浏阳市人民医院 医学检验中心 痰涂片镜检及痰培养 实验室质量保证手册 文件编号：lryj-jh-01 生效日期：2012.04.01 版本号：1.0 第 29 页 共 32 页
【标本接种】
用无菌滴管取消化处理后的标本接种于两管酸性罗氏培养基斜面， 每管0.1ml,并使标本与斜面充分接触。接种后, 拧紧培养瓶盖或塞紧试管胶塞, 37% 平卧放置斜面24h后, 直立放置,37% 继续培养。这一步骤的关键在于必须严格无菌操作,接种量一定要足量, 且要保证培养温度的恒定。
【标本培养】：接种标本的培养基于37℃恒温箱培养，培养第3天、第7天各观察一次细菌生长情况,此后每周观察一次,培养阳性随时报告结果。若7d内发现菌落生长,并经抗酸染色证实为抗酸杆菌, 可报告快速生长分支杆菌。一周后菌落生长, 且抗酸染色阳性,可报告分支杆菌生长,若培养满8周仍未见菌落生长, 报告分支杆菌培养阴性。
【结果报告】： 1结果报告
1.1阳性：结核分支杆菌菌落一般于第二周开始生长，菌落微黄，干燥；非结核分支杆菌菌落因菌种不同而异。菌落经涂片抗酸染色确认。 1.2阴性：至第八周无菌落生长。
1.3污染：培养基液化或其他杂菌生长。 2报告方式
2.1无分支杆菌生长：至第八周无菌落生长 2.2有分支杆菌生长： 1+，菌落占斜面1/4 2+，菌落占斜面1/2
浏阳市人民医院 医学检验中心 痰涂片镜检及痰培养 实验室质量保证手册 文件编号：lryj-jh-01 生效日期：2012.04.01 版本号：1.0 第 30 页 共 32 页 3+，菌落占斜面3/4 4+，菌落满斜面 2.3污染：培养基液化或其它杂菌生长
【注意事项】：
1. 培养基一定要在有效期内使用。
2. 标本瓶一定要灭菌，所有操作要遵守无菌操作规程。
3. 严格遵守标本处理时间，防止过处理和消化不足。标本过多时要分批处理。
4. 配制的培养基一定要做无菌试验。 5. 阳性结果要涂片镜检确认。 6. 每天观察记录恒温箱的温度。 7. 污染率控制在2%-5%。
8. 每批处理标本的数量不超过8个。