－—一 ．２０ （９ 卜 ｏ．３０ １００ ２００ ３００ ４００ ５００ Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ／。Ｃ图２．７不同ＯＳＡ含量的乳胶膜的ＤＴＧ曲线图 ２．３．６乳胶膜的室内土埋降解过程 １Ｏ ＾９６ ８ ６ ４ ｖ瓣水转删峰２ ０ Ｏ ５１Ｏ １５ ２０ ２５ ３０ ３５ 土埋时间（天）图２．８不同用量的ＯＳＡ（醛基含量为１．１ ｍｍｏｌ／ｇ）乳胶膜在３５天内的质量损 失率 通过测量土埋后乳胶膜片的质量损失率评价了乳胶膜在土壤中的降解情况。 占乳胶固含量分别为０，０．１６７ｗｔ％，０．３３ ｗｔ％和１．６７ ｗｅ?，６的ＯＳＡ（醛基含量为１．１ ｍｍｏｌ／ｇ）乳胶膜在土埋３５天内的质量损失率如图２．８所示。从乳胶膜土埋３５天 内的质量损失率看出，随着土埋时间的延长，乳胶膜的质量损失率增大。不同 ＯＳＡ含量的乳胶膜在土埋起始的１５天内质量下降程度没有明显的差别，但１５ 天以后，ＯＳＡ含量越高，乳胶膜的质量损失率越大，显示出了ＯＳＡ含量对乳胶 膜质量损失的影响。至２５天后，未加ＯＳＡ的乳胶膜的质量损失率保持在５％左右，而加入ＯＳＡ的乳胶膜的质量损失率均超过５％，且随着土埋时问的延长， 其质量损失率继续增大。当土埋时间至３５天时，含１．６７ ｗｔ％ＯＳＡ的乳胶膜质量 损失率达到９．４４％，所损失的质量超过天然乳胶中非橡胶物质的固含量（如表２．１ 所示）。 在土埋降解试验中，将膜样从土壤取出时，可观察Ｎ－＊Ｌ胶膜样上有霉菌附着； ３ｌ 将这牡乳胶膜样千操后，霉菌生长的地方颜色变深。不同ＯＳＡ含量的乳胶膜在 ３５犬时的降解效果如２．９（曲所示。ＯＳＡ古量越高，乳胶膜表面孔穴越多，乳胶 膝样颜色越探。即降解过程中膜样上的霉菌越多。含１ ６７％ＯＳＡ的乳胶膜在不 同土埋时『日ｊ的降解效果如图２．９（ｂ）所示。随着土埋时问的延长，乳胶膜片上孔穴 增加，霉萤生长越致密。结合斟２ ８中的不同乳胶膜的质量损臾率可知．乳胶膜 的质量损失是弓霉菌的生长相关的。 『ｌ ｃｏｎｔｒｏｌ羽 ０．１６７％ＯＮ、 Ｌ譬ｐ； ｂ １５ｄａ）? ２０ｄａｙ１ ２５ｄａｙ ３５ｄａ） 图２．９不同用量的ＯＳＡ（醛基含量为ｌ ｍｍｏｌ，ｇ）乳胶膜在３５天内的降解效 粜（ａ）及刖试样在不同时叫的降解效果（ｂ） 依据表２ ｌ所水的乳胶的组成玎知。天然乳胶膜中的非橡胶纽分约为５％ 且它们比橡胶组分更易于发生降解。从土埋３５天后天然乳胶膜的质量损失率接 近５％（图２．８）可知，在土埋过程中发生降解的应为天然
乳胶中的非橡胶成分。对于含有ＯＳＡ的乳胶膜而言，在土埋２５天后它们的质量损失率均超过５％，且 最高可达９．４４％。这说明随着土埋时间的延长，含有ＯＳＡ的乳胶膜中的橡胶成 分也开始发生分解。即ＯＳＡ的加入对于乳胶膜的降解有促进作用。这是因为海 藻酸钠是一种具有良好的生物相容性的天然聚多糖，很容易被微生物所降解〔２３】。 在乳胶膜中加入ＯＳＡ以后，由于ＯＳＡ的存在有利于土壤中微生物的生长及聚集， 这些微生物可能会促进乳胶膜的降解【２５１。由于ＯＳＡ在乳胶膜中分布均匀（见 ２．３．２），因此，随着土埋时间的延长，在ＯＳＡ和乳胶膜逐渐降解过程中会形成大 量孔穴。这会增加乳胶膜降解过程中生长的霉菌与乳胶膜的有效接触，从而促进 含有ＯＳＡ的乳胶膜的降解。
