4) 分子中有复杂的赖氨酸衍生物交联存在
89. 原胶原分子中脯氨酸和赖氨酸的羟化作用与下列哪种物质无关？ 1) 氧 (O 2 ） 2) 维生素 C 3) 磷酸吡哆醛 4) 特异性的二氧化酶 90. 为什么说羟化作用增加了胶原三螺旋的稳定性？ 1) 因羟化作用促进其与水形成氢键 2) 因羟化作用增加了肽链之间的氢键结合 3) 因羟化作用降低了原胶原的熔点 4) 因羟化作用中和了赖氨酸残基上的电荷
91. 在胶原纤维中，分子间交联的形成与下列哪种物质无关？ 1) 羟赖氨酸 2 ）羟脯氨酸 3) 赖氨酸 4) 赖氨酰氧化酶 92. 下列哪个不是血纤维蛋白和胶原都具有的性质？
1) 都是以前体蛋白的形式合成的 3) 都可被专一性蛋白酶水解 2) 稳定构象的共价键相同 4) 都是水不溶性分子 93. 下列关于组织胶原酶的叙述哪一个是不正确的？ 1) 它们是以前体形式合成的，通常处于无活性状态 2) 与凝血酶的专一性相同 3) 胶原酶可使胶原三螺旋断开 4) 胶原酶属于金属蛋白酶 是非题
1. 组蛋白含组氨酸多，所以呈碱性。
2. 蛋白质都具有一级、二级、三级和四级结构。 3. 精蛋白含碱性氨基酸，特别是精氨酸多。
4. 肽都是由一个氨基酸的α - 羧基与另一个氨基酸的α - 氨基之间失去一分子水相互连接而成的化合物。
5. 肽和蛋白质都有双缩脲反应。
6. 蛋白质二级结构的形成是由于侧链 R 的相互作用。 7. 维持二级结构稳定的化学键主要是非共价键 8. 蛋白质是生物大分子，一般都具有四级结构。
9. 自然界中的蛋白质和多肽类物质均由 L- 型氨基酸组成。 10. 球状蛋白质的构象一般都是疏水基团朝向分子内部形成疏水核。 11. 在谷胱甘肽分子中，谷氨酸的β - 羧基参与肽键的形成。
12. 苏氨酸有 2 个不对称碳原子，因此有 2 个相互对称的光学异构体 L- 苏和 D- 苏。 13. 蛋白质四级结构的稳定依赖于非共价键和共价键。 14. 氨基酸因含有氨基和羧基，所以都溶于水。 15. α螺旋结构只存在于α - 角蛋白中。
16. 蛋白质的分子结构决定它的理化性质和生物功能。
17. 在肽平面中，只有α - 碳原子所连接的单键能够自由旋转。 18. 疏水氨基酸多位于球状蛋白质的分子外部。
19. 体液中很多蛋白质的等电点为 5 左右，所以这些蛋白质常以负离子形式存在。
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20. 强酸可使蛋白质变性，因此向变性的蛋白质溶液中加入过量的酸，变性加剧，沉淀增多。 21. 沉淀的蛋白质都已变性。
22. 用酸水解蛋白质可得到组成该蛋白质的所有氨基酸。
23. 氨基酸在 280nm 左右均有吸收，所以蛋白质在该波长下也有吸收。 24. 中性氨基酸的等电点一般为 7 。
25. 在工农医学实践中，要尽量避免蛋白质的变性作用发生。 26. 血红蛋白和肌红蛋白都有运送氧的功能，因它们的结构相同。 27. 氨基酸因含有不对称碳原子，所以都有旋光异构体。 28. 超二级结构指相邻二级结构的聚集体。
