潍坊医学院硕士学位论文
(1)对血液动力学影响：硝普钠直接作用于血管平滑肌引起动脉和静脉松
弛。动脉压、静脉压、肺动脉压随体、肺循环阻力下降而减低。从而减低了
心脏前、后负荷。心率正常人稍增加，高血压病人增加较多，心衰时不增加
或减少，后者因不增加心肌耗氧t对冠心病泵衰竭是很重要的。对心排血t主要决定于用药前血液动力学状态，在高血压无心衰时，心排血量常减低。而在
心衰时，心排血量常增加。
(2)对肾功能影响：硝普钠减低肾血管阻力而增加肾血流量。Page等研究
正常和肾性高血压狗中，硝普钠可使正常狗对氨马尿酸清除率比对照增加11
9%，而使肾性高血压狗则降低到对照的95%。Bostron和K-aloyamides观察到
当平均动脉压由134降到69mmHg时，伴随对氨马尿酸清除率，菊淀粉清除率
和钠排出下降。在心衰病人尿里、肌醉和钠排泄增加。
(3)对冠状动脉血流量影响：对冠状动脉有直接扩张作用。增加冠状动脉
血流里。改善心肌营养状态。同时由.于心肌需氧量减低，超过了由于动脉压
降低，冠脉灌注压减低，造成冠脉流量减低所造成的不良影响，不会引起心
肌缺血加重。同时证明它可以增加缺血心肌局部灌注，减低缺血心肌局部乳
酸产物，增加了缺血区侧枝循环，而不发生强力的窃血现象。
（四）讨论
1 硝普钠对人血管平滑肌细胞合成胶原的抑制作用
内皮素(ET-1)对人血管平滑肌细胞(HVSMC)合成胶原及硝普钠(SN
P)对HVSMC合成胶原的影响实验表明：加入梯度浓度SNP，NO水平呈剂
量依赖性增加(均P<0.01)；ET-1使胶原合成量增加80%(P<0.01)，加入
梯度浓度SNP较ET-1组胶原合成量分别减少了38%、42%、57%(均P<0.0
1)，呈剂量依赖性；ET-1+SNP低、中、高浓度组较ET-1组细胞内cGMP
含量明显增加(均P<0.01)，且cGMP含量随SNP增加而增加；细胞内cGM
P含量与胶原合成量呈良好负相关关系(r=-0.93)。结论.ET-1可引起HV
SMC合成胶原增多；SNP可剂量依赖地抑制HVSMC合成胶原；SNP对胶
原合成的抑制作用可能是通过cGMP途径起作用[1-3]。
硝普钠抑制血管平滑肌细胞合成胶原实验表明，培养液中ET-1组NO的含
量为(95.50±7.47)mmol/L。与ET-1组相比较，各不同浓度SNP组NO含量显
10
潍坊医学院硕士学位论文
著升高(与ET-1组相比，均P<0.01)，且NO含量随SNP剂量的增加而增加。
以3H-脯氨酸掺入量表示胶原含量，ET-1组胶原含量较C组显著增加了8
0%(P<0.001)。SNP低、中、高浓度组胶原含量较ET-1组显著减少，分别减
少了38%、42%、57%(与ET-1组相比，P<0.01)，表明SNP可抑制HVSMC合
成胶原，并呈剂量依赖性。SNP低、中、高浓度组cGMP含量较ET-1组显著
增加,分别增加了184%、354%、529%(与ET-1组相比，均P<0.001)，表明S
NP可引起cGMP含量增高，且cGMP含量随SNP剂量的增加而增加。细胞内
cGMP含量与HVSMC合成胶原量呈显著负相关，随细胞内cGMP含量增
加，HVSMC合成胶原量减少。相关系数(r)为-0.93(P<0.01)。
研究发现，动脉内皮损伤后，NO的产生显著减少。给予球囊损伤后再
狭窄动物添加补足NO供体Sin-1，结果发现，血管内膜增厚被抑制，甚至
趋于消退。最近还有报告，将内皮型NOS基因导入球囊损伤血管后的动物，损伤诱发的细胞生长及新内膜形成能够得到抑制，防止或减轻了再狭
窄的发生。进一步研究发现，内皮细胞与VSMC共同孵育时内皮细胞释放
的NO有抑制胶原合成的作用[4-6]。SNP通过释放NO能显著抑制细胞胶原合
成，SNP低、中、高浓度组与ET-1组相比3H-脯氨酸掺入量即胶原合成量下
降，分别下降了38%、42%、57%，呈剂量依赖性[7]。
目前，NO抑制细胞合成胶原的机制尚不清楚。cGMP在细胞内起重要
第二信使作用，参与血管舒缩、血管活性物质的自分泌和旁分泌、细胞增
殖、细胞表型等许多重要功能的调节。NO主要通过cGMP及非cGMP途径
而发挥其生物作用[8-10]。目前认为，cGMP有抑制细胞合成胶原的作用，作