２．４ 本章小结
本研究制备了氧化海藻酸钠、氧化透明质酸及氧化羧甲基纤维素三种多糖衍 生物，考察了它们对乳胶蛋白质的固定效果及对乳胶膜降解性能的影响。研究结 果表明在天然胶乳中添加极少量的这三种天然多糖衍生物即可有效地固定天然 胶乳中的蛋白质，而且对乳胶膜的力学性能没有明显的影响，尤其是氧化羧甲基 纤维素效果最佳。考马斯亮蓝的染色结果表明，氧化海藻酸钠改善了蛋白质在乳 胶膜中的分布，使其分布更为均匀，从而有效地将蛋白质固定在乳胶膜的内部。 同时，ＯＳＡ对乳胶膜的生物降解还具有一定的促进作用，可以在一定程度上促 进乳胶膜的降解。研究结果表明，用氧化多糖固定蛋白质在解决乳胶膜中蛋白质 过敏问题具有非常实际的应用价值。
３５ 第三章 结论
本研究合成了一种温度敏感的Ｂ一环糊精衍生物１３－ＣＤ．ＰＮＩＰＡ，探讨了 １３－ＣＤ—ＰＮ口Ａ对变形溶菌酶的复性作用，同时合成了三种天然多糖衍生物氧化海 藻酸钠（ＯＳＡ）、氧化透明质酸（ＯＨＡ）和氧化羧甲基纤维素（ＯＣＭＣ），并探 讨了这三种天然多糖衍生物对天然胶乳中的蛋白质的固定作用及对乳胶膜降解过程的影响。
主要结论如下： （１）〕３－ＣＤ．ＰＮＩＰＡ及其合成中间产物ＥＤＡ．Ｂ．ＣＤ和ＰＮＩＰＡ．ＣＯＯＨ对尿素变性 溶菌酶的复性过程均有促进
作用，然而Ｄ—ＣＤ．ＰＮＩＰＡ对盐酸胍变性溶菌酶的复性 过程却具有抑制作用，不能用于辅助经盐酸胍变性的溶菌酶的复性；１３－ＣＤ．ＰＮＩＰＡ 结构单元中的Ｄ．ＣＤ疏水性空腔及ＰＮＩＰＡ链段具有协同作用，荧光光谱的研究结 果证实了这一结论。１３－ＣＤ—ＰＮＩＰＡ单独用于辅助尿素变性溶菌酶复性时，其浓度对溶菌酶的复性效果有一定的影响，当溶菌酶的最终浓度为ｌｍｇ／ｍＬ时， ｐ．ＣＤ．ＰＮＩＰＡ的浓度控制在０．４ｍｇ／ｍＬ时溶菌酶的复性效果最好；而复性温度应当控制在其ＬＣＳＴ以下。１３－ＣＤ．ＰＮＩＰＡ与ＣＴＡＢ联合用于辅助溶菌酶的复性时， ＩＢ－ＣＤ．ＰＮＩＰＡ应在ＣＴＡＢ作用一段时间后（约１２ｈ）再加入到复性体系；１３－ＣＤ．ＰＮＩＰＡ具有的温敏相变功能可实现Ｂ—ＣＤ—ＰＮＩＰＡ的循环使用。
（２）在天然胶乳中添加极少量的这三种天然多糖衍生物即可有效地固定天 然胶乳中的蛋白质，而且对乳胶膜的力学性能没有明显的影响。相对于天然乳胶 膜中蛋白质主要分布于乳胶膜的上层表面，添加了氧化海藻酸钠的乳胶膜中蛋白 质的分布更为均匀。氧化海藻酸钠对乳胶膜的生物降解还具有一定的促进作用， 可以在一定程度上促进乳胶膜的降解。研究结果表明，用氧化多糖固定蛋白质在 解决乳胶膜蛋白质过敏问题具有非常实际的应用价值。
附件 一、个人简历陈继平，男，１９６９年５月出生，博士，助理研究员。２００１年毕业于四川师 范大学化学学院，获硕士学位；２００７年毕业于四川大学皮革化学工程系，获博 士学位。２００７年进入中山大学从事博士后研究工作。主要研究方向为天然高分子功能化改性及其在蛋白质复性、乳胶蛋白固定方面的研究。