（2）按完善后的设计方案进行实验，详细记录实验过程及各种实验现象、实验结果以及实验中出现的问题。
3．实验结果报告
（1）实验结束后，分析实验结果，写出实验报告和心得体会。
（2）按论文答辩形式制作PowerPoint，以小组为单位在实验大组内或班级汇报和答辩（具体视实验分组情况决定）。
4．汇报和总结
（1）汇报人选：采用教师推荐和学生自荐两种形式选出一定比例（10％～20％）学生进行公开汇报。教师根据学生实验设计方案的严谨性、可行性、创新性，实验结果的准确性，结合实验报告、PowerPoint制作和语言表达能力选择。鼓励学生自荐，尤其是设计不够完善、实验过程中出现失误或差错、实验结果不理想但分析问题深入和透彻、表达能力强的学生。
（2）公开汇报：参加汇报的学生将完善的PowerPoint，包括整个实验的设计、操作、结果和分析等按论文汇报的方式，在年级中进行公开汇报或答辩。教师或教学管理单位组织专业教师和学生评选优秀实验设计等奖项。
（3）总结：实验带教教师以实验组、班级为单位作总结和评价，对突出的同学给以适当的鼓励和奖励。教研室或教学管理单位对参加公开汇报的学生进行表彰，对获优秀奖项的学生进行鼓励和奖励。对有兴趣的同学，可吸收进入科研小组。
【实验内容】
1．验证滤菌器的除菌效果。
2．比较不同细菌（三种）在相同温度下（4、60、100、121℃）的抵抗力（统一时间）。
3.比较同一细菌在不同温度下（4、60、100、121℃）的抵抗力（统一时间）。 4．比较用不同热力杀灭有芽胞细菌和无芽胞细菌（60℃ 20min、100℃ 5min、121℃ 15 min）的能力和效果。
5．比较不同细菌（三种）对紫外线的抵抗力（10、30、60min）。 【提示】
1．实验设计中应设置实验对照，如阳性对照、阴性对照、空白对照等。
2．注意严格无菌操作。
3．实验内容较多，可按热力、紫外线、过滤三个方面分别设计;需合理安排实验项目和进程。
4．菌种、试剂、实验条件等较多，注意作好标记，防止出现差错。 5．注射器使用完毕后，放入指定回收箱内。 6．实验过程中出现问题，及时报告带教教师。
7．注意安全，尤其是使用高压蒸汽灭菌器、水浴箱、紫外线灯时（请见附件中的内容）。
【附】
1．紫外线灯 常用的是水银灯，灯管由石英制成。管内充满压强为2 mmHg的氩和几滴水银。当通电时管内的氩气开始辉光放电，使灯管略为发热，水银蒸发。当水银蒸气压变为0.1 mmHg时，即在其蒸气内产生电弧。这种电弧里含有大量的紫外线。紫外线具有杀菌作用的波长范围200～275 nm。紫外线具有辐射能量低、穿透力弱的特点，一张普通的盖玻片即能阻碍它的通过，仅能杀灭直接照射到的微生物，一般用于微生物实验、传染病房与外科手术室的空气消毒。
常用的紫外线灯有普通直管热阴极低压汞紫外线消毒灯，有40W、30W、20W、15W几种规格，这些紫外线灯在辐射253.7nm紫外线的同时，也辐射184.9nm紫外线产生臭氧。另外，还有高强度和低臭氧紫外线消毒灯，可根据实验室条件选用。
紫外线灯有一定的寿命，使用过程中辐射强度会逐渐降低，应定期测定强度，发现不合要求和标准时应及时更换。一般紫外线灯的使用时间为1 000h。
注意：对空气进行直接照射消毒时，使用30W的紫外线灯，照射时间不少于30min。照射完毕后，不宜马上进入。另外，不可在紫外线灯打开的情况下操作，也不可用眼睛看开着的紫外线灯，以防止紫外线对皮肤和角膜的损伤。
