实验室生物安全水平标准
本章总结了传染性微生物和实验动物操作生物安全水平的基本要素。此分 级系统根据对实验人员、环境和社区所提供的保护程度按升序的方式划分。 BSL-1级适用于特性比较清楚、通常对健康成人不致病并且对实验室人员及环境潜
在危害性小的病原体。实验室并不一定要与大楼里的公共通道分开,操作通常在开放的
台面上进行,并遵循标准微生物学操作规程。特殊的防扩散装备或实验设施设计既非必
要,也非常规应用。实验室人员应参加过实验室操作培训,并且由在微生物学或相关学
科方面训练有素的科研管理人员对实验室工作进行监督。
以下标准和特殊操作规程、安全设备和设施适用于BSL-l级病原体。 第一节 生物安全1级(BSL-1) 二、标准微生物学操作规程
1.正在处理培养物或标本时,由实验室主管限制或控制外来人员进入实验室。 2.实验人员在处理完生物活性物质、脱下手套、离开实验室之前必须洗手。 3.工作区内不得进食、喝水、抽烟、处理隐形眼镜、使用化妆品以及贮存供人食用的
食物。带隐形眼镜的实验人员仍需配戴护目镜或面罩。食物应贮存于工作区外的专
用橱柜或冰箱内。
4,禁止使用口吸移液技术,应使用机械移液装置。
5.制定使用锐利器具如注射器针头、手术刀片等的安全保护方案。 6.仔细进行每一步操作,以减少飞溅物或气溶胶的产生。
7.工作台面应至少每天消毒一次,发生生物活性物质泼撒时应及时消毒。 8.所有培养物、贮存物及其他废物在排放前应先经过可靠的消毒,如高压灭菌处理。
需在实验室外邻近处进行消毒处理的物品,必须存放于结实耐用、防扩散的容器中,
从实验室运出时应密闭,并依据当地政府的相关规定进行安全包装后,才能从实验
室移出。
9.有传染性病原体时,应在实验室入口贴上生物危害的标志。标志上要包括所使用的
病原体名称以及研究者的姓名和联系电话。 10.昆虫和啮齿类动物管理方案参考其他规定。 三、特殊操作规程 无。
四、安全设备(初级屏障)
1,特殊的防扩散装置或设备,如生物安全橱,通常不需用于BSL-1级病原体的操作 中。
2.建议穿长实验服、外套或其他工作服以防止污染或开脏便服。
3.假如皮肤有伤口或有皮疹必须带手套。要备有替换的带滑石粉的乳胶手套。 4.在进行可能产生微生物或其他有害飞溅物的操作时,必须戴护目镜。 五、实验设施(二级屏障) 1.必须控制进入实验室的人员。 2.每个实验室必须有洗手池。
3. 实验室应易于清洗,不宜应用地毯和垫子。
4.工作台面应防水、耐热,且能耐受有机溶剂、酸、碱以及消毒工作台面和设备的化 学物质的腐蚀。
5.实验室家具应能盛放所需的器材和用物。凳子、柜子及设备间应留足空间以便于清 洁,
6.假如实验室有面向外部的窗户,应安装防蚊纱窗 第二节 生物安全2级(BSL-2) 一、概 述
BSL-2级与BSL-1级水平相似,适用于对实验人员和环境具有中等潜在危险的病
原体进行操作。它与BSL-1的不同点在于:
(1)实验人员受过处理病原体的特定训练.并且有经验丰富的专家指导; (2)正在进行实验时应限制人员进入;
(3)某些可能产生传染性气溶胶或飞溅物的操作,必须在牛物安伞橱或其他物理
防
扩散设备中进行。
以下的标准和特殊操作规程、安全设备和设施适用于BSI-2级病原体。 二、标准微生物操作规程
1.正在进行实验时,由实验室主管限制人员进入。
2.实验人员处理完牛物活性物质、脱下手套、离开实验室之前要洗手。 3.不得在工作区内进食、喝水、抽烟、处理隐形眼镜、使用化妆品。食物应贮存于上
作区外的专用橱柜或冰箱内。
4.禁止使用口吸移液技术,应使用机械移液装置。
5.制定安全使用和处理锐利器具如注射器针头,手术刀片等的方案。 6. 仔细进行每一步操作,以减少飞溅物或气溶胶的产牛。
7.工作台面在每天工作结束前至少应消毒一次,发生生物活性物质泼撒时应及时消毒。
8. 所有培养物、贮存物及其他废物在排放前,应先经过可行的消毒方法如高压灭菌法。
处理。要在实验室外邻近处进行消毒处理的物品,必须存放在耐用、防扩散的密闭
