 类 验 证 性 验 证 性 验 证 性 1 1 1 16 螺旋体鉴定 必 做 胡晓彦 已开 抗菌药物敏感性17 试验与耐药性检测 必 做 胡龙华 已开 18 临床标本细菌学检验 必 做 徐建民 已开 验证滤菌器的除菌效果。比较物理因素对细菌用不同热力杀19 的影响实验 灭有芽胞细菌和无芽胞细菌 专3 业 类 设 计 性 1 选 做 廖晚珍 已开 制定人： 胡龙华 审核人：王小中
附件2：综合性设计性实验项目简介格式（各位老师可以按实际课程要求确定格式）
临床微生物学与微生物检验
课程编码：Z6500b018 实验指导书：《临床微生物学与检验实验指导》 面向专业： 检验医学
设计性实验项目名称 设计物理因素对细菌的影响实验
实验项目学时：3学时 实验要求：□ 必修 ■ 选修
【实验目的】
1．初步掌握实验设计的方法，了解实验中设置实验对照的意义。 2．掌握高压蒸汽灭菌法的操作和应用。
3．了解芽胞在热力和紫外线消毒中的较强抵抗力。
4．了解紫外线对细菌的作用;了解利用物理因素保存菌种的方法。 5．验证不同温度对细菌的影响。 【实验器材】
1．试验菌种 提前1周通知实验室准备。
（1）大肠埃希菌（Escherichia coli）（革兰阴性杆菌）。
（2）表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermitis）（革兰阳性球菌）。 （3）枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis）（革兰阳性有芽胞菌）。 2．培养基 可选用固体、液体、半固体培养基。实验设计方案经同学间相互讨论后（必要时由带教老师指导），选择可行的方法和相应的培养基。
提前1周通知实验室，需要特殊要求培养基由同学自己到实验准备室参与制作和准备。
3．常用器材 高压蒸汽灭菌器、60℃水浴箱、沸水浴或100℃水浴箱、4℃冰箱、定时钟、灭菌滤菌器和微孔滤膜或一次性无菌滤器、无菌棉签、无菌注射器、紫外线灯、超净工作台。
【操作步骤】
1．设计和完善实验方案
（1）针对实验要求和给定的试剂与器材，查找资料，结合已经掌握的理论和实验知识，设计实验方案。方案内容包括设计思路、实验方法和具体的操作步骤、需要的试剂和器材、培养的条件、结果观察方法以及可能出现的问题，写出预期实验结果。
（2）小组讨论，修改实验方案。
（3）课堂汇报，接受同学和老师的提问和建议，进一步完善实验方案，制作PowerPoint。
2．实施自己的实验方案
（1）提前1周通知实验室实验需要的培养基、试剂、器材等，并参加培养基配制等的实验准备工作。