29. 亚单位本身具有三级结构，因此可表现特定的生物学功能。 30. 变性后的蛋白质溶解度降低，分子量改变。 31. 亲水氨基酸多位于球状蛋白质的分子表面。 32. 有四级结构的蛋白质才有生物活性。 33. 氨基酸与茚三酮反应都产生蓝紫色的化合物。 34. 纤维素柱层析法分离蛋白质是根据蛋白质的分子大小。 35. 肽键不能够自由旋转，因为它具有部分双键的性质。 36. 天然氨基酸都是α - 氨基酸。
37. 在生理 pH 范围内，氨基酸都带有电荷。 38. 处于等电状态时氨基酸的溶解度最小。 39. α螺旋结构只存在于球状蛋白质中。
40. 用末端分析法测定一肽链的氨基酸排列顺序时没有得到阳性结果，因此推知该肽为一环状结构的肽。 41. 某氨基酸水溶液的 pH 小于 4 ，推知该氨基酸的 pI 值必小于 4 。 42. 由于肽键所连接的六个原子处于同一平面上，所以肽键不能够自由旋转。 43. 变性蛋白不易被蛋白酶作用。
44. 变性蛋白的溶解度降低是由于分子表面的水化层（水膜）被破坏。 45. 蛋白质变性后，高级结构破坏伴随着分子量的降低。
46. 胶原的基本结构是由三条典型的（ 3.6 13 ）螺旋肽链组成的三股螺旋结构。 47. 典型的α螺旋为 3.6 13 螺旋，即氢键环内包含 3.6 个原子。
48. 组成蛋白质的氨基酸都是α - 氮基酸，因此有 D- 型和 L- 型两种异构体。 49. 变性蛋白质在一定的条件下都可以复性。
50. 只要多肽链倒数第二个氨基酸残基不是脯氨酸，那么羧肽酶 A 或 B 至少有一个可催化除去 C- 端的氨基酸残基。
51. 蛋白质的变性是三级结构以上的结构的破坏。
52. 一般来说，具有特定三级结构的蛋白质都有生物学活性。 53. 氨基酸是两性化合物，而蛋白质不是。
54. 水溶液或晶体状态的氨基酸都以两性离子形式存在。 55. 电泳法分离蛋白质是根据它们的极性性质。 56. 羧肽酶 A 和羧肽酶 B 都可切去 C- 末端的脯氨酸。 57. 蛋白质的二级结构不涉及侧链的构象。 58. 维持蛋白质高级结构稳定的力都是非共价键。
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59. 蛋白质的四级结构可认为是亚基的聚合体。 60. 生物大分子构象的改变必然涉及到共价键的变化。 问答题
1. 何谓蛋白质的等电点？其大小和什么有关系？
2. 经氨基酸分析测知 1mg 某蛋白中含有 45 μ g 的亮氨酸（ MW 131.2), 23.2 μ g 的酪氨酸 (MW 204.2) ，问该蛋白质的最低分子量是多少？
3. 一四肽与 FDNB 反应后，用 6mol/L 盐酸水解得 DNP-Val. 及三种其他氨基酸。当这种四肽用胰蛋白酶水解，可得到两个二肽，其中一个肽可发生坂口反应，另一个肽用 LiBH 4 还原后再进行水解，水解液中发现有氨基乙醇和一种与茚三酮反应生成棕褐色产物的氨基酸，试问在原来的四肤中可能存在哪几种氨基酸，它们的排列顺序如何？
4. 一大肠杆菌细胞中含 10 个蛋白质分子，每个蛋白质分子的平均分子量为 40000 ，假定所有的分子都处于α螺旋构象。计算其所含的多肽链长度？
5. 某蛋白质分子中有一 40 个氨基酸残基组成的肽段，折叠形成了由 2 条肽段组成的反平行β折叠结构，并含有一β转角结构，后者由 4 个氨基酸残基组成。问此结构花式的长度约是多少？