容器中,且必须依据当地及国家的相关规定进行包装后才能从实验室中移出。 9.昆虫和啮齿类动物管理方案参见其他规范。 二. 特殊操作规程
1.正在进行传染病原体操作时,实验室主管应跟制其他人员进入。通常,易感染或感
染后会产生严重后果的人员(如免疫缺陷或免疫抑制人员),不得进入实验室或动物
室。实验室主管应评估各种条件,并具有谁可以进入实验室或动物室并在其中工作
的最终决定权。
2.实验室主管应制定规章和程序,只有那些明确病原体潜在危险性并符合特定人室要
求(如经过免疫接种)的人员才能进入实验室。
3.如果使用了某些病原体,应在实验室入口处贴上生物危害的标志。包括的项目有:
所应用的病原体、生物安全级别、所需的免疫接种、研究者姓名及联系电话、实验
室内必须佩戴的所有个人防护设备以及离开实验室前的注意事项。
4.实验室人员须针对本室所应用的病原体或潜在的病原体,接受适当的免疫接种或检
测(如乙肝病毒疫苗或TB皮试)。
5.在适当的时候,根据所处理的病原体,对实验室或其他高危人员进行基准血清样本
收集并保存,然后依据所处理病原体的种类或实验室的职能,进行血清样本的阶段 性收集。
6.由实验室主管将生物安全程序与标准操作规程结合,或将其加入所采用的或为本实
验室特别制定的生物安全手册中。实验人员应了解特殊危险,并熟读与遵守操作规 程。
7.实验室主管应确保实验人员及辅助人员接受适当的培训,使其厂解工作中所涉及的
潜在危险、必要的预防措施以及暴露评估程序。实验人员应接受继续培训,以更新
知识和技能,从而适应于程序或规定的改变。
8.在使用锐利器具时,应特别谨慎。这些器具包括针头和注射器、玻片、移液器、毛 细管和刀片等。
(1)应限制使用针头、注射器或其他尖锐仪器,只在没有其他选择时应用,如胃肠
外注射、取血、从实验动物或带隔膜的瓶子中吸取液体。尽量用塑料制品代替 玻璃制品。
(2)只有带锁定针头的注射器(即针头与注射器连在一起,不准将针头从注射器上 移除)或一次性注射器能用于传染物质的注射抽吸。用过的一次性针头不能被 折弯、剪断、摔破、翻新使用,也不能从一次性注射器中移除,或在丢弃前用 手接触,应将它们小心地弃于一个方便放置、且防刺破的专用容器中等候处 理。非一次性锐器也必须放于有结实外壳的容器中,以便运输到消毒场所进行
处理,常采用的方式是高压蒸汽灭菌。
(3)可重新接入针头的注射器、无针系统及其他安全装置在适当的时候可应用。 (4)破碎的玻璃器皿不要马上用手处理,而应当使用适当的器具,如刷子、畚箕、 钳子和镊子等。装有污染针头、锐器或玻璃碎片的容器在丢弃前应先根据当地 及国家的环保规定进行消毒处理。
9.培养物、组织、体液标本或具潜在传染性的废物必须放于带盖的容器内,防止在收
集、处理、操作、贮存、转移或运输中发生扩散。
10.实验室设备和工作台面必须用有效的消毒剂,在进行完传染性物质的操作后进行常
规消毒,尤其在出现传染性物质意外喷撒或发生其他污染时,更应小心处理。污染
的设备在送去维修前或经过包装从实验室移出前,必须根据相应规定进行消毒。 11. 发生溢出事故造成传染性物质扩散时,应立即报告实验室主管。对这种情况要做医
疗评估、监测以及妥善处理,并记录存档。 12.与研究无关的动物不允许存放于实验室。 四、安全设备(初级屏障)
1. 以下情况需应用维护良好的生物安全橱(最好为二级)、其他适当的个人防护设备或 物理容器装置。
(1)操作中可能产生传染性气溶胶或飞沫。包括离心、研磨、混合、剧烈混合振 摇、超声粉碎、开启装有传染性物质的容器(其内压可能与外周压力不同)、 经鼻饲药以及从动物或鸡胚中收集传染性组织等。
(2)操作中涉及高浓度或大量传染性病原体。必须使用封口的转头或离心安全杯才
能在开放实验室离心,如果转头或安全杯是敞口的,则只能在生物安全橱内进 行操作。
2.必须在生物安全橱外进行微生物学操作时,需进行面部防护(护目镜、面罩、脸部
挡板或其他喷溅物挡板),以防传染性物质或其他危险物质喷到面部。 3.在实验室内应穿防护性专用工作服。离开实验区域进入非实验区域(如咖啡厅、图