福建正海海洋检测技术有限公司质量文件 主题： 检测作业指导书 文件编号：ZHJCZ-011-2008 第15页 共139页 第2版 第 0次修订 颁布日期：2008年7月30日 Az－总亚硝酸盐的吸光值；
Az（NO2-N）－水样中原有亚硝酸盐的吸光值。 5.稀释倍数
当水样吸光值超出工作曲线系列最高点吸光值时，要用蒸馏水对水样进行稀释，使稀释后水样吸光值位于工作曲线中部为宜，则稀释后水样浓度计算式如下：
Ｐ(NO3-N)=(An-a)/b
其中An=Az-（X/n）×A(NO2-N)×52/61 N为稀释倍数
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福建正海海洋检测技术有限公司质量文件 主题： 检测作业指导书 文件编号：ZHJCZ-011-2008 第16页 共139页 第2版 第 0次修订 颁布日期：2008年7月30日 亚硝酸盐检测作业指导书
1.试剂及其配制 1.1磺胺溶液：10g/L
称取5g磺胺（NH2SO2C6H4NH2）,溶于350mL盐酸溶液（1＋6），用水稀释至500mL, 盛于棕色试剂瓶中，有效期为2个月。
1.2盐酸萘乙二胺溶液：1g/L
称取0.5g盐酸萘乙二胺（C10H7NHCH2CH2NH2·2HCl）,溶于500mL水中，盛于棕色试剂瓶中于
1.3亚硝酸盐氮标准贮备溶液：100ug/mL-N
称取0.4926g亚硝酸钠（NaNO2）经110℃下烘干，溶于少量水中后全量移入1000mL量瓶中，加水至标线，混匀。加1mL三氯甲烷（CHCl3）,混匀。贮于棕色试剂瓶中于冰箱内保存，有效期为两个月。
1.4亚硝酸盐氮标准使用溶液：5.0ug/mL－N
移取5.00mL亚硝酸盐氮标准贮备溶液于100mL量瓶中，加水至标线，混匀。临用前配制。
2.绘制标准曲线
2.1取6个50mL具塞比色管，分别加入0，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50mL亚硝酸盐标准使用溶液加入至标线，混匀。标准系列各点的浓度分别为0，0.010，0.020，0.030，0.040，0.050mg/L。
2.2各加入1.0mL磺胺溶液（10g/L），混匀。放置5min。 2.3各加入1.0mL盐酸萘乙二胺溶液（1g/L）混匀。放置15min。
2.4选543nm波长，5cm测定池，以水作参比，测其吸光值Ai。其中零浓度为标准空白吸光值Ao。
以吸光值(Ai—Ao)为纵坐标，浓度（mg/L）为横坐标绘制标准曲线。 3.水样测定
3.1移取50.0mL已过滤的水样于具塞比色管中。
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福建正海海洋检测技术有限公司质量文件 主题： 检测作业指导书 文件编号：ZHJCZ-011-2008 第17页 共139页 第2版 第 0次修订 颁布日期：2008年7月30日 3.2参照绘制标准曲线2～3步骤测量水样的吸光值Aw。
3.3量取50.0mL二次去离子水，于具塞比色管中，参照上述绘制标准曲线2.～3步骤测量分析空白吸光值Ab。
4.数据计算
将测得数据记入记录表中，按下列公式计算An。 An=Aw-Ab
由An值查工作曲线或按下式计算水样中亚硝酸盐氮的浓度。
An?ab P（NO2—N）=
式中：p（NO2－N）—水样中亚硝酸盐氮的浓度，mg/L； An—水样中亚硝酸盐氮的吸光值； a—标准曲线中的截距； b—标准曲线中的斜率。
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福建正海海洋检测技术有限公司质量文件 主题： 检测作业指导书 文件编号：ZHJCZ-011-2008 第18页 共139页 第2版 第 0次修订 颁布日期：2008年7月30日 硝酸盐检测作业指导书
