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诊断立克次体病，称外斐反应（Weil-Felix test）。
⑸ MIU试验：即动力、吲哚、脲酶试验的合称。主要用于肠杆菌科细菌的鉴别，如大肠埃希菌MIU为+ + - 。
2、肠杆菌科细菌在SS琼脂平板上的菌落特征。 肠道非致病菌：红色菌落，如大肠杆菌等。
肠道致病菌：无色菌落。如伤寒杆菌、痢疾杆菌、变形杆菌等 乳糖发酵试验：初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌 【附】肠道选择性培养基
☆SS平板：含乳糖、中性红指示剂、胆 盐、煌绿、硫代硫酸钠等 ☆麦康凯（Mac）平板：含乳糖、中性红指示剂、胆盐等
☆中国蓝平板：含乳糖、中国蓝和玫瑰红酸指示剂。大肠杆菌形成紫黑色带金属光泽菌落 ☆EMB平板：含乳糖、伊红和美蓝指示剂 选择性培养基的特点：
均含有乳糖和酸碱指示剂：
细菌分解乳糖产酸，使培养基pH降低，指示剂呈酸性变色，指示剂不同，菌落呈现不
同的颜色。分解乳糖的细菌呈有色菌落，不分解乳糖的细菌为无色菌落 含有不同的抑制剂：
对革兰阳性菌和非致病菌有不同程度的抑制作用，因此可以选择性的培养肠道致病菌。
3、大肠埃希菌所致的疾病的种类由于哪些？简述致腹泻大肠埃希菌的种类以及主要的临床
意义。EHEC主要血清型以及引起的病种是什么？ 大肠埃希菌所致的疾病的种类有：
⑴ 肠外感染：以化脓性炎症多见。如：尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎、腹膜炎、阑尾炎、手术创口感染、新生儿败血症与脑膜炎。（条件致病，细菌居住部位改变引起的肠外感染以化脓性感染和尿路感染最为常见。）尿路感染还需尿菌落计数：＞10万／ml尿液有诊断意义，采用倾注平板法进行计数。 ⑵ 肠道感染：腹泻。
引起腹泻大肠埃希菌的种类及其所致疾病 （1）肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）：是婴幼儿和旅游者腹泻的重要病原菌（霍乱样腹泻）（2）肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）：主要引起儿童和成人菌痢样腹泻。 （3）肠致病型大肠埃希菌（EPEC）：是婴幼儿腹泻的主要病原体，严重者致死。 （4）肠出血型大肠埃希菌（EHEC）：为出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的病原体。 （5）肠集聚型大肠埃希菌（EAEC）：可引起婴儿持续性腹泻、脱水、血便。
肠出血型大肠埃希菌(EHEC)主要血清型是0157 ：H7，可引起出血性结肠炎、溶血性尿毒综合征（HUS）。
EHEC的鉴定：
生化反应符合大肠杆菌：在肠道选择平板上为发酵乳糖的有色菌落；在KIA上多为＋＋＋－；IMViC为＋＋－－；尿酶试验－。 血清学分型：有50多个型，代表为O157:H7
O157:H7则需接种在山梨醇麦康凯琼脂（SMAC）平板上，35℃培养18~24h后可见红色中等大小菌落。再与O157血清做胶乳凝集试验。
凡山梨醇阴性的大肠埃希菌0157：H7分离株无须再做毒素的检测，因为均产生Vero毒素。
目前，美国CDC已将0157：H7血清型列为实验室常规检测项目。
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4、志贺菌属和沙门菌属的主要致病物质、主要临床特征与临床常见病种。 志贺菌属
致病物质：菌毛；内毒素；志贺毒素。
所致疾病：经肠道传染，引起细菌性痢疾，有3种临床类型，即急性菌痢、慢性菌痢、中毒性菌痢。
主要临床特征：发热；脓血粘液便；腹痛、里急后重；甚至神志障碍，中毒性休克。 沙门菌属
致病物质：菌毛、耐酸应答基因、Vi抗原、内毒素、肠毒素。 所致疾病：肠热症（Enteric fever/typhoid fever）：伤寒和副伤寒；肠炎型即食物中毒；败血症；带菌者。
主要临床特征：伤寒??持续高热、相对缓脉、肝脾肿大、玫瑰疹、外周血白细胞数下降。
5、细菌性痢疾与肠热症的标本如何采集？请简述志贺菌的检验方法与鉴定依据。
细菌性痢疾标本采集：粪便或肛拭子；新鲜脓血黏液便；立即送检或床边接种；保存于30％甘油盐水或卡-布培养基。在治疗前采集粘液脓血便作床边接种，不能及时接种可置甘油缓冲盐水中送检。