6. 某一蛋白样品在聚丙烯酰胺凝胶电泳（ PAGE ）上呈现一条分离带，用十二烷基硫酸钠（ SDS ）和巯基乙醇处理后再进行 SDS-PAGE 电泳时得到等浓度的两条分离带，问该蛋白质样品是否纯？
7. “－ Gly-Pro-Lys-Gly-Pro-Pro-Gly-Ala-Ser-Gly-Lys-Asn －”是新合成的胶原蛋白多肽链的一部分结构，问：
1) 哪个脯氨酸残基可被羟化为 4- 羟基脯氨酸？ 2) 哪个脯氨酸残基可被羟化为 3- 羟基脯氨酸？ 3) 哪个赖氨酸残基可被羟化？ 4) 哪个氨基酸残基可与糖残基连接？
8. 一五肽用胰蛋白酶水解得到两个肽段和一个游离的氨基酸，其中一个肽段在 280nm 有吸收，且 Pauly 反应、坂口反应都呈阳性；另一肽段用溴化氰处理释放出一个可与茚三酮反应产生棕褐色产物的氨基酸，此肽的氨基酸排列顺序如何？
9. 研究发现，多聚 -L-Lys 在 pH7.0 呈随机螺旋结构，但在 pH10 为α螺旋构象，为什么？预测多聚 -L-Glu 在什么 pH 条件下为随机螺旋，在什么 pH 下为α螺旋构象？为什么？
10.Tropomyosin 是由两条α螺旋肽链相互缠绕构成的超螺旋结构。其分子量为 70 000 ，假设氨基酸残基的平均分子量为 110 ，问其分子的长度是多少？
11. 某肽经 CNBr 水解得到三个肽段，这三个肽的结构分别是： Asn-Trp-Gly-Met ， Gly-Ala-Leu ， Ala-Arg-Tyr-Asn-Met ；用胰凝乳蛋白酶水解此肽也得到三个肽段，其中一个为四肽，用 6mo1/L 盐酸水解此四肽只得到 (Asp) 2 和 Met 三个氨基酸，问此肽的氨基酸排列顺序如何？ 12. 列举蛋白质主链构象的单元及它们的主要结构特征。 13. 试比较蛋白质的变性作用与沉淀作用。
14. 将一小肽 (pI=8.5) 和 Asp 溶于 pH7.0 的缓冲液中，通过阴离子交换树脂柱后，再进行分子排阻层析，那么 Asp 和小肽哪一个先从凝胶柱上被洗脱下来，为什么？
15. 从理论和应用上说明有机溶剂、盐类、 SDS 、有机酸等对蛋白质的影响。 16. 血红蛋白和肌红蛋白都具有氧合功能，但它们的氧合曲线不同，为什么？ 17. 为什么无水肼可用于鉴定 C- 端氨基酸？
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18.Anfinsen 用核糖核酸酶进行的变性一复性实验，在蛋白质结构方面得出的重要结论是什么？ 19. 蛋白质分离纯化技术中哪些与它的等电点有关？试述这些技术分离提纯蛋白质的原理。 20. 根据下列资料推出某肽的氨基酸排列顺序。
1 ）完全酸水解得到 Phe, Pro 、 Glu 、（ Lys) 2 、 Met 和 NH 3 2 ）用 FDNB 试剂处理得到 DNP-Phe
3) 用溴化氰水解此肽得到一个以高丝氨酸内酯结尾的二肽和一个四肽 4) 用胰蛋白酶水解可产生两个三肽
5) 用羧肽酶 A 或羧肽酶 B 处理都不能得到阳性结果
21. 高致病的厌氧细菌与气性坏疽 (gas gangrene) 病有关。它使动物组织的结构破坏。因该菌体内有胶原酶 (collagenase) ，它可催化? X-Gly-Pro-Y ? (X 、 Y 是任一氨基酸）结构中? X-Gly 之间的肽键断裂，问该酶使动物组织结构破坏的机理是什么？为什么它对细菌自身没有破坏作用？