2．滤菌器 可用于去除糖溶液、血清、腹水、某些药物等不耐热液体中的细菌，也可用于分离细菌和病毒或细菌和毒素。滤菌器由孔径极小，能阻挡细菌通过的陶瓷、硅藻土、石棉、玻璃屑或纤维素等制成，种类很多，目前在医学微生物学中常用的类型有：
（1）蔡（Seitz）氏滤器：用金属制成，其中嵌以石棉滤板。滤孔分为K、EK、EK-S三型。Κ型最大，用于澄清；EK型滤孔较小，常用以去除一般细菌；EK-S型滤孔最小，可阻止大型病毒（如痘病毒）通过。
（2）玻璃滤器：由玻璃制成，滤板系用玻璃细砂在一定温度下压制而成，孔径0.15～2.50μm不等，分为G1、G2、G3、G4、G5、G6六种规格，后两种均能阻挡细菌通过。
（3）微孔滤膜：由醋酸纤维制成的薄膜，可切割成不同大小规格装在不同的金属或硬塑料滤器上。醋酸纤维滤膜不带电荷，仅靠滤孔大小作机械筛选，液体过滤后其中的有效成分丧失较少。薄膜滤孔的大小一般为0.025～14μm，常用于滤过除菌的为0.22μm或0.45μm。醋酸纤维膜比其他滤膜薄，仅0.1mm厚。
（4）使用方法：将滤膜用蒸馏水浸湿，放入清洁的滤器支架上。然后将滤器、滤瓶、收集用容器等分别用纸包装后，15磅高压蒸汽灭菌15 min。取出冷却后，以无菌操作将滤器和滤瓶装妥，并使滤瓶的侧管与抽气机的抽气橡皮管相连（中间并可接压力计及缓冲空瓶）。将被滤液体倒入滤器，开动抽气机，使滤瓶中压力逐渐减低，滤液流入收集容器中。滤毕关闭抽气机，先将抽气橡皮管在近滤瓶端用手术钳夹住，然后拔除与抽气机橡皮管的连接处。然后再启开滤瓶的橡皮塞，迅速以无菌操作取出瓶中滤液移放于无菌玻璃容器内。少量液体也可用注射器吸取后，采用正压方式过滤。
3．电热干烤箱 是干热灭菌常用的仪器，用于耐高热、怕湿或蒸汽和气体不能穿透的物品，如各种玻璃器材、陶瓷器具、粉剂、金属制品、非挥发性油类（如石蜡、凡士林等）的灭菌。
将待灭菌物品包装好后放入干烤箱内，关好干烤箱门后，打开通气孔，通电加热，开鼓风机，160℃维持2 h或170℃维持1 h或180℃维持30min，关闭鼓风机和电源。注意需灭菌物体应先洗净，干燥；包装大小不能超过10cm×10 cm×20cm；物品不能超过干烤箱的2/3；油剂、粉剂的厚度要小于0.635cm；加热过程中不能随意开门，灭菌结束后也不能立即打开箱门，必须等温度自然下降到80℃以下方可开箱取物，否则玻璃器材可因骤冷而破裂。
4．高压蒸汽灭菌器 可用于培养基、生理盐水、废弃的培养物以及耐高压的药品、纱布、敷料、手术器械、隔离衣等的灭菌，是用途广、效果好的灭菌
器。高压蒸汽灭菌器的种类有手提式、直立式、卧式等多种，有人工控制和自动控制两种类型，它们的结构和灭菌原理基本相同。
5.高压蒸汽灭菌法 是微生物学实验、发酵工业生产以及外科手术器械等方面最常用的灭菌方法。一般培养基、玻璃器皿、水、无菌缓冲液、金属、橡皮用具、传染性标本等凡是耐高热和不怕潮湿的物品，均可采用此法灭菌。
使用高压蒸汽灭菌器前须加适量蒸馏水或去离子水，放入待灭菌物品后，将高压蒸汽灭菌器的盖子盖好并将螺旋拧紧。使用人工手动控制的高压蒸汽灭菌器，用电或煤气加热，待容器内压力升至0.35kgf/cm2（约0.03MPa）时打开排气阀，使容器内冷空气完全排出后再关闭。待容器内蒸汽压力上升至所需压力1.05 kgf/cm2（一般为0.1MPa）时开始计算时间，持续15～20min，即可达到灭菌的目的。
