书馆、办公室)前应脱下工作服。所有的丁作服应在实验室中处理或送至专门地方
清洗;绝对不要把工作服带回家。
4.当手有可能接触到传染性物质、污染的台面或设备时应戴于套,最好带双层手套。
当手会被污染时要将其处理,并在完成操作后或手套发生破损时将其脱掉。 —次性
手套不得冲洗、重新利用或触碰清洁台面(如键盘、电话等)。在实验室外不要戴
手套。应备有带滑石粉的乳胶手套作为替换手套。脱掉手套后应洗手。 五、实验设施(二级屏障)
1.贮存限制性病原体的实验室门窗必须加锁。
2.建立新实验室时应尽量远离公共区域并进行有效的隔离。 3.每一个实验室都应设置洗手池。
4.实验室设计应便于清洁。不宜在实验室内使用地毯和垫子。
5.工作台面应防水、耐热,且能耐受有机溶剂、酸、碱以及消毒丁作台面和设备的化 学物质的腐蚀。
6.实验室家具应能装载所需的器材和用品。凳子、柜子及设备间应留足空间以便于清
洁。椅子及其他装备应使用非布质材料覆盖以便于消毒。
7.安装生物安全橱的实验室内,其供气和排气引起的波动不应超出生物安全橱的容许
范围。生物安全橱的放置应远离以下场所,如门、开放的窗口、常有人通行的实验
室区域以及可能破坏设备的地方,从而维持其容许气流参数。 8,应有一个方便的眼部冲洗台。
9.照明应充足以便于所有操作,但要避免因光的反射而妨碍视线。
10.对通风无特殊要求。但在设计新实验室时,应考虑安装能提供内向气流而不会把循
环气流排放至室外的机械通风系统。实验室中有朝向外部的窗户必须安装防蚊纱 窗。
第三节 生物安全3级(BSL-3) 一、概 述
BSL-3级适用于临床、诊断、教学、科研或生产设施,其工作中涉及内源或外源性
病原体,吸入感染后可产生严重的或致死性的疾病。实验人员应受过特殊训练,掌握处
理致病性或致死性病原体的措施,并且在有经验的专家指导下进行操作。 所有传染物质的操作均应在生物安全橱或其他物理防扩散装置中进行,或由穿戴了
适当的个人防护服和防护设备的人员操作。实验室的设计和工程应符合特定要求。
然而,现有的一些实验室可能不具备BSL-3级所规定的所有实验室条件(如双门 进入区以及室内孔洞密封系统)。在此情况下,常规操作(如诊断程序,包括增殖病原
体以进行鉴定、分型以及易感性测定等)要求安全水平可通过在BSL-2级水平的基础
上实现,前提条件是:①实验室的废气须排至室外;②实验室的通风必须平衡以提供进
入室内的定向气流;③操作进行时限制无关人员的进入;④严格遵守为BSL-3级标准
所推荐的标准微生物学技术、特殊措施以及安全设备方面的规定。最后要说明的是,应
由实验室主管决定是否采用这种经修改的、非严格意义上的BSL-3级标准。 以下标准和特殊安全技术、设备和设施适应于BSL-3级相关的病原体。 二、标准微生物学操作规程
1.正在进行实验时,由实验室主管限制人贝进入。
2.实验人员处理完活性物质、脱下手套、离开实验室之前要洗手。
3.不得在工作区内进食、喝水、抽烟、处理隐形眼镜、使用化妆品。食物应贮存于工
作区外的专用橱柜或冰箱内。
4.禁止使用口吸移液技术,而应使用机械移液装置。 5.制定安全使用锐利器具的方案。
6.仔细进行每一步操作,以减少飞溅物或气溶胶的产生。
7.工作台面在每天千作结束前车少应消毒一次,发生活性物质泼撤时应及时消毒。
8. 所有培养物、贮存物及其他废物在排放前应先经过可行的消毒方法如高压蒸汽灭菌
法处理。要在实验室外面邻近处进行消毒处理的物质必须存放在耐用、防扩散的密
闭容器中,才能运出实验室。从BSL-3实验室排放的废物在移出实验室处理前应先 消毒。
9.昆虫和啮齿类动物管理方案参见其他规范。 三、特殊操作规程
1.进行实验时应关闭实验室的门。
2.实验室主管应限制无关人员进入实验室、接触操作及辅助操作人员。那些易于受感
染或感染后会造成严重后果的人员(如免疫缺陷或免疫抑制的人员)不得进入实验
室或动物室。实验室主管应评估各种环境,并决定谁可以进入实验室或在其中工作。