22. 一血红蛋白的电泳迁移率异常，用胰蛋白酶水解结合指纹图谱分析发现它的β链 N- 端的胰蛋白酶肽段只有 6 个氨基酸组成，而正常血红蛋白β链 N 一端的胰蛋白酶肽段为 Val-His-Leu-Thr-Asp-Glu-Glu-Lys ，问： 1) 导致上述结果的原因是什么？
2) 请比较 HbA 、 HbS 及这个异常血红蛋白在 pH8.0 条件下电泳时的电泳迁移率。
23. 细菌视紫红质 (Bacteriorhodopsin) 是嗜盐细菌盐生盐杆菌紫色质膜的惟一蛋白质组分，所以称为细菌视紫红质。因为它含有视黄醛辅基 (retinal, 故是紫色的），犹如动物的视紫红质。细菌视紫红质的分子量为 26 000 ， X- 射线分析揭示出其分子中由 7 个平行排列的α螺旋肽段，且每一螺旋肽段都横跨细胞膜（膜厚度为 4.5nm ，即该蛋白横穿质膜 7 次之多，每一跨膜片段为一α螺旋）。其功能是作为光驱动的跨膜泵（质子泵），为细胞提供能量。
1) 计算每一螺旋肽段要完全横跨细胞膜最少要有多少个氨基酸残基组成此段螺旋？ 2) 估计此蛋白的跨膜螺旋部分占全部分子的百分数。
24. 某五肽完全水解后得到等摩尔的丙、半胱、赖、苯丙和丝氨酸。用 PITC 分析得到 PTH-Ser; 用胰蛋白酶水解得到一个 N- 端为 CySH 的三肽和一个 N- 端为丝的二肽；用靡蛋白酶水解上述三肽生成丙和另一个二肽，该五肽的结构如何？
25. 从 Bacillus brevis 菌的抽提物中获得的某肽具有抗菌性质，从下列资料推出此肽的结构。 1) 完全酸水解结合氨基酸分析产生等物质的量的亮、鸟、苯丙、脯和缬氨酸 2) 此肽的分子量约为 1 200 3) 羧肽酶不能水解此肽
4) 用 2,4 一二硝基氟苯处理结合酸水解并进行色谱分析，得到自由的氨基酸和一个 DNP- 鸟氨酸 5) 将此肽进行不完全水解、色谱分离结合顺序分析，得到下列的二肽和三肽： 亮一苯丙 苯丙一脯 鸟一亮 缬 - 鸟 缬 - 鸟 - 亮 苯丙 - 脯 - 缬 脯 - 缬 - 鸟
26. 原肌球蛋白 (tropomyosin) 的分子量为 93 000, 而血红蛋白的分子量为 65 000, 为什 么原肌球蛋白的沉降系数比血红蛋白的小？
27. 1) 为制备柠檬酸合成酶 (CS) ，将牛心组织匀浆后，为什么先经差速离心法分离出线粒体后再进行下一步的纯化？
2) 将线粒体裂解，向裂解液中加入硫酸铵到一定的浓度，然后离心保留上清液；向上
清液中再加人硫酸铵粉末至所需要的浓度，离心，倒掉上清保留沉淀，这些操作的目的是什么？
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3) 接着，将盐析所得到的柠檬酸合成酶粗制品对 pH7.2 的缓冲液透析，为什么不用水？透析的目的是什么？
4) 将上述处理所获得的 CS 粗制品进行分子排阻层析，在 280nm 下检测是否有蛋白被洗出；实验者保留第一个洗脱峰进行下一步的纯化，为什么？
5) 实验者将经分子筛层析所得到的 CS 样品又选用阳离子交换剂进行分离，上样平衡后，改用高 pH 的缓冲液洗脱，为什么？
28. 许多蛋白质富含二硫键，它们的抗张强度，黏性，硬度等都与它们的二硫键含量有关。 1) 蛋白质的抗张强度、硬度等性质与二硫键含量之间关系的分子基础是什么？