肠热症的标本采集：发病第1周：血液；发病第2周起：粪便；发病第3周起：粪便、尿液；肠热症全程：骨髓。 检验方法：
1. 将待检标本接种肠道选择平板，35℃培养18～24小时。
2. 若标本含菌量少，可先增菌（GN增菌液）4～6小时再分离培养。 3. 挑取无色半透明菌落，进行初步生化反应鉴定。
挑取可疑菌落接种KIA、MIU培养基
若符合KIA：KA－－；MIU：－ －/＋ －， 再作志贺菌多价诊断血清玻片凝集试验 4. 符合志贺菌生化反应特征可进行血清学鉴定
5. 血清学鉴定先用志贺氏多价诊断血清作玻片凝集试验，若凝集再用A、B、C、D群诊
断血清鉴定到种、型。
6. 血清学鉴定需注意K抗原的阻断作用，并应考虑是否为EIEC。
若出现生化反应符合，血清学不凝集现象，应考虑K抗原的阻断作用，可将菌液加热100℃15～30min后，重复凝集试验，仍不凝集可考虑EIEC，需进行鉴别。
志贺菌鉴定依据：
肠道选择平板上无色半透明菌落 KIA：K A － － MIU：－ －/＋ －
与志贺菌多价诊断血清和各群血清凝集
注意与EIEC、类志贺邻单胞菌、动力不明显的沙门菌鉴别 志贺菌鉴别：
与EIEC鉴别：醋酸盐、葡萄糖铵利用试验和黏质酸盐产酸试验，EIEC均阳性，志贺菌均阴性。
与伤寒沙门菌鉴别：因两菌在KIA上极其相似，可用动力、H2S和因子血清O9相鉴别。
6、简述EIEC与志贺菌的异同点。
两者都是革兰阴性杆菌，生化反应特点相似：发酵葡萄糖产酸不产气、不发酵或迟缓发
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酵乳糖、多数菌株动力阴性、赖氨酸脱羧酶阴性。
与志贺菌的鉴别试验：醋酸盐、葡萄糖铵利用试验和黏质酸盐产酸试验，EIEC均阳性，志贺菌均阴性。
EIEC常见的血清型：O152、O124
7、肥达试验的结果如何分析？
⑴ 正常抗体水平：人们因沙门菌隐性感染或预防接种，血清中可含有一定量的有关抗体，其效价随地区而有差异。一般是O抗体（TO）凝集效价≥1：80，伤寒沙门菌H（TH）凝集效价≥1：160，引起副伤寒的沙门菌H（PA/PB/PC）凝集价≥1：80时才有诊断价值。
⑵ 动态观察：有时单次效价增高不能定论，可在病程中逐周复查。若效价逐次递增或恢复期效价比初期≥4倍才有意义。 ⑶ O与H抗体在诊断上的意义： 结果 O抗体高，H抗体高 O抗体不高，H抗体不高 意义 伤寒患者；近期接种伤寒疫苗 ① 未接触过伤寒抗原（未感染或接种）； ② 检测时间过早，O抗体还未产生； ③ 机体免疫机能缺失或低下 ① 感染史或接种史； ② 非特异性回忆反应 ① 伤寒感染或接种早期； ② 与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他 沙门菌（如肠炎沙门菌）感染。 O抗体不高，H抗体高 O抗体高，H抗体不高 ⑷ 肥达试验阴性原因： ① 发病早期曾用大量或多种抗生素治疗； ② 患者免疫功能低下。故本试验阴性时，不宜匆忙地否定临床诊断。
8、肺炎克雷伯菌初次分离时菌落有何特点？
兼性厌氧，营养要求不高，在初次分离培养基上形成较大、凸起灰白色的粘液型菌落，菌落大而厚实、光亮，相邻菌落易发生融合，用接种针沾取时可挑出长丝状细丝。在MAC培养基上发酵乳糖产酸，形成较大的黏液型、红色的菌落，红色可扩散至菌落周围的培养中。
形态结构：G-杆菌，无鞭毛、无芽胞, 有菌毛，有明显的荚膜。 基本生化反应特征：
具有肠杆菌科生化共性（葡萄糖 +、H2O2 +、氧化酶 -） 葡萄糖酸盐 +、苯丙氨酸脱氨酶 – KIA：AA + - IMViC：- - + + 脲酶：＋
血清学鉴定：荚膜肿胀试验
9、简述变形杆菌的鉴定依据有哪些？
变形杆菌属是一群动力活泼、H2S、苯丙氨酸脱氨酶和脲酶均阳性的细菌。广泛存在于
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自然界和动物、人体肠道中。包括普通变形杆菌、奇异变形杆菌、产粘变形杆菌、潘氏变形杆菌4种。
革兰阴性杆菌，高度多形态性；氧化酶－、触酶＋、硝酸盐还原＋
在普通平板和血平板上迁徙生长，在肠道选择培养基上乳糖不发酵呈无色菌落。 苯丙氨酸脱氨酶（Phe）＋、葡萄糖酸盐利用－ 脲酶试验＋（迅速分解尿素） KIA：KA＋＋
