图7 IRMM的LD参考物相对回收率和95%置信度区间
2.3不能溯源到SI单位的物质的溯源性
欲达EN ISO溯源性的目的，第一主要的是在所选择的生物源性液体中定义被测量的量（分析物/物质），一旦成分被确定，保证它们的临床相关性。 然而对于数百种能够测量的量（估计500种），例如：所有的蛋白质和糖化蛋白—常用某种免疫化学技术测定—试验结果不以SI单位表示，常用任意单位的术语表示，例如世界卫生组织（WHO）的国际单位或生产商指定的质量单位。 对于不能溯源到SI单位的物质的溯源问题分四种情况分别讨论： 2.3.1有参考测量程序和参考物的项目，如HbA1c、酶活性，由IFCC工作组/分委员会提供参考测量程序（RMP）和参考物（RM）。
2.3.2只有参考测量程序而没有参考物的项目，该类项目以凝血因子的测定为多，凝血因子具一定义的生物学活性，常采用带“正常血浆”做为参考物的凝固试验（生物学效应），也被WHO承认，这类项目大约有30项。
2.3.3仅有参考物而无参考测量程序的项目大约有300项。在过去的30年基于实践需要的理由，人们已经做的正如EN ISO17511文件中所述：WHO采用“国际惯例参考物”来作为国际参考标准。这个方法是真实的，全球协议一致的。但诸如该参考物的性质是什么？尚不能完全被确定！该安瓿是依据目前的技术方法状
态在生物化学实验室实验台上制备的物质，自称它们是高纯的，但就糖化作用而论可能仍是不纯的，应被认为是纯化过程期间的某一类型或者可能是已被选择的某一类型。对生物源性液体中我们“测量”所选定的非溯源到SI的物质来讲，可以断定实际上全部可利用的参考物是代用品[3 ]。
这类物质多采用免疫学测定技术。兹以Roche公司的Elecsys电化学发光检测系统为例，列出检测项的参考物于表5：
表5 Roche公司采用参考物的项目如下表
指示领域
生育
项目
DHEA—脱氢表雄酮
FSH—促滤泡素 Prolatin—催乳素
Hcg—人绒毛促性腺激素
hCG+β IgE AFP CEA PSA TG
TSH—促甲状腺激素 T3
抗—TPO β-Crosslaps Osteocalcin
参考物
直接质量（向无DHEA-S的人血清中加入DHEA-S）
2ndIRP WHO参考标准 78/549 3rdIRP WHO 84/500 3rdIRP WHO 75/537 3rdIRP WHO 75/537
肿瘤标志物
甲状腺
骨
心肌 传染病
其它
WHO 75/502
WHO 72/225 1stIRP WHO 73/601
Stanford 标准90:10
人甲状腺球蛋白CRM457共同体参考局 WHO 2ndIRP（80/558）
直接质量（向无T3的人血清中加入T3） 抗甲状腺微粒体血清NIBSC 66/837
直接质量 加入的Colla I-bis-AC (906-913 isom)
直接质量 加入的Glu17,Gla 21,24-Osteocalcin
Digitoxin—毛地黄毒苷 超纯洋地黄的重量
Troponin T STAT 3rdGen 范围>0.2ng/ml参考人Troponin T Anti Hbe HBe—参考血清 81，PEI HBeAg HBe—参考抗原 82，PEI Anti HBs 1stWHO 参考标准 1977 HBsAg 1stWHO 参考标准 80/549 Anti HAV 2ndWHO 国际标准（NIBSC）97/646 Anti HBC-IgM HBc—Ig参考血清 84 PEI Anti HBC Anti HBc IgG参考标准 82，PEI HIV Ag HIVp24标准物 Dupont Insulin 1stIRP WHO 参考标准 66/304 Ferritin NIBSC 80/602 AntiTG 1st国际参考制剂 NIBSC 65/93
2.3.3.1血浆蛋白测定的溯源性
血浆蛋白测定尚无公认的一级参考测量程序，但有认证参考物。
IFCC血浆蛋白标准化委员会和BCR（共同体参考局）及CAP（美国病理学院）密切合作在开发14种血浆蛋白参考物中起到了领导作用。
由BCR认证命名为CRM470（认证参考物470）和美国命名为RPPHS（人血清蛋白参考制备物）批号91/06/19的参考物改进了不同方法，不同实验室间蛋白质测定结果的可比性。
1994年Bauder氏[19]报道：一种新的参考制备物14种血浆蛋白CRM470=RPPHS批号5。
基于CRM470参考物的成人参考范围见表6。
表6 CRM470参考物及其参考范围 血浆蛋白质
白蛋白
α-1-抗胰蛋白酶（α-1-抗胰蛋白酶抑制剂） C3C-补体 C4-补体 铜兰蛋白
C-反应蛋白（CRP）
α-1-酸性糖蛋白（类粘蛋白） 触珠蛋白 IgA IgG IgM
α-2-巨球蛋白
前白蛋白（transthyretin） 转铁蛋白
注：C3C在新鲜样本中可期望较低的参考范围
Roche公司采用Apo-A1 SP1-01和Apo-B SP3-07作为原始标准并因此可溯源到参考物值上。可参考：