2) 多数球蛋白被加热到 65 ℃ 即变性丧失活性，但富含二硫键的蛋白质如牛胰胰蛋白酶 抑制剂（ BPTI ）在高温下长时间加热才变性。该抑制剂含 58 个氨基酸、一条肽链、有三对二硫键。热变性的 BPTI 在冷却的条件下可以恢复其活性，为什么？
29. 何谓疏水的相互作用？为什么说非极性溶剂、去污剂可使蛋白质变性？ 30. 为什么二磷酸甘油酸（ BPG ）可降低血红蛋白与氧的亲和力？
31. 将含有 Asp （ pI= 2.98) 、 Gly (pI=5.97 ）、 Thr （ pI=6.53 ）、 Leu (pI=5.98 ）、 Lys(pI=9. 74) 的 pH 为 3 ． 0 的柠檬酸缓冲液，加到预先用同样缓冲液平衡过的阳离子交换树脂柱上，随后用该缓冲液洗脱此柱，问这五种氨基酸将按何种顺序被洗脱？ 32. 从下列资料推出一肽的氨基酸排列顺序。 1 ）含有 Phe ， Pro ， Glu ，（ Lys) 2 2) Edman 试剂处理生成 PTH-Glu
3) 用胰蛋白酶、羧肽酶 A 和 B 处理都不能得到任何较小的肽和氨基酸
33. 多聚 L-Leu 肽段在二氧杂环己烷（ dioxane) 存在时可形成α螺旋结构，但多聚 L-Ile 不能，为什么？ 34. 一次突变，某蛋白质分子内的一个丙氨酸转变为缬氨酸导致该蛋白质生物活性的丢失；然而在另一次突变时，由于一个异亮氨酸转变为甘氨酸而使该蛋白质的活性恢复了，请分析可能的原因是什么？ 35. 甘氨酸是蛋白质进化中高度保守的氨基酸残基吗？为什么？
36. 在 pH7.0 时蛋白质分子中能与精氨酸侧链形成氢键或静电的相互吸引的侧链基团是哪些？
37. 多数蛋白质分子中蛋氨酸和色氨酸的含量较低，而亮氨酸和丝氨酸等的含量较高；有趣的是：蛋氨酸和色氨酸都只有一个密码子与之对应，而亮和丝等有多个密码子。请分析：一个氨基酸密码子的数目与它在蛋白质中出现的频率之间的关系及这种关系的生物学意义是什么？
38. 从蛋白质的一级结构可预测它的高级结构。下面是一段肽链的氨基酸排列顺序：“ L- A-H-T-Y-G-P-F-Z （ Q ）一 A-A-M-C-K-W-E-A-Z （ Q ） -P-D-G-M-E-C-A-F-H-R ”，问： 1) 你认为此段肽链的何处会出现β转角结构？ 2 ）何处可形成链内（ intra- ）二硫键？
3) 假定上述顺序是一个大的球蛋白分子中的一部分结构，指出 D, I, T, A, Z (Q) 、 K 氨基酸残基可能在蛋白质分子的表面还是内部？
39. 以丙氨酸为例说明为什么等电状态的氨基酸应以两性离子而不是中性分子的形式存在？ 40. 从下列资料推出一个肽的氨基酸排列顺序：
1 ）用 6mo1/L 盐酸完全水解此肽结合氨基酸，分析可知，此肽含有甘、亮、苯丙和酪四种氨基酸，且甘：亮：苯丙：酪 =2 ： 1 ： 1 ： 1
2) 用 2,4 一二硝基氟苯（ FDNP ）试剂处理此肽得到了 DNP- 酪氨酸，无自由的酪氨酸产生。
3) 用胃蛋白酶水解此肽得到两个肽段，一个二肽含苯丙氨酸和亮氨酸，一个三肽含酪氨酸及 2 个甘氨酸。
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