作为主要成员承担 多项国家和省部级课题，申请专利ｌ项，以第一作者发表论文１ｌ篇，其中在Ｊｏｕｒｎａｌｏｆ ｔｈｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｌｅａｔｈｅｒ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｓｔｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ，Ｊｏｕｍａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｌｅａｔｈｅｒ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ等国际学术刊物 上发表ＳＣＩ、Ｅｌ、ＩＳＴＰ收录学术论文７篇。 二、在站期间以第一作者发表的论文及专利１．Ｊｉｐｉｎｇ Ｃｈｅｎ，Ｙｉｎｇ Ｇｏｎｇ，Ｑｉｓｏｎｇ Ｌｉｕ，Ｌｉｍｉｎｇ Ｚｈａｎｇ，Ｔｈｅ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ－
ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ １３－ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｒｉｎ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ｉｎ ｌｙｓｏｚｙｍｅ ｒｅｆｏｌｄｉｎｇ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｓｃｉｅｎｃｅ．（ｉｎ ｐｒｅｓｓ）２．Ｊｉｐｉｎｇ Ｃｈｅｎ，Ｙｉｎｇ Ｇｏｎｇ，Ｑｉｓｏｎｇ Ｌｉｕ，Ｌｉｍｉｎｇ Ｚｈａｎｇ，Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ ｓｏｄｉｕｍ ａｌｇｉｎａｔｅ ｉｎ ｔｈｅ ｌａｔｅｘ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｌａｔｅｘ ｆｉｌｍｓ，Ｃａｒｂｏｎｈｙｄｒａｔｅ Ｐｏｌｙｍｅｒ．（ｉｎ ｒｅｖｉｅｗ） ３．申请专利一项：一种天然橡胶胶乳蛋白质的固定方法，申请号：２００９１００４１２９１．８ 三、在站期间获得的科研基金及承担的其它课题１．国家自然科学基金委面上项目，天然聚多糖衍生的水凝胶化因子及其性能研 究，２００９，２０１１，３６万，批准号２０８７４１１６，参加２．广东省自然科学基金面上项目，新型凝胶因子的设计制备与功能特性， ２００８．２００９，５万，批准号８１５１０２７５０１０００００４，参加 四、在站期间参加国内外学术会议情况第１４届反应性高分子学术讨论会，广州，２００８．１１．１７－１９ 五、在站期间承担教学和／或工作情况协助导师指导２００８年本科生毕业论文４名。 致 谢 首先，感谢我的合作导师张黎明教授在我博士后工作期间对我工作、生活等 方面给予的极大帮助和关怀。从导师身上我不仅学到了许多新的专业知识，而且 也学到了许多科研方法和做人的道理。在此，谨向张老师致以衷心的感澍！ 同时，感谢本课题组的杨立群老师、李伟老师、易菊珍老师和实验室全体同 仁的帮助与关心，和你们在一起使我在中山大学度过了两年的愉快时光。 最后，感谢国家自然科学基金和广东省自然科学基金对本研究的资助。