一般培养基用0.1MPa（相当于1.05 kgf/cm2）121.3℃15～30 min可达到彻底灭菌的目的。灭菌的温度及维持的时间随灭菌物品的性质和容量等具体情况而有所改变。如含糖培养基用0.06 MPa（0.59 kgf/cm2）112.6℃灭菌；如为盛于试管内的培养基，以0.1MPa，121.3℃，20min即可，而盛于大瓶内的培养基，最好以0.1MPa，121.3℃灭菌30min。
操作步骤：
（1）加水：先将灭菌桶取出，向外层锅内加入适当量的蒸馏水使水面与三脚架相平。注意切勿忘记加水，同时水量不可过少，以防烧干引起事故。
（2）放入物品：将要灭菌的已包装好的培养基、物品等装入内层锅中，并用牛皮纸盖好后放入高压蒸汽灭菌器中。
（3）加盖：关上器盖。旋紧螺旋时，先将每个螺旋旋转到一定程度（不要太紧），然后再旋紧相对的两个螺旋，以达到平衡旋紧，否则易造成漏气，达不到彻底灭菌的目的。
（4）加热、排放冷空气：通电加热，打开排气阀门，待锅内的冷空气完全排除（阀门冲出的全部是蒸汽时表示已完全排除冷空气）时关闭排气阀。也可先关闭排气阀门，当压力表指针升至0.35kgf/cm2时，打开排气阀门放气，降至零点，再关闭排气阀门。
（5）灭菌：继续加热，当压力表指针升至1.05 kgf/cm2时，蒸汽温度相当于
120～121℃，此时开始计算灭菌时间，控制热源，使处于1.05 kgf/cm2保持30 min后停止加温。
（6）降温及后处理：当压力表指针降到零后，打开排气阀，使锅内蒸汽排除，注意切勿在压力未归零时过早排气，否则会使锅内的培养基沸腾而冲脱或沾湿棉花塞。开盖取出灭菌物品。如需制备斜面培养基，应趁热将试管斜放在桌上，冷却后便可收起。如需配制固体培养基，应趁热倾注或将其放入60℃水浴箱中备用。
（7）灭菌后的物品，应标明灭菌日期、放入洁净区。
（8）无菌试验：抽取少数灭菌的培养基或其他物品置37℃恒温培养箱中培养24～48h。若无菌生长，即视为灭菌彻底。也可在灭菌前在物品包装上用变色胶带封口，观察颜色变化进行判断。若胶带上的淡黄色条带变成棕褐色或黑褐色，视为达到灭菌目的。
（9）注意事项
l）灭菌物品放置要避免过于拥挤，便于蒸汽流通和穿透。 2）使用高压蒸汽灭菌器前须加适量蒸馏水或去离子水。
3）高压灭菌后培养基pH下降0.2～0.3。另外，高压蒸汽灭菌过程会增加冷凝水，降低培养基中各成分的浓度。
4）手动灭菌时需密切注意控制热源，维持灭菌需要的压力和需要的时间。压力过高时不仅培养基的成分被破坏，而且高压蒸汽灭菌器超过耐压范围易发生爆炸，造成事故。
5）熟悉使用高压蒸汽灭菌的物品种类，切记不可将有挥发性、爆炸性的有机溶剂放入高压蒸汽灭菌器内。
6）对某些不耐高热培养基灭菌，温度过高常会对培养基造成不良影响：①天然培养基中的成分经加热后可沉淀出大分子多肽聚合物，培养基中Mg2+、Fe2+、Zn2+、Cu2+、Ca2+等阳离子与培养基中的可溶性磷酸盐共热沉淀；②营养成分破坏或改变，酸度较高时淀粉、蔗糖、乳糖或琼脂在灭菌过程中易水解：③pH7.5，0.1 MPa灭菌20min，葡萄糖破坏20%，麦芽糖破坏50％；④若培养基中有磷酸盐共存，葡萄糖转变成酮糖类物质，培养液由淡黄色变为红褐色，破坏更为严重；⑤pH7.2时培养基中葡萄糖、蛋白胨、磷酸盐在0.1MPa灭菌15min