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夹起滤纸片，靠在培养皿壁上，使多余的匀浆流尽。 2) 准备反应小室中的酶和pH缓冲液
将2片有酶的滤纸片小心放入反应小室的一侧内壁上，使滤纸片粘在内壁上。注意滤纸片不要碰到反应小室的瓶口。
让贴有滤纸片的反应小室侧壁在上面，小心加入pH为5.0的缓冲液2ml，然后加入2ml 3%过氧化氢溶液，切勿使上述混合液接触贴在内壁上的滤纸，将小室塞紧。
3) 将反应小室与收集气体的装置相连
将25ml量筒横放于盘中使之灌满水。若有气泡，将其轻轻倾斜，小心赶出气泡。将量筒倒立，使筒口一直处于水中。
小心将反应小室平放在盘中的水里，将量筒移至反应小室口上伸出的玻璃管上方。实验过程中要保证量筒的位置不动。 4) 进行反应，收集气体并记录结果。
将反应小室小心旋转180度，使过氧化氢溶液接触滤纸片。同时开始计时，分别在0.5min和1min时，读取量筒中水平面的刻度并做好记录。
3. 测量在pH6.0，pH7.0缓冲液，pH8.0缓冲液下过氧化氢在酶催化下产生的气体量。 反复冲洗小室后，再用相应缓冲液冲洗一遍，测量在pH6.0，pH7.0缓冲液，pH8.0缓冲液下过氧化氢在酶催化下产生的气体量，记录结果。 （二） 实验现象与结论
1. 缓冲液 收集到的 气体体积 0.5min 1min pH5.0 7 11 pH6.0 8 15 pH7.0 4 7 pH8.0 2 3 2. 结论：在本实验所研究的pH范围内，pH6.0为最适pH。 （三） 实验自变量、因变量
1. 自变量：pH值
2. 因变量：过氧化氢酶催化过氧化氢分解产生的气体量。 （四） 应用的实验原则
1. 科学原则。充分保证在开始反映前，酶与底物不接触，保证了收集到得气体体积量的准确。
2. 单因子变量原则。实验中仅有pH值一个自变量。 3. 对照原则。相互对照。 （五） 习题回答
1. 误差分析
1) 反应小室中的酶量不同。（吸附在滤纸上的酶的数量不同） 2) 摇晃反应小室时用力不一致。
3) 读数时水面晃动，视线未与凹液面最低处保持水平。
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4) pH值梯度相差较大，所得最适pH不准确。
2. 如果想得出不同的pH与酶活性的关系变化曲线，如何设计实验? 应减小pH梯度间隔。多测几组数据后绘制曲线。 3. 设计探究温度对酶活性影响的实验方案。 实验顺序 1 2 3 4 5 6 7 加入可溶性淀粉溶液 调节温度 控温时间 加入新鲜淀粉酶溶液 反应时间 加入碘液 观察现象 项目 试管 1号 2 ml 2号 2 ml 3号 2 ml 冰块 5 min 1 ml 5 min 1滴 溶液不变蓝 60度左右热水 100度沸水 5 min 1 ml 5 min 1滴 溶液变蓝 5 min 1 ml 5 min 1滴 溶液不变蓝 实验结论 酶在适宜的温度条件下，具有较高的催化能力；冰水中温度低，酶几乎不能发挥催化能力；高温下酶失去活性，失去催化能力。
九、 乙醇发酵演示实验
必修一，78页，第三章 第四节《细胞呼吸》
（一） 演示步骤
1. 取葡萄糖溶液与广口瓶中，置于35度水浴中预热。
2. 取干酵母3g，用30度水化开后，立即倒入预热过的广口瓶中，充分振荡，使葡萄糖与酵母混匀，混合液应占广口瓶容积的1/3左右。
3. 迅速向混合液表面滴加一薄层液体石蜡。用带玻璃导管的橡皮塞塞住广口瓶，让玻璃导管的另一端伸入到盛有氢氧化钙溶液的试管中，广口瓶置于30度水浴中。 （二） 实验现象与结论
1. 广口瓶内产生大量气泡，试管中出现白色浑浊。 打开广口瓶塞后，闻道浓烈酒香。
2. 结论：酵母菌在无氧条件下进行厌氧呼吸，产生乙醇和二氧化碳。 （三） 习题回答
1. 为什么要加入葡萄糖溶液并置于35℃水浴中加热？
葡萄糖可作为呼吸底物；提供环境温度，利于酵母菌进行细胞呼吸。 2. 为什么在广口瓶的混合液表面滴加一薄层液体石蜡？ 隔绝空气，使酵母菌进行厌氧呼吸。
十、 光合色素的分离与提取
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必修一，87页，第三章 第五节《光合作用》
（一） 实验目的
1. 学会提取和分离叶绿体中的色素的方法。 2. 分离叶绿体的4种色素，观察色素的颜色。 （二） 实验原理
1. 提取原理：叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂中，所以可以用乙醇（或丙酮）来提取这些色素。
2. 分离原理：层析液是由20份石油醚，2份丙酮，1份苯混合而成的，是脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得很快，溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。这样，几分钟以后，叶绿体的色素就在扩散过程中分散开来。 3. 药品使用作用
1) 二氧化硅：有利于充分研磨叶片；
2) 碳酸钙：细胞破坏后，细胞液溢出，其内的有机酸对叶绿体中的色素具有一定的破坏作用。加入少许碳酸钙可以防止色素被破坏。 4. 叶绿体中色素的种类：
橙黄色的胡萝卜素，黄色的叶黄素，蓝绿色的叶绿素a，黄绿色的叶绿素b。 （三） 实验材料