为一个重要的信使分子，在调节再狭窄的形成过程中发挥着重要作用。体
外实验发现，在细胞培养液中加入8-Br-cGMP(cGMP的模拟物质)后，细胞
合成的胶原量明显下降。Chu也观察到同样现象，而且加入美甲蓝(cGMP
的拮抗物质)后，细胞合成的胶原量回升。细胞内cGMP含量与胶原合成量
之间有良好的线性关系，表明cGMP与胶原合成量有密切关系，提示SNP
抑制胶原的作用可能与cGMP途径有关[11]。
2 硝普钠抑制白介素-1诱导血管内皮细胞粘附分子-1的表达
作为内皮源性舒张因子的一氧化氮(NO)，通过降低血小板凝聚川、抑
制血管平滑肌增殖闭及迁移，减少白细胞对内皮细胞的粘附[12]。硝普钠在
体内作为一氧化氮的供体，对内皮细胞粘附分子VCAM-l的表达有较大影
11
潍坊医学院硕士学位论文
响[13]。一氧化氮抑制IL-1α诱发的内皮细胞粘附分子VCAM-1的基因表达
水平其作用呈浓度及时间依赖性。一氧化氮抑制内皮细胞粘附分子VCAM
-l的表达是其抑制单核一内皮细胞粘附及抗动脉粥样硬化的机制之一[14]。
此外，硝普钠抑制IL-1α诱导的内皮细胞VCAM-1mRNA的表达。
研究表明，作为一氧化氮供体的硝普钠显著抑制细胞因子诱导的内皮
细胞粘附分子VCAM-1的表达，其作用呈浓度及时间依耐性，在内皮细胞
粘附分子VCAM-1mRNA表达水平，硝普钠也表现为明显的抑制作用。近
年来的研究结果显示：在多种动脉粥样硬化危险因子直接或间接作用下，
在动动脉粥样硬化易发部位诱发前炎症因子（1L-1，TNF，INF，MCP等）
的分泌及释放，导致白细胞（特别是单核细胞与T淋巴细胞内膜下募集，进
而产生的一系列免疫，炎症反应时动脉粥样硬化发生的第一步。硝普钠作
为一氧化氮的供体，抑制1L-1α诱发的内皮细胞粘附分子VCAM-1的表达[1
5]
。同时，有研究显示[16-17]，硝普钠抑制平滑肌增殖及血小板聚集[18-19]。
分别以10-5、5×10-5、10-4mol/L浓度的硝普钠同1L-1α(10ng/mg)共同刺激
内皮细胞6h，其膜VCAM-1的表达经细胞ELISA检测其光密度值分别为0.78±
0.17，0.65±0.09，0.47±0.12，与单IL-lα刺激组(0.80±0.07)比较，硝普钠在5×1
0-5及10-4mol/L浓度，可显著抑制VCAM-1表达(P<0.01，n=12)。以IL-lα(l0ng
/mL)分别刺激2，6，12h，ELISA测定的光密度值为0.30±0.14，0.80±0.12，1.
00±0.17。同时加入SNP(10-4mo/L)，则ELISA测定光密度值为0.22±0.12，0.51
±0.15，0.56±0.08，硝普钠可明显抑制VCAM-l的表达(P<0.01，n=12)，并且随
与IL-lα共刺激时间的延长，其抑制作用也增强，上诉结果与通过流式细胞仪
测定所得出的结果一致。
3 硝普钠对血管平滑肌钙激活钾通道的影响
血管内皮细胞通过释放多种血管活性因子对血管平滑肌张力进行调
节，其中血管内皮释放因子(EDRF)的作用尤为重要。许多舒血管物质作用
于血管内皮细胞使其产生及释放EDRF，然后由EDRF介导血管平滑肌舒张
[20]
。
硝普钠对血管平滑肌钙激活钾通道的影响研究发现，在形成细胞贴附
模式后即给予电压箝制，选择箝制电压(HP)为0mV，检测电压(TP)为阶跃
脉冲0至60mV，每步递增10mV，共6步。阶跃脉冲波宽25，间隔15。以无
12
潍坊医学院硕士学位论文
通道活动的膜片作为对照，然后加硝普钠(SNP)1nmol/L于细胞浴池内，再
进行同样电压箝制，150s后通道被激活，8min后通道活动呈衰减趋势。随
检测电压的增高，SNP激活的KCa开放增加，但SHRspKca电流小于WKY。
SHRsP阻力血管平滑肌被SNP激活的KCa电流比WKY小，在检测电压为2
0、30、40、50、60mV时其电流幅值显著小于WKY(P<0.05，n=5)。根据电
流电压关系曲线可求出被SNP激活的KCa的斜率电导：SHRsP为5821±3.3pS
(x±s，n=6)，WKY为121.88±6.4pS（x±s，n=5)。SHRsp阻力血管平滑肌
被SNP激活的Kca的电导明显小于WKY。在形成细胞贴附模式后给予电压