MIU：＋ -/＋ ＋ 即：普通变形杆菌：+ + + 奇异变形杆菌：+ - + IMViC：-/+ + - -
变形杆菌的主要鉴定依据是：
变形杆菌在营养琼脂和血琼脂平板上迁徙生长，在肠道选择培养基上乳糖不发酵，呈无色菌落，在SS琼脂上产H2S，菌落中心呈黑色。氧化酶阴性，迅速分解尿素（脲酶阳性），苯丙氨酸脱氨酶阳性，KIA为KA + +，IMViC -/+ + - -，可初步鉴定为变形杆菌。普通变形杆菌与奇异变形杆菌的区别为前者吲哚阳性，鸟氨酸阴性，后者与之相反。与普罗菲登斯菌属和摩根菌属的鉴别点是迁徙生长和H2S试验阳性，而后两者为阴性。 10、简述肠杆菌科细菌的分离鉴定的一般程序。
IMViC U 动力 大肠杆菌 + + - - - + 肺炎杆菌 - - + + + - 动力试验 红色菌落 大肠杆菌 生化反应 粪便 中段尿液 肛拭子 血液 胆汁培养 骨髓 基（增菌） 肺炎杆菌 鉴别培养基 如SS平板 涂片革兰染色镜检…G-杆菌 无色菌落 痢疾杆菌 伤寒杆菌 变形杆菌 玻片凝集反应确定
菌种和菌型 克氏双糖铁（KIA） 初步鉴定 玻片凝集反应确定菌种和菌型
生化反应 MIU
11、伤寒沙门菌与痢疾志贺菌如何进行分离鉴定？
标本（粪便）接种于肠道鉴别培养基如SS选择培养基。37℃培养24h后，挑取无色半透明的乳糖不发酵菌落接种至双糖铁培养基。伤寒沙门菌与痢疾志贺菌均不发酵乳糖，发酵葡萄糖产酸不产气，但痢疾志贺菌没有鞭毛，无动力而伤寒沙门菌则有，再用伤寒沙门菌与痢疾志贺菌的抗血清作玻片凝集试验予以鉴定。
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凡临床分离菌乳糖发酵、吲哚阳性，或脲酶阳性者，均不考虑为沙门菌。 沙门菌血清学鉴定：
首先用A-F多价O诊断血清进行初步鉴定；
再用O因子血清鉴定到群（A、B、C、D、E、F群）； 再用H因子第2相血清辅助鉴定型；
若生化反应符合沙门菌，A-F诊断血清不凝集，应考虑是否有Vi抗原，将待检菌液加热后，再进行A-F多价O血清凝集试验。 沙门菌鉴定依据
沙门菌鉴定主要依靠生化反应和血清学诊断 肠道选择平板上无色半透明菌落 KIA：K A +/- +/- MIU：＋ － －
与A-F多价O诊断血清和相应O因子血清、H因子血清凝集
注意Vi抗原的存在；注意抗原结构相同的菌株，应加做生化反应进行鉴别
12、列出伤寒沙门菌及志贺菌在KIA和MIU（动力-吲哚-尿素）的基本生化反应。 区别 志贺菌 伤寒沙门菌 副伤寒沙门菌 变形杆菌 KIA KA - - KA - +/- KA + + KA++ MIU - -/+ - + - - + - - + + +
13、简述大肠埃希菌的生化特性。
氧化酶试验（－）
分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖等（个别菌株迟分解乳糖或不分解乳糖） KIA：AA＋－ MIU：＋＋－ IMViC：＋＋－－
14、对怀疑为细菌性痢疾的患者进行病原菌检查时，通常应采取哪些实验步骤？
⑴ 取粪便标本接种到SS平板上进行分离培养：挑取无色菌落进行生化反应与鉴定。 ⑵ 生化反应：IMViC、动力等
⑶ 血清学试验：利用单价或多价痢疾杆菌免疫诊断血清进行菌群鉴定（玻片凝集试验、SPA协同凝集试验、荧光菌球法等）。
15、填空题
肠道非致病菌除变形杆菌属外，均分解乳糖产酸；而致病菌均不发酵乳糖。据此设计了选择性培养基如 、 、 、 等，作为分离肠道致病菌常用培养基；用 、 复合培养基作为测定肠道杆菌生化反应的基本培养基。肠杆菌科定科试验主要项目为 、 、 、 。其中基本 可将肠杆菌科与其他科常见的G-杆菌区别开来。细菌生化反应是传统鉴定肠道杆菌的主要依据。 SS，EMB，MAC，中国兰培养基；KIA，MIU；革兰阴性杆菌，触酶阳性，氧化酶阴性，硝酸盐还原试验阳性。 16、简述小肠结肠炎耶尔森菌的主要特性。 形态染色：革兰阴性球杆菌；25℃有周鞭毛，37℃则无动力；无芽孢，无荚膜
培养特性：兼性厌氧，营养要求不高，4～40℃均能生长，最适温度20～28℃；在肠道选择平板（如MAC）和NYE（新耶尔森菌选择性琼脂）呈无色、半透明、扁平较小的不发酵乳
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