任何未成年人不得进入实验室。
3.实验室主管应制定规章和程序,只有那些明确病原体潜在危险性、符合特定入室要
求(如经过免疫接种)以及遵守所有入室和出室程序的人员才能进入实验室。 4.如果实验室或防扩散性容器中有传染性材料或受染动物,应在所有实验室和动物室
入口处张贴危险警告标牌及通用生物危害标识。生物安全警告标牌上应标明所使用
的病原体、实验室主管或其他主管的姓名和联系电话,并且标明进入实验室的具体
要求,例如,需免疫接种、带防护面具或其他个人防护措施。
5.实验室人员须针对本室所应用的病原体或潜在的病原体,接受适当的免疫接种或检
测(如乙肝疫苗或TB皮试),并且应定期进行相应的病原体检查。
6.在适当的时候,根据所处理的病原体,对实验室或其他高危人员进行基准血
清样本
收集并保存,然后依据所处理病原体的种类或实验室的职能,进行血清样本的阶段 性收集。
7.由实验室主管制定或采用适于本实验室的生物安全手册,采取的生物安全预防措施
应与标准技术规程相结合。实验人员应了解特殊危险并熟读与遵守操作规程。 8.实验室主管应确保实验人员及辅助人员接受适当的培训,使其了解工作中的潜在危
险、必要的预防措施以及暴露评估程序。实验人员应接受继续培训,以更新知识和
技能,从而适应于程序的改变。
9.实验室主管负责确保所有实验人员在进行BSL-3级水平相关病原体操作前,熟练掌
握标准微生物学操作和技术以及其他本实验室所需进行的操作,包括以前在处理人
病原体或细胞培养方面的经验、或参加过由实验室主管或其他精通微生物学安全操
作和技术的专家开办的特定培训课程。
lo.在使用锐利器具时应特别谨慎。这些器具包括针头和注射器、玻片、移液器、毛细 管和刀片。
(1)应限制使用针头和注射器或其他锐利器具,只有在没有其他选择时才应用,如
胃肠外注射、取皿、从实验动物或带隔膜的瓶子中吸取液体,尽量用塑料制品 代替玻璃制品。
(2)只有带锁定针头的注射器或一次性注射器能用于传染性物质的注射抽吸。用过
的一次性针头不能被折弯、剪断、摔破、翻新使用,也不能从一次性注射器中 移除、或在丢弃前用手接触,而应将它们小心地放于方便放置、防刺破的专用 容器中以便处理。非一次性锐器也必须放于有结实外壳的容器,以便运输到消 毒场所进行处理,常采用的消毒方式是高压蒸汽灭菌法。
(3)可重新接入针头的注射器、无针系统及其他安全装置在适当的时候可应用。
(4)破碎的玻璃器皿不要用手处理,应当使用适当的器具,如刷子、畚箕、钳子和
镊子等。装有污染针头、锐器或玻璃碎片的容器在丢弃前应根据当地和国家的 有关规定进行消毒处理。
11.所有涉及传染性物质的开放性操作应在生物安全橱或其他防扩散区间内的物理防扩
散装置中进行,不能在开放台面的敞口容器中进行。可应用塑料面防水纸巾擦拭法
清洁生物安全橱内的无孔工作台面。
12.实验室设备和工作台面必须用有效的消毒剂,在进行完传染性物质的操作后进行常
规消毒,在发生传染性物质意外喷撒或其他污染时,更应小心处理。 (1)发生传染性物质扩散事故时,应由专业人员或其他受过专门训练、懂得处 理高浓度传染物质的人员进行消毒、收集和清洁。应制定并张贴扩散后处 理程序。
(2)污染的没备在送去维修前或经包装运输前,必须根据当地和国家的规定进行 消毒。
13.培养物、组织、体液标本或具潜在传染性的废物必须放于带盖的容器内,防止在收
集、处理。操作.贮存、转移或运输巾发生扩散。
14.实验室内所有具潜在传染性的废弃材料(如手套、实验室工作服等)在对其进行处
理或重新利用前应进行消毒。
15.发生溢出事故造成传染性物质扩散时应立即报告实验室主管。对这种情况要做医疗
评估、监测以及妥善处理,并且记录存档。 16.与研究无关的动、植物不允许存放于实验室。
四、安全设备(初级屏障)
1.工作人员进入实验室时应着实验室防护服,如前面不开口的圆领长实驰服、清洁套
服或连裤工作服。在实验室外不得穿防护服。非一次性工作服送去清洗前应先消毒。