籍制，按上述相同的实验程序，选择箝制电压(HP)为0mV，检测电压(TP)为阶跃脉冲0至60mV，每步递增10mV，共6步。以无通道活动的膜片作为
对照，然后加8-Br-cGMP10μmol/L于细胞浴池内，进行同样电压箝制，2m
in后可激活SHRsp及WKY阻力血管平滑肌KCa，通道活动持续到18min仍未
完全衰减。随检测电压的增高，cGMP激活的Kc.的开放增加。但SHRspKC
a的电流小于WKY。这一结果与SNP激活作用相似。依据被cGMP激活的S
HRsp及WKY阻力血管平滑肌KCa的电流一电压关系可得出被cGMP激活
的KCa的斜率电导：SHRsp为62±4.3pSWKY为124±7.2pS(n=5)。SNP的作用
成份NO可通过扩散进入平滑肌细胞内，激活鸟昔酸环化酶产生。GMP而发
挥作用。
血管平滑肌的收缩起始于细胞膜兴奋导致的胞内游离钙浓度([Ca2+]i)
增高。使[Ca2+]i增高的途径有多种，其中因膜电位去极化引起的电压依赖
性钙通道开放是主要途径。而膜电位直接受钾通道影响；钾通道开放可增
加K+外流，导致血管平滑肌细胞膜超极化，引起电压依赖性钙通道关闭，
减少胞外钙内流降低细胞内钙浓度，从而引起血管舒张。由于血管平滑肌
细胞膜主要存在着大电导的KCa，其密度可达15000/细胞，因此KCa在调节
血管的舒缩中起着重要作用[21-23]。据研究，血管内皮细胞与动脉中层之间
的功能偶联至少有三条通路：除了NO和前列环素外还有内皮超极化因子
(EDHF)途径。关于这些内皮释放因子对肠系膜动脉、脑阻力血管钾通道的
作用，Brayden和Murphy(1996)报告NO不影响兔的脑阻力血管平滑肌的膜
电位，但激活兔肠系膜动脉的远支(口径200-300μm，属于阻力血管)的AT
P敏感钾通道(KATP)，EDHF还激活肠系膜动脉的aPamin敏感的钾通道[24-2
13
潍坊医学院硕士学位论文
5]
。
郑永芳等[26]在研究SNP对KCa影响中，观察其电导等动力学特征符合
KCa的特性，在膜内向外(inside-out)模式下，SHPsp与WKY此段血管的平滑
肌KCa的启闭对胞内钙浓度呈明显的依赖性。胞内钙浓度接近零时，记录不
到KCa电流。应用相应的钾通道阻断剂可削弱与消除KCa电流。在此基础上，
发现同量的SNP作为外源性NO的来源均可激活SHRsp及WKY大鼠肠系膜
动脉阻力血管平滑肌KCa。并且，这一激活效应与cGMP的激活效应非常相
似。提示NO的激活效应是由cGMP介导的[27-29]。但是，不论是SNP/NO或c
GMP激活的SHRspKce的电导、通道开放电流等均小于正常血压对照WKY
大鼠。这种差异无疑表明高血压时内脏阻力血管平滑肌细胞KO对EDRF/N
O的反应性降低。这在血管内皮细胞与血管平滑肌的功能联系中，将使平
滑肌膜复极化与超极化不足，致使不能有效地关闭钙通道导致舒张减弱[30
-32]
。
综上所述，高血压时血管舒张减弱，血管张力持续增高，一方面有血
管内皮细胞释放的舒张因子EDRF/NO及其介导物。GMP的下降，同时也存
在着阻力血管平滑肌膜的离子通道Kca对舒张因子反应性的降低。两者的
作用自然促使外周阻力增高，导致血压升高[33-34]。如是，本实验结果已从
血管内皮释放因子与血管平滑肌钾通道的角度解释了高血压血管舒张不
良外周阻力升高的原因。由于内脏阻力血管在形成外周阻力中的重要性，
因此本实验的结果对于逐步阐明高血压发病的血管机制无疑具有重要意
义。
4 硝普钠对血小板聚集的抑制作用
硝普钠对血小板聚集有一定抑制作用，硝普钠对二磷酸腺苷(ADP)诱
聚途径、花生四烯酸诱聚途径、血小板活化因子诱聚途径均有抑制作用，
但其效能对不同诱聚剂是不同的[35-36]。PasquiAL[37]研究指出，当使用AD
P、胶原蛋白和花生四烯酸诱聚剂时，硝普钠对血小板聚集抑制的ED50分
别为：2μM（ADP）、2.5μM（花生四烯酸）和4.5μM（胶原蛋白）、0.3μ
M（硝普钠）硝普钠对血小板聚集的抑制呈剂量依赖方式。血小板在10-5
M肾上腺素的聚集反应中，硝普钠低浓度时（0.15μM·ml-1）时主要影响次
级聚集，高浓度时肾上腺素引起的聚集初级波消失，在4.5μMADP的聚集
14