0.9～1.8 0.1～0.4 0.2～0.6 ≤0.005 0.5～1.2 0.3～2.0 0.7～4.0 7～16 0.4～2.3 1.3～3.0 0.2～0.4 2.0～3.6
每个CRM470的参考范围（g/L）
35～52 0.9～2.0
Marcorina SM,Albers JJ,Henderson LO,Hannon WH。International Federation of Clinical Chemistry Standardization project for measurements of apolipoprotein A1 and B.Ⅲ .Comparability of apolipoprotein A1 values by use of international refrence material。ClinChem,1993,39:773-81和Ⅳ.Comparability of apolipoprotein B value by use of international reference material. Clin Chem,1994,40:586-92
2.3.4第四种情况是既无参考测量程序（RMP）又无参考物（RM）可以利用的项目，问题是最严重的。在这种情况下生产商选择了他们自己的他们之间的“候选参考方法（Candidate reference method）”或他们自己的“参考物”，并基于所选定的制剂在量上指定数值，这种选定的制剂常常不能被他者利用。以Roche公司Elesys参考系统为例。见下表7：
表7 Roche Elesys的部分候选参考方法
项目 候选参考方法
LH Enzymun LH
CA 19-9 Enzymun CA 19-9 CA 15-3Ⅱ Enzymun CA 15-3 PTH Nichols RIA Digoxin Abbott TDx+Tina-quant CK-MB Abbott IMx CK-MB
rd
Troponin T 3Gen Elesys Troponin T STAT 3rdGen Vitamin B12 BioRed Quantaphase Ⅱ RIA
许多蛋白质和糖化蛋白是无活性的，例如：CEA（癌胚抗原）和PSA（前列腺特异抗原），作为一种生物学作用（例如：是体内还是体外生物试验？）让人们认识测量的是什么确切的结构显然是困难的，因为免疫化学技术是通过结合到不同种类的抗体来测量的。这些抗体貌似类似但在一定程度上难以鉴别。 在生物源性的体液中，如血清或尿液中，欲知一种“物质”怎样存在？回答99%我们是不知道的！因为，以血清为例，是完整分子，异构体，糖化形式或碎片产物构成的一种高度不均一性的（不纯的）混合物。
就参考测量程序（RMP）和参考物质（RM）的可利用性而论，目前用于检测“物质”的情况列于表8。
表8 非追踪到SI“物质”的参考测量系统
参考测量程序
＋
参考物 ＋
“物质”的数目
10※
举例 HbA1c，酶
＋* － －
－ ＋ －
30 300 300
凝血因子
各种各样应用范围中的ISs
如：肿瘤标志物
注：※IFCC工作组/分委员会
*常带“正常血浆”做为参考物的凝固试验（生物学效应），也是WHO的ISs。
由表7中看出，现在有300项既无RMP又无RM，有约300项仅有参考物而没有参考测量程序。这些制剂在病人的体液中能够反映出什么样的特征？争论仍在继续。
2.4生物体液中量的定义方面的全球协议
很显然任何人都不能立即地解决这个问题。没有一个人、一个公司或一个国家能具有该权威和知识去解决这些问题。那么怎样能取得进展呢？那就是力所能及地达到国际或全球地一致和协议[3]。
首先是制造商、医学实验室和临床专家在常规与特定领域密切合作，对每一种分析物/物质进行讨论，生物源性体液中的分析物/物质的定义是什么？医学实验和临床专家的责任是确定、维护和改进疾病的定义诊断和/或确定监护。值得强调的是“物质”的定义对于诊断（例如：病原学诊断）与用于监护（例如：肿瘤标志物）可能是不同的（到目前为止，好不容易认可了这一点！）。
第二是执行过程。2002年6月成立了实验室医学溯源性委员联席会议（JCTLM）。得到了国际临床化学和实验室医学联合会（IFCC）、重量和测量国际局/重量和测量国际委员会（BIPM/CIPM）、世界卫生组织（WHO）和国际实验室认可委员会（ILAC）的支持。进一步说，体外诊断（in vitro diagnostic，IVD）工业行业协会[欧洲诊断产品制造商学会（EDMA）、美国高级医学技术学会（AdraMed）、日本临床试剂学会（JACR）]的代表们参加了欧洲实验室医学外部质量评价方案（EQALM）、美国病理学院（CAP）（注：二者均为外部质量保证/专业试验组织）和美国食品和药品管理局（FDA）、EU委员会（注：这二者均为管理体）以及参考物质的提供者，欧洲参考物和参考测量研究院—联合研究中心（EU—JRCIRMM）、美国标准和技术研究院（NIST）、日本保健技术学组织（HECTEF）的工作。建立了两个工作组，一组涉及参考测量程序和参考物，另一组涉及参考测量试验室网络。希望他们赶紧拿出合理的足够的办法，充分地回