1.试剂及其配制
1.1人工海水（盐度为31.0）
称取27.6g氯化钠和8.86g硫酸镁，用少量蒸馏水溶解后，稀释至1000ml，贮于聚乙烯瓶中；或称取31.0g氯化钠（最好用优级纯），用少量蒸馏水溶解后，稀释至1000ml，贮于聚乙烯瓶中。
1.2氯化镉溶液（20g/l）
称取2.0g氯化镉置于100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至标线。 1.3磺胺溶液（10g/l）
称取5.0g磺胺溶于350ml盐酸（1+6）中，用蒸馏水稀释至500ml,贮于棕色试剂瓶中，有效期2个月。
1.4盐酸萘乙二胺溶液
称取0.5g盐酸萘乙二胺，用少量蒸馏水溶解后，稀释至500ml，贮于棕色试剂瓶中，有效期1个月，低温保存(如出现棕色应重配。
1.5锌卷
将锌片裁成5.0×6.0cm的小块，卷成内径约1.5cm的锌卷。锌片表面须光洁明亮；已被腐蚀的锌片
不得使用；锌片剪裁前必须用纱布仔细擦净表面；边角毛刺及残缺部位应弃去不用。 注意：废弃和用后的锌片要保存好以便集中处理，不得随意丢弃。 1.6标准贮备液
称取1.011g硝酸钾（预先在110℃烘1h，置于干燥器中冷却至室温）用少量蒸馏水溶解后，转移至1000ml容量瓶中，稀释至标线，加1.0ml三氯甲烷，混匀，浓度为140.0mg/L，有效期半年。
1.7标准使用液
吸取1.0ml标准贮备液于100ml容量瓶中，稀释至标线，混匀，浓度1.40mg/L。 或引用国家海洋局第二海洋研究所提供的硝酸盐标准溶液：100.0mg/L-N。
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福建正海海洋检测技术有限公司质量文件 主题： 检测作业指导书 文件编号：ZHJCZ-011-2008 第19页 共139页 第2版 第 0次修订 颁布日期：2008年7月30日 2.绘制工作曲线
2.1在国家海洋局第二海洋研究所制配的硝酸盐标准溶液浓度分别为0.00，2.50，5.00，10.0，15.0umol/L(0.000，0.035，0.070，0.140，0.210mg/L)中放入1个锌卷（5×6cm2），加入1.0ml氯化镉溶液，迅速放在振荡器上，准确振荡10分钟（秒表计时），振荡后迅速将瓶中锌卷取出。
2.2各加入1ml磺胺溶液（10g/L），混匀，放置5分钟。
2.3各加入1ml盐酸萘乙二胺溶液，混匀，放置15分钟，颜色可稳定4小时。 2.4选543nm波长，2cm比色皿，以人工海水作参比，测定吸光值Ai。其中零浓度为标注空白吸光值A0。
2.5以吸光值（Ai- A0）为纵坐标，浓度为横坐标绘制工作曲线，写出回归方程。 3.水样测定
3.1量取50ml水样2份于具塞广口瓶中，按上述绘制工作曲线2～5测定水样吸光值Aw。如果水样盐度低于25，测定时必须往每份水样中加入0.8g一级NaC1,以消除盐效应影响。
3.2量取50ml人工海水2份于具塞广口瓶中，按上述绘制工作曲线2～5测定水样吸光值Ab。
4.数据计算 按下列公式计算
ρ(NO3-N)=(An-a)/b 其中An=Az-XA(NO2-N)
ρ(NO3-N)－水样中硝酸的浓度mg/L； An－水样中硝酸盐的吸光值；
X－硝酸和亚硝酸盐测定时，所用测定池的长度比； Az－总亚硝酸盐的吸光值；
Az（NO2-N）－水样中原有亚硝酸盐的吸光值。 5.稀释倍数
当水样吸光值超出工作曲线系列最高点吸光值时，要用人工海水对水样进行稀释，使稀释后水样吸
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