新鲜的绿叶（如菠菜叶片），干燥的定性滤纸，95%的乙醇，层析液，二氧化硅，碳酸钙，研钵，小玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，试管、胶塞，药匙，量筒，天平。 （四） 实验步骤
1. 提取叶绿体色素
1) 将5g绿叶剪碎，放入研钵，加入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入5 ml乙醇，迅速而充分地研磨成匀浆。
2) 把小漏斗基部垫一层尼龙布，将滤液匀浆用小漏斗过滤，得到浓绿色的提取液。将滤液收集到小试管中。及时用棉塞将试管口塞紧。 2. 制备滤纸条
用一张预先干燥过的定性滤纸剪成长10 cm，宽1cm的纸条，剪去两角，在距滤纸条一端1cm处用铅笔划一条细的横线。 3. 点样
用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔画的横线均匀地画出一条细而直的滤液细线。待干燥后再重复3~4次（可以使更多的色素沉积在细线位置。色深、细而齐的滤液细线可保证色素均匀地沿滤纸扩散，使不同色素带清晰、整齐）。 4. 分离叶绿体中的色素
1) 备好盛有少许层析液的烧杯或大试管。
2) 将滤纸纸条尖端朝下，插入层析液内（色素线一定要高于层析液），随后盖好盖
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（或塞）。
3) 层析液虽滤纸上升。伴随着层析液的上升，色素向上扩散，并逐渐分离。 4) 滤纸条干燥后，观察滤纸条上的色素带。 （五） 实验现象与结论
1. 按扩散速度从快到慢的顺序，在滤纸条上分离形成的色素带颜色依次是橙黄色、黄色、蓝绿、黄绿。（由上到下）
2. 结论：叶绿体中含有四种色素，它们分别是橙黄色的胡萝卜素，黄色的叶黄素，蓝绿色的叶绿素a，黄绿色的叶绿素b。 （六） 习题回答
1. 本实验的关键是什么？
光合色素都是脂溶性的，因此用丙酮这种有机溶剂作为提取液。丙酮易挥发且有一定毒性，因此提取过程要减少挥发、速度要快；
利用二氧化硅硬度极大的特点，其粉末可增加研磨时磨擦力，加快研磨的速度。叶绿素容易被酸破坏，需要保护，因此加入碳酸钙，中和溶液中的酸。 这些都是成功的关键。
十一、 观察细胞的有丝分裂
必修一，106页，第四章 第一节《细胞的增殖》
（一） 实验目的
1. 识别处于不同时期的动植物细胞。 2. 观察有丝分裂过程中染色体的变化。
3. 熟练掌握高倍镜的使用，掌握生物绘图的一般方法。 （二） 实验原理
有丝分裂理论知识（略）。 （三） 实验材料
光学显微镜，洋葱根尖细胞有丝分裂永久装片，马蛔虫受精卵有丝分裂永久装片。 （四） 实验步骤
1. 观察洋葱根尖细胞分生区细胞的有丝分裂。 2. 观察马蛔虫受精卵的有丝分裂。 （五） 实验现象与结论
1. 洋葱根尖分生区细胞（不能连续观察一个细胞的分裂过程）： 1) 伸长区：长方形纵向排列，无分裂细胞。 2) 分生区：正方形紧密排列，又分裂细胞。 3) 根冠：细胞排列不规则，基本无分裂细胞。 2. 马蛔虫受精卵 略 （六） 习题回答
1. 染色体在分裂过程中发生了什么变化？
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在分裂前期染色质变粗变短、螺旋化，形成染色体；在末期染色体伸展，重新成染色质状态。
2. 动物细胞与植物细胞有丝分裂过程的不同是：动物细胞的细胞质有中心体。分裂后期，中心体分别分布于细胞两极，通过纺锤丝牵引染色体向两极运动。
十二、 制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片
必修一，110页，第四章 第一节《细胞的增殖》
（一） 实验目的
1. 识别处于不同时期的植物细胞。 2. 观察有丝分裂过程中染色体的变化。
3. 练习制作洋葱根尖细胞有丝分裂临时装片的技术。 4. 熟练掌握高倍显微镜的使用。 （二） 实验原理
洋葱根尖细胞有丝分裂临时装片的制作方法：分为解离、漂洗、染色、制片四步。 1) 解离就是用解离液处理植物根尖，使根尖细胞彼此容易分离开。（盐酸使植物细胞之间的果胶质层松散。）
2) 漂洗的目的在于使细胞内的解离液充分扩散出来，以免影响对细胞的染色。 3) 染色选用龙胆紫（或醋酸洋红）等碱性染料，主要目的是把细胞中的染色体/染色质染成深色。
4) 制片的目的是通过按压使细胞彼此分散开不互相重叠，便于观察。 （三） 实验材料
光学显微镜，洋葱，质量分数为10%的盐酸，质量浓度为0.01g/ml的龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液），镊子，载玻片，盖玻片，培养皿2个。 （四） 实验步骤
1. 洋葱根尖的培养
洋葱根培养至1~5cm时便可以使用。此时根尖生长健壮，细胞分裂旺盛。 根尖分生区的长度一般为1.5~2mm，肉眼观察，此区域颜色较浅。 2. 制作临时装片 1) 解离
切取根尖2~3mm，放入解离液中，在室温下解离3~5min。之后用镊子轻轻夹一下根尖，感觉根尖变得酥软。 2) 漂洗
将解离后的根尖清水漂洗约10min。 3) 染色
用镊子取出漂洗后的洋葱根尖，放在载玻片上，用镊子轻轻压扁后，滴一滴0.01g/ml的龙胆紫溶液，染色1~2min。